提高抗酸性染色检出率的经验谈.ppt

提高抗酸性染色检出率的经验谈,结核病之诊断,病史、症状、医师之理学检查 结核菌素皮肤试验 在高感染率或卡介苗普及率之国家并不适用：台湾。 胸部X光检查 凭藉医师之专业及经验，一致性并不高。 结核菌学检查 较具科学且较为简易之方法，惟训练不足时，伪阳性或 伪阴性之发生会影响诊断之正确性。 病理学检查 属侵入性，不容易作。 其他 PCR、血清学检查等。,Causes significant morbidity and mortality in the world,From Talaro, Fundations in Microbiology, 4th ed., 2002.,morbidity,mortality,全球现况,全球每年约有300万人死于结核病 约300万人死于爱滋病，其中爱滋病人死于结核病约占1/3。 全球约有1/3 人口已受结核菌感染 每年约有 800 万人新发生结核病， 其中台湾约占 15,000 人。,卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况,台湾地区新发生的结核病人 每年大约有一万五千个新病例发生。 其中五千多人是有传染性的结核病人。 病人如不规则接受治疗，结核菌将产生抗药性，以致有效的药物越来越少，结核病的治疗越来越困难。 结核病的防治 迅速治愈病人，切断传染源，结核病的防治成效才会大幅度改善。,卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况问题分析,痰液检体的品质 采取方式不正确，造成检验结果不正确或无法检验。 痰液检验套数不足 标准应连续采取三套，目前还是有只采取一套送检。 痰抹片制作品质不良 涂抹太厚太薄或涂抹范围不够。 痰液涂片、培养方法不一致 卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况问题分析,医检师认知 医检人员认为结核菌检验的风险较高，大多数医院皆采用轮调方式，致操作技术不稳定，结果歧异性大。 结果报告发出时间过迟 无法提供医师适时的诊断进行妥适的治疗。 健保给付不敷成本，致医疗院所检验意愿低落 卫生署疾管局结核病组调查,结核菌检查时效性,美国疾病管制局(CDC)公布 抗酸性染色抹片显微镜检查结果，应于24小时内报告给临床医师。 结核菌培养及鉴定结果，应于1014日内提供给临床医师。 结核菌药物敏感性试验结果，应于1530日内提供给临床医师。,分枝杆菌检查的种类和特性,提高结核病检验品质,检验流程标准化 编辑结核菌检验手册提供全国各实验室作为 检验参考指引。 检验流程统一标准化，制作SOP供实验参考执行。 办理操作训练及研讨会。 教育宣导 加强验痰普及率，提高痰液检体品质。 实验室品管辅导管理 实地访查辅导 卫生署疾管局结核病组调查,影响抗酸性抹片检查检出率,检体量 咳痰品质 口水或脓性痰液。 抹片制作方法 直接抹片法(Direct smear)。 厚缩抹片法(Concentration smear)。 抹片染色法 Ziehl-Neelsen染色法(热染法)。 Kinyoun染色法(冷染法)。 萤光染色法。,抗酸性抹片检查之检体量,痰液检体：3mL。 胃内容物：510mL。 脑脊髓液：最少2mL。 胸水、腹水、心包膜液：最少20mL。 支气管刷取液(BALF，BW)：最少5mL。 血液：35mL。 其他检体：脓、组织。,卫生署疾管局结核菌检验手册,痰液品质,痰液品质的好坏是为了确保抗酸性抹片检查的信赖度 采痰前的患者卫教 喀痰前尽可能除去口腔内常在菌的影响(刷牙、漱口)。 尽量喀取深部的痰液。 必要时使用高张生理食盐水(35%)喷雾器诱发咳痰。,痰液的品质管理,记录肉眼外观对咳出痰液的品质评价 Miller & Jones分类法 M1：只有口水和黏液性的痰液。 M2：黏液性痰液中含少量的脓性痰。 P1：脓性痰液约占1/3。 P2：脓性痰液约占2/3。 P3：脓性痰液占2/3以上。 Roelsgard E等人研究发现脓性部份的痰液比口水或黏液痰液检出率相差19倍,痰涂片检测分枝杆菌方法,防止感染 抹片制作过程一律在生物安全操作箱中进行。 标准抹片制作 涂抹范围：长20mm 宽15mm。 直接抹片法(Direct smear) 制作方便、快速，急作时才使用。 敏感性低(1104/mL)。 厚缩抹片法 操作麻烦费时。 提高检出率。,影响抗酸性抹片检查检出率,抹片染色法 Ziehl-Neelsen染色法(热染法)及Kinyoun染色法(冷染法)敏感性 5,00010,000 bacilli / mL 。 萤光染色法敏感性 1001,000 bacilli / mL。,痰涂片结果判读,分枝杆菌检查实验室品管,痰涂片内部品管 试剂品管 设备(施)品管 操作步骤 检体收集报告工作流程 人员训练与再教育品管 品管月报表,外部品管(EQA) 医事检验学会 疾病管制局 国际组织(CAP),提高抗酸性染色检出率的经验 涂抹标本的评估,提高痰液直接抹片检出率之经验,使用时机：急作时 适用单位：无法制作厚缩抹片法之检验室 制作注意事项： 使用尖端折断之竹棒。 挑取具有脓性部份的痰液制作抹片。 抹片制作范围：20mm 15mm。 使用热染法染色。 细心观察全部范围。 阴性抹片查核(10%)。,提高液体性直接抹片检出率之经验,适用之检体：尿液、体液、胃内容物、支气管洗净液 离心机之使用：3000 rpm, 20分钟 抹片制作范围：20mm 15mm 染色法：同前 注意事项： 尿液检体：连续三天送验。 胸水检体：革兰氏染色检查若发现有许多杂菌时，应特别注意抗酸菌之观察(2030%)。,提高C.S.F直接抹片检出率之经验,医师若强烈怀疑结核菌脑膜炎，建议细菌室可将 CSF检体多分装一支静置 其中一支检体依照正常程序进行细菌学检查 另一支静置之检体观察是否有产生fibrin 小心将fibrin倒在玻片上(千万不可使用接种环挑取fibrin)。 使用无菌drop或无菌纱布吸取fibrin周围多余之液体。 静置抹片，使其乾燥固定。 进行染色及镜检。,提高组织检体直接抹片检出率之经验,将组织置入无菌研钵中，