设计性机械损伤对马铃薯生理性质的影响.DOC

设计性实验-机械损伤对马铃薯生理性质的影响成员：2009236105郭银炫 2009236107苏彩婉 2009236108钟丽桃 2009236116钟玉娴 2009236117陈毓文 2009236123丁丹丽（一）刀器割伤对马铃薯多酚氧化酶（PPO）活性测定一、实验目的：掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、实验原理：多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。三、器材与试剂1、仪器：低温离心机、分光光度计2、试剂：0.1 molL儿茶酚、pH 7.2磷酸缓冲液3、材料：马铃薯四、实验步骤：1称取马铃薯0.5克，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，少许PVP，研磨匀浆，转移到离心管，再用2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液。4 4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。2在试管中，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，1.5mL 儿茶酚（邻苯二酚）以及1mL 粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。3A值测定：加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定反应体系的A值，每隔10秒记录一次，共记录5次。4计算酶活力。按下式计算PPO活性U/min gFW A值增加0.001定义为一个酶活力单位。5.刀割伤后每隔1个小时，按上述步骤重复做三次五、实验报告：时间（h）0123完好马铃薯A值0.3120.4150.5230.326损伤马铃薯A值0.1330.1230.1200.127六实验结果：马铃薯机械损伤后，多酚氧化酶活性降低 随着时间的增长，多酚氧化酶的活性越来越低七实验分析及讨论1.完好马铃薯在放置三个小时后的PPO活性显著变大答：,PPO活力可能与马铃薯的大小有关，马铃薯体积越大，酶量较多，酶活力越大2,刀割放置四个小时后，马铃薯PPO活力微升答：取材部位较前三次深入表皮，而PPO活力与马铃薯的选材部位有关，靠近表皮的PPO易被氧化，所以活力比中间部位的马铃薯的PPO的活力小3，刀割后，促进马铃薯氧化褐变，所以酶活力越来越低（二）失重率与呼吸强度的测定一、 机械损伤对马铃薯失重率的影响（1）各取一个完好和刮伤的马铃薯用电子天平称重，每隔6小时称量一次，记录数据。（2）实验数据：表一：相隔时间（质量（g）样品0h6h12h24h完好的马铃薯89.0288.9688.7788.73损伤的马铃薯68.0367.6766.4464.22表二：相隔时间失重率样品0h6h12h24h完好00.07%0.28%0.32%损伤00.53%2.33%5.6%图一：机械损伤对马铃薯失重率的影响注：纵坐标是失重率(3)结论：机械损伤对增强马铃薯的蒸腾失水，导致马铃薯的质量减少，失重率比完好的大。二、机械损伤对马铃薯呼吸强度的影响（1）本实验以完好的马铃薯和刮伤的马铃薯做对比试验，采用静置法测定它们呼吸强度的变化，每隔6小时测定一次，记下数据，分析机械损伤对呼吸强度的影响。（2）实验材料与试剂0.4mol/L氢氧化钠、0.2mol/L草酸、饱和氯化钡溶液、1%酚酞指示剂、凡士林。干燥器（直径25cm）、滴定管架、25mL酸式滴定管、150ml三角瓶、10cm培养皿、10ml移液管、洗耳球、天平。（3）实验数据与结果：表三：记录数据相隔时间体积（ml）试样0h6h12h18h24h完好的马铃薯8.248.278.288.318.30刮伤的马铃薯8.278.198.248.298.29空白试验8.398.408.398.418.40表四：马铃薯呼吸强度的变化相隔时间呼吸强度（mg/kg.h）样品0h6h12h18h24h完好的马铃薯15.0512.8510.889.919.91刮伤的马铃薯15.0527.1619.5015.6114.31图二：完好和刮伤的马铃薯呼吸强度的变化注：纵坐标是呼吸强度，单位是mg/(kg.h)（4）结论：马铃薯是非跃变型果蔬，其呼吸强度在成熟期间随时间的增长而不断下降，而受到机械损伤的马铃薯刚开始呼吸强度不正常的增加，到达一定的高峰之后，随着时间的增长，其呼吸强度也逐渐降低，到达一定的程度后，变化幅度小，几乎不变。所以在果蔬贮运期间要尽量避免机械损伤，果蔬受到机械损伤，呼吸强度增强，体内有机物质消耗快，降低果蔬的贮藏寿命。（三）马铃薯总可溶性固形物含量的测定（折光仪法）一，实验目的 测定完好的马铃薯与损伤后的马铃薯固形物含量变化情况。2、 药品与器材马铃薯（一个完好的，一个有机械损伤的，蒸馏水； 手持式折光仪、烧杯、滴管、擦镜纸（或棉花）。三、操作步骤1、仪器的校正 打开手持式折光仪盖板，用擦镜纸或棉花小心擦干棱镜玻璃面。在棱镜玻璃面上滴2滴蒸馏水，盖上盖板。朝向光源明亮处，于水平状态，从接眼部处观察，检查视野中明暗交界线是否处在刻度的零线上。若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋，使分界线面刚好落在零线上。 2、打开盖板，将水擦干，在棱镜玻璃面上滴2滴马铃薯汁，朝向光源明亮处观测，读取视野中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（%）。 3、每个样品重复测定三次，取其平均值，以百分数计算。 4、连续使用仪器测定不同试样时，在每次测完后，用清水冲洗洁净再用干燥的镜纸擦干净，才可继续进行测试。测试结束后，必须擦净镜身各部分。4 实验数据 时间段马铃薯种类 0时 6小时 12小时 24小时 完好的马铃薯 7.88.18.28.4损