生化基本技能训练.ppt

生化实验基本技术,生物化学与分子生物学实验教学中心,生物化学与分子生物学实验教学中心,基本技术操作内容,生物化学与分子生物学实验教学中心,常用玻璃器皿的洗涤方法,使用过的玻璃器皿洗涤（常规洗涤方法） 倒掉内容物自来水冲洗温肥皂水冲洗自来水冲洗蒸馏水冲洗三次 新购置的玻璃器皿洗涤 2%盐酸浸泡数小时自来水冲洗常规洗涤 血清堵塞刻度吸管洗涤 7.5mol/L尿素清洗常规洗涤 油污烧杯试管洗涤 去油脂常规洗涤 （去油脂方法：将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，置100烤箱中烘烤半小时，使油脂溶化由厚纸吸收，再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷，即可除去油脂）。,生物化学与分子生物学实验教学中心,污染玻璃器皿洗涤 浸泡在杀菌剂（5%煤酚皂液）中过液常规洗涤 染料污染玻璃器皿洗涤 清水清洗3%盐酸乙醇溶液清洗常规洗涤 微量元素测定用玻璃器皿洗涤 单独清洗稀盐酸浸泡去离子水冲洗常规洗涤 量器类玻璃器皿洗涤 立即清洗晾干铬酸洗液浸泡46h自来水冲洗蒸馏水冲洗 比色杯洗涤 自来水冲洗蒸馏水冲洗 （洗不净可用3.5mol/L HNO3溶液或（0.30.6）mol/L HCl冲洗，禁用毛刷或强氧化剂或超声波洗涤） 干燥自然干燥、烘烤干燥 量器自然凉干，容器烘干备用。,常用玻璃器皿的洗涤方法,生物化学与分子生物学实验教学中心,洗涤、干燥原则与判断方法,玻璃器皿洗涤原则： 对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根据器皿污染源的不同选择合适的洗涤液。 玻璃器皿干燥原则： 量器自然凉干，容器烘干备用。 器皿清洁的判断方法： 洗涤后倒置容器，其内壁无挂珠；干燥后器壁内外干净、无污物痕迹。,生物化学与分子生物学实验教学中心,溶液的混匀技术,甩动混匀 适用于试管内液量不多的溶液混匀。 弹打混匀 适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。 旋转混匀 适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。 倒转混匀 适用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀。 玻棒搅拌混匀 适用于烧杯内容物的混匀。 吸管混匀 适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。 旋涡振荡器混匀 适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物混匀。 电磁搅拌混匀 适用于酸碱自动滴定、pH梯度滴定等。,生物化学与分子生物学实验教学中心,刻度吸管的使用,选管（大小合适）总容量等于或稍大于取液量 执管（左球右管） 取液（一下一上） 插入液面下0.5cm，吸至最高刻度上方12cm 调准刻度（三点一线） 溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上 放液（贴壁放液） 需要吹的则吹出，如要求不吹的则让吸量管尖端停靠内壁约15s，同时转动吸管，重复一次。 放置（放回吸管架） 禁止平放在实验台面上！ 洗涤（操作结束后）,吸量管操作执管姿势,生物化学与分子生物学实验教学中心,可调式微量加样器的使用,选择（大小合适） 设置量程(动作轻缓） 先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后调回所需值。 装吸嘴（套牢，避免间隙） 取液（按至第一停点，缓慢吸液） 放液（贴壁放液）先按至第一停点，再按至第二停点。 卸吸嘴（废物缸） 将数轮调回最大值 放置（放在固定支架上，严禁平放或倒置）,生物化学与分子生物学实验教学中心,图A：把按钮压至第一停点， 图B：垂直握持加样器，使吸头浸入液面下3-5毫米处，然后缓慢 平稳地松开按钮，吸入液体。 图C：将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到 第一停点 。 图D：压住按钮