临床微生物标本的正确采集及运送课件

,临床微生物标本的正确 采集及运送,2,一、临床微生物标本正确采集的重要意义 二、各种类型标本的正确采集和送捡,主要内容,标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当标本可导致假阴性、假阳性结果的出现。因此正确采集和运送微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。为此应正确采集各种细菌学标本。,临床微生物标本正确采集和运送的重要意义,血液标本的采集与运送,1、血液培养的送检指征 发热（38 ）或低温（36 ） 寒战白细胞增多（10 109/L,特别是有“核左移”）粒细胞减少（1 109/L ）血小板减少 皮肤、黏膜出血 昏迷 多器官衰竭 血压降低 呼吸加快以及肝脾肿大；关节疼痛；C反应蛋白和降钙素原升高等 患者出现以上一种或同时具备几种临床表现时可作为血培养的重要指征,血液标本的采集与运送,2、血培养标本的采集时间 尽可能在患者寒战或开始发热时采血 在患者接受抗生素治疗前采血 如患者已经使用抗生素进行治疗，应在下一次用药前采血,血液标本的采集与运送,3、血培养标本的采集 皮肤消毒程序：严格执行以下3步法：75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上，再用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径3cm以上；最后用75%酒精脱碘。如对碘过敏的患者，可用75%酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。 注意：不允许在消毒后按压静脉，除非戴有无菌手套,血液标本的采集与运送, 血培养瓶消毒程序：用75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s；用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精，然后注入血液。注入血液后，应轻轻颠倒混匀防止血液凝固。,血液标本的采集与运送,4、血培养采血量 由于每毫升血量中含菌量很小，血培养的阳性率直接与血样本容量有关，据报道每增加1ml血样本可使血培养阳性率上升3%，所以采血量要足够。 通常采血量与培养基之比以1:51:10为宜，成人一次采血1020ml平均注入两个血培养（需氧、厌氧瓶）中，婴幼儿采血量为全血量的1%（12ml），儿童采血量35ml。 当发生菌血症时，通常成人血液中含有的菌量小于1CFU/ml,而儿童血液中含有的菌量常超过100CFU/ml，所以婴幼儿、儿童采血量少于5ml时，不会影响培养的阳性率。,血液标本的采集与运送,5、血培养采集的次数 对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者，推荐同时或短时间间隔（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集2套血培养标本，做到“双瓶双侧”。如有必要，可同时或短时间间隔内从下肢静脉采血接种第3套培养瓶。在采集血培养后的2-5天内，不需要重复采集血培养。当采血量不能满足推荐的采血量时，应首先接种需氧瓶。 婴幼儿患者，需要同时采集2次（不同部位）血培养标本。,血液标本的采集与运送,有研究表明，只做1套血培养，病原菌的检出率仅为65%；2套血培养为80%；3套血培养为96%。对于成年患者的血培养，只采集单瓶是不允许的，因为单瓶的培养结果很难解释是致病菌还是污染菌。,血液标本的采集与运送,6、血培养标本的运送 血培养采集后应立即送到微生物室（常规运送时间少于2h） 如果不能立即送到微生物室，需室温保存或置于35 -37 孵箱中，切勿冷藏（因为有些苛养菌遇冷很容易死亡）。,血液标本的采集与运送,痰液标本的采集与运送,1、痰标本的采集时间及频率 在抗生素应用前采集；最好在清晨采集；多数患者在清晨痰较多，且含菌量也多，即使对痰量少的患者，也以清晨最为容易；对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2-3天；不建议24h内多次采集，除非痰液外观形状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。采集痰标本前应先进行口腔清洁。因为本身人体口腔内含有很多微生物，致使痰液咳出时易受到污染。,痰标本的采集与运送,2、痰标本的采集方法 自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔内大部分杂菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至无菌的广口瓶内，盖好盖子。患者痰液较深不易咳出时，可在咳痰前捶背、协助排痰。采集痰量不能少于1ml。,痰标本的采集与运送,下呼吸道肺泡灌洗，支气管刷洗，气管抽吸：将抽吸物或灌洗液直接放入痰杯内，刷出物放入1ml无菌生理盐水的痰杯中。 诱导咳痰：刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口，借助雾化器使患者吸入约25ml 3-5%的无菌盐水诱导咳痰。,痰标本的采集与运送,3、痰标本的运送 标本采集后需尽快（2h）送至微生物室，不及时运送可导致肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡。 如不能及时送达，应将标本置于4 冰箱保存，以免杂菌生长，但不超过24h。,痰标本的采集与运送,鼻咽拭子标本采集及运送,鼻咽拭子标本采集 采集标本时患者先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌鼻咽拭子由口腔进入，越过舌根到咽后壁或腭垂的后侧采集鼻咽红肿处，取材后小心退出，立即放入无菌试管内，避免触及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。,鼻咽拭子标本采集,化脓和创伤标本的采集与运送,采集方法 未破裂脓肿：在采集标本前，对患者病灶局部的皮肤或黏膜表面，用2.5%3%碘酊消毒、75%酒精脱碘，用无菌注射器将脓肿内容物吸出,然后切开脓肿、引流，采集的脓液（1ml）,并取部分脓肿壁置于厌氧运送装置或接种于厌氧培养基中立刻送检。注意不主张用拭子采集标本。,化脓和创伤标本的采集与运送,开放性病灶和脓肿：首先用无菌生理盐水清洗病灶表面的污染杂菌，用无菌棉拭子先蘸少许生理盐水，以保持标本的湿度，然后采取脓液及病灶深部的分泌物（最好从脓肿底部或脓肿壁取样）后置于无菌的容器中送检。最好采集2个拭子，其中一个用于细菌培养，另一个用于涂片革兰染色。,化脓和创伤标本的采集与运送,脓疱或水疱：用酒精消毒使之干燥，对于患儿用23号针头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本。,化脓和创伤标本的采集与运送,脓肿标本采集及运送过程中的注意事项 应尽可能在使用抗生素前采集标本，若患者在采集标本前已用抗生素，应在检验申请单上注明应用的抗生素，并在下次用抗生素前采集；在采集标本时，应注意无菌操作，以防带入与感染无关的皮肤定植菌；采集标本时应注意标本的性状、色泽及气味，为分离鉴定致病菌提供依据；标本采集后应在室温2h内送检，若不能及时送检，可保存在4 冰箱中，但不应超过24h。,化脓和创伤标本的采集与运送,尿液标本的采集与运送,1、尿液培养的送检指征 有典型的尿路感染症状：如尿急、尿频、尿痛 肉眼脓尿或血尿 尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性 不明原因的发热，无其它局部症状 留置导尿管的患者出现发热 膀胱排空功能受损 尿道口有脓性分泌物 泌尿系统疾病手术前,尿液标本的采集与运送,2、尿标本采集方法：尽量取早晨第一次尿液 清洁中段尿采集法 女性：采集前先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口，用灭菌纱布擦拭，用手指将阴唇分开排尿，留取中段尿送检 男性：用肥皂水翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，用灭菌纱布擦拭，取中段尿送检,尿液标本的采集与运送,导尿法 直接导尿：将会阴局部清洗后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡用。 留置导尿：通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液。 注意：不能从集尿袋的下端管口留取标本，集尿袋内的尿液也不能用于培养。,尿液标本的采集与运送,膀胱穿刺采集法 采用耻骨上膀胱穿刺取尿。这种方法是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法。因有一定的痛苦，患者难以接受。,尿液标本的采集与运送,3、尿液标本运送 收集中段尿510ml，及时送检 室温保存下不得超过2h，否则应置于4 冷藏保存时间不得超过8h。,尿液标本的采集与运送,女性生殖道标本采集,阴道及宫颈分泌物采集 宫腔内标本采集 羊膜腔感染时可经腹壁羊膜穿刺抽取羊水或经子宫颈插管抽取羊水进行细菌培养。但经子宫颈插管抽取羊水进行细菌培养易受阴道或子宫颈部位细菌污染，临床应用价值有限。 怀疑有急性宫腔内感染时，原则上不采取宫腔分泌物，以免引起感染播散；必要时用灭菌导管抽取，导管外套一层保护膜，经子宫颈插入宫腔后再刺穿保护膜抽取分泌物。,女性生殖道标本采集,穿刺液标本的采集及运送,1、标本采集 由临床医生采集（无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本） 胆汁采集分三种方法：十二指肠引流法（以B胆汁来自胆囊，做细菌培养意义较大）。胆囊穿刺法 手术采取法。取标本约2ml装入无菌密封容器送检。 其它穿刺液的采集：由临床医生采集标本510ml注入无菌密封容器内送检（为防止凝固，可先加入灭菌肝素），也可将标本直接加入血培养瓶中送检。心包液、关节液、鞘膜积液采样量为15ml。,穿刺液标本的采集及运送,2、标本运送 采集后应正确盖好，防止泄露或容器外部留有残留物。 标本应在15min内送检。若不能及时送检室温保存不超过24h。,穿刺液标本的采集及运送,粪便标本的采集与运送,1、采集指征： 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养： 粪便涂片镜检白细胞 5 /HP 体温38.5 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人 来自肠道传染疫区的患者,粪便标本的采集与运送,2、粪便标本的采集方法 自然排便采集标本时，取有脓液、粘液、组织碎片部分的粪便 1-3克（花生米大小） 液体粪便取絮状物，