T790M血液检测：机遇与挑战.pptx

仅供医疗专业人士参考,T790M血液检测：机遇与挑战,EGFR突变型肺癌生物学和靶向治疗认知时间表,Tan CS, et al. Lancet Oncol. 2015 Sep;16(9):e447-59.,基因检测改变了我们的临床实践,观念改变：检测已经成为必须,腺癌、大细胞癌和组织学 类型不明确型NSCLC： 应进行EGFR突变、ALK、ROS1、广泛分子分析 (BRAF V600E、MET扩增和外显子14点突变、RET重排、HER2突变) 、PD-L1检测,麟癌应该进行EGFR突变和ALK检测尤其在非吸烟 人群或小标本或混合病理类型的标本中，其它检测 包括广泛分子分析 (BRAF V600E、MET扩增和外显子14 点突变、RET重排、HER2突变) 和PD-L1检测,分子检测技术也随之不断发展,一、从组织检测发展到血液检测,二、从定性检测到未来定量检测,三、从单基因检测到多基因检测平台,已知位点 定性检测,已知位点 定量检测,T790M突变检测的标本类型,Pirker R, et al. J Thorac Oncol. 2010;5(10):1706-1713. Savic S, et al. Br J Cancer. 2008;98(1):154-60. 中国非小细胞肺癌血液EGFR基因突变中国专家共识.中华医学杂志.2015;95(45):3721-3725.,T790M突变检测的标本类型血液检测,Pirker R, et al. J Thorac Oncol. 2010;5(10):1706-1713. Savic S, et al. Br J Cancer. 2008;98(1):154-60. 中国非小细胞肺癌血液EGFR基因突变中国专家共识.中华医学杂志.2015;95(45):3721-3725.,“ 液体活检”入围2015年度MIT“十大突破技术”,/lists/technologies/2015/,Magic Leap,Nano-Architecture,Car-to-Car,Project Loon,Liquid Biopsy,Megascale Desalination,Apple Pay,Brain organoids,Supercharged Photosynthesis,Internet of DNA,概要,T790M血液检测：机遇 Biomarker类型 临床应用 T790M血液检测：挑战 T790M血液检测：优化,血液检测Biomarker-ctDNA & CTC & Exosome,循环肿瘤细胞 (CTC)：存在于外周血中各类肿瘤细胞统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶脱落，进入外周血循环系统 循环肿瘤DNA (ctDNA)：由肿瘤细胞释放到外周血中的DNA片段，来源于所有荷瘤部位，具有含量低，半衰期短，均质性等特点 外泌体 (Exosomes)：由细胞分泌或者脱落的囊状小泡，直径约30-100 nm，携带肿瘤细胞DNA，RNA和蛋白质等信息,Wang JY et al., Front Med, 2017, 2095-0225 Jia SY et al., Oncotarget , 2017, 8,33,循环肿瘤DNA (ctDNA)的来源与功能,ctDNA来源 : 1. 凋亡坏死肿瘤细胞; 2. 正常生长肿瘤细胞; 3. 循环肿瘤细胞 ctDNA功能 : 基于Oncogenic transformation方式在肿瘤转移方面发挥重要作用 ctDNA分布 : 广泛存在于血浆，脑脊液，唾液，尿液等，均已得到相关研究证实,Cheng FF et al., Oncotarget , 2016, 7, 30 Di Meo et al., Molecular Cancer, 2017, 16,80,循环肿瘤DNA(ctDNA)的特性,来源于血液ctDNA的信息分类：定量分析和序列分析,Jonothan C. M. Wan et al Nature Review Cancer (2017),血液ctDNA检测可用于肿瘤早期诊断,Phallen J et al., Sci Transl Med, 2017, 9,血液ctDNA检测可用于临床疗效评估,Xue. Y, Jie.W, et al,Oncotarget, 2016, 7, 15.,血液ctDNA检测可用于治疗动态监测,T790M 和 L858R在泰瑞沙治疗后1个月内已无法检测到； 影像学证实泰瑞沙耐药时，T790M和原发L858R重新出现,EGFR T790M 在影像学证实泰瑞沙耐药时检测不到，但原发19del的水平升高； 进展期活检发现MET扩增,Chia PL et al., Lung Cancer. 2016,98:29-32.,概要,T790M血液检测：机遇 Biomarker类型 临床应用 T790M血液检测：挑战 T790M血液检测：优化,挑战1：血液标本相对脆弱， 非常容易受到外界干扰，造成假阴性,挑战2：不同试剂盒对cfDNA提取效率 及cfDNA片段捕获能力不同，影响检出率,Sober L et al., J Mol Diag, 2016 Normanno N et al., Oncotarget, 2017, 8, 7,挑战3：AURA回顾性研究显示血检敏感性和特异性仅70% 提示TKI耐药患者仅做血检不足以判断T790M突变状态,Oxnard GR, et al. J Clin Oncol. 2016 Oct 1;34(28):3375-82.,较Cobas组织T790M检测，Cobas血液T790M检测存在一定比例假阴性,Cheng Ying,et al. 2017 CSCO,ASTRIS研究：中国晚期NSCLC EGFR TKI耐药后T790M突变率,主要终点：OS 次要终点：PFS，安全性 T790M检测标本：组织或血液标本(PD后获取的标本,标本获取至标本检测最好不要超过60天) T790M检测方法：中心实验室检测，cobas EGFR Mutation Test v2,T790M血液检测突变率27.5% 组织检测突变率62.8%,挑战4：ctDNA检测平台难以兼顾检测敏感性和基因检测范围,Zhang, et al. 2017 WCLC, abs:JCES 01.25,ADELOS研究：对比4中血浆ctDNA检测T790M的检测平台,EGFR T790M占EGFR-TKI获得性耐药的5060% 血浆ctDNA代表一种有前景的T790M供选择的检测方法 奥希替尼是一种具有CNS活性的第3代EGFR-TKI，可有效地并选择性地抑制EGFR突变和EGFR T790M耐药突变 ADELOS研究(NCT 02997501)目的是评估4种利用血浆ctDNA检测T790M的检测平台，从而验证它们在中国人群的临床应用,挑战5：血液检测难以发现的一些耐药突变,11例c-Met 过表达患者接受TKI+c-Met 抑制剂治疗 缓解率(RECIST)：45.5% 疾病控制率：54.5% 疾病进展：45.5% 其中5例c-Met过表达且不伴T790M的患者，疾病控制率为100%,免疫组化/FISH用于MET过表达/扩增检测,Gou LY, et al. 2015 ASCO Abstract 8091.,挑战6：血液ctDNA检测对SCLC诊断束手无策,Camidge, D.R. et al. Nature review, Clinical Oncology Augest,2014,不可忽视的SCLC转化,概要,T790M血液检测：机遇 Biomarker类型 临床应用 T790M血液检测：挑战 T790M血液检测：优化,T790M血液检测平台有优化关键问题1： 建立严格的SOP，以实现T790M血液检测全流程质量管理,Camidge, D.R. et al. Nature review, Clinical Oncology Augest,2014,血液标本采集和处理过程标准化,采血时机,采血管,分离时间,分离过程,储存温度,Malentacchi F et al., Clin Chem Lab Med, 2015, March Normanno N et al., Oncotarget, 2017, 8, 7,分子检测申请单设计与填写规范化,有效区别初治患者和耐药患者，区隔检测结果； 排除不良影响因素，提供更准确检测结果； 了解临床影响因素，更好解释初治/耐药检测结果； 探索某些临床因素对于耐药检测结果影响； 完善患者信息管理，推动肺癌多学科治疗；,血液检测报告信息全面化,规范化的分子检测报告信息的5项要素,患者基本信息与样本信息 检测项目与方法学描述 突变位点命名标准化 (HGVS) 检测结果的正确临床解读 检测报告签名与日期, ,中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识(2016版) EMQN External Quality Assessment Scheme for lung caner (2015),T790M血液检测平台优化关键问题2： T790M血液检测需要使用NGS等更高灵敏度检测方法,中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识(2016版) EMQN External Quality Assessment Scheme for lung caner (2015),T790M血液检测平台优化关键问题3： 不同检测标本、平台临床应用的协作配合,1. Pirker R, et al. J Thorac Oncol. 2010;5(10):1706-1713. 2. Savic S, et al. Br J Cancer. 2008;98(1):154-60. 3. 中国非小细胞肺癌血液EGFR基因突变中国专家共识.中华医学杂志.2015;95(45):3721-3725.,总结,T790M血液检测：机遇 血液ctDNA检测可用于肿瘤早期诊断、临床疗效评估及治疗动态监测 T79