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文档简介

3.你能用什么样的实验证明模板mRNA只能识别tRNA而不是氨基酸？ 4.已知大肠杆菌DNA总量为4.4x106bp, Cot1/2=9, 有一生物，其Cot1/2=3x10-1，求其细胞中的DNA总量。 三、问答题 1 .说说DNA组装成染色体的主要过程。 2 .写出肽链合成起始、延伸和终止三个阶段的主要步骤和主要因子。,4、从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞，并筛选出已经得到扩增的目的基因。 5、将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。,DNA的脉冲电泳技术（PFGE pulse-field gel electrophoresis）,无规则,a,b,c,a,b,a,超大分子，不能有效地被一般电泳所分离。,a、b表示每次电泳的不同方向，c为DNA分子的最终移动方向。,应用脉冲电场技术，可分离高达107bp的DNA分子。,主要步骤： 用32P标记DNA双链末端，并用RE切去一端； 加入细胞特定周期蛋白质提取物，温育； 加入适量DNaseI或硫酸二甲酯六氢吡啶，使DNA链发生断裂。 这一反应中，DNaseI或硫酸二甲酯的用量非常关键，要保证一条链只发生一次断裂！,如果因某个G残基的甲基化作用而阻止了蛋白质与DNA的结合，那么，六氢吡啶对这个甲基化G残基的切割作用，就只能在没有蛋白质结合的DNA中观察到。,（4）差别分析法 (RDA法，即 Representational difference analysis）； （5）酵母双杂交体系Two-hybrid system； （6）图位克隆法（map-based cloning）与染色体步移 （genomic DNA Walking）。,P.Liang等人设计合成了全部12种不同的引物，用以反转录mRNA，合成第一链cDNA。这种引物通常叫作3-端锚定脱氧核苷酸引物，并用5-T11MN或5-T12MN通式表示。其中M为除了T以外的任何一种核苷酸（即A、G或C），而N则为任何一种核苷酸（即A、G、C或T），故MN共有12种不同的排列组合方式。,因为试验对象（Tester）和供试探针（Driver）在接受差式分析前均经一个4碱基切割酶处
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