课件：第九章中药药物分析.ppt

第九章 中药分析,第一节 中药分析的特点 第二节 中药分析一的般程序及方法,第一节 中药分析的特点,一、中药及类型 中药是在中医理论指导下应用的药物。包括中药材、中药饮片和中成药等。 中成药又叫中药成方制剂，包括单方或复方制剂，是以中医药基础理论和用药原则为指导制成的。,二、中药分析特点 1.中药市场混乱。同物异名 同名异物现象普遍。 2.中药材质量的不稳定：易受产地、采收季节、用药部位、炮制方法等影响。 3.各种有效成分在中药中含量相差悬殊，含量较低。,4.成分复杂，而且大多数中药的有效成分尚不十分清楚。 5.同一成分在不同药材中的药理作用不同。 6.制剂工艺不同，有效成分的量也不同。 7.制剂工艺不同，有效成分的量也不同。,第二节 中药分析的一般程序和方法,取样,鉴别,含量测定,检查,样品处理,纯化,一、取样 1.取样均匀、合理、代表性 2.按规定方法取样 （中药材、中药制剂）,二、样品处理,（一）提取 1.冷浸 样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法。,亲脂性, 亲水性,石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水,样品置有机溶剂中加热回流的提取方法,通过更换溶剂，使提取更完全,样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法,适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定,原理 超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现“空化”现象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力,利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离,（二）纯化方法 1.萃取,（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分,（2）保留杂质于柱上,2.柱色谱法,三、中药鉴别 (一）化学鉴别 抗干扰能力差,显色、荧光,例,二妙丸中苍术的鉴别,苍术酮 苍术炔,（二）显微鉴别 在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂。,安宫牛黄丸 1、水牛角浓缩粉,2、麝香,3、珍珠,4、朱砂,5、雄黄,6、黄连,7、栀子,8、郁金,9、黄芩,(三)显微化学反应鉴别法： 一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，作为鉴别特征。,（四）色谱鉴别 TLC法应用最多（Rf、颜色、荧光） GC法 适用于含挥发性成分的药物 HPLC法常与含量测定同时进行,薄层色谱的阴、阳对照法 阳性对照：将要鉴别的药材按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液. 阴性对照：把制剂中要鉴别的药材除去，用剩下的各味药按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液,OO O O O O O O O O O 阴 样 阳 对 品 对,例,（五）指纹图谱鉴别,定义： 中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱。目前广泛使用的是色谱指纹图谱。,2. 色谱指纹图谱的特点,整体性 将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它的综合特征以达到鉴别的目的。 模糊性 强调分析、比较指纹图谱的相似性，而不是完全相同。 是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。,水分 总灰分和酸不溶性灰分 重金属 砷盐 残留农药,中药材主要项目,杂质来源及各项目的意义 水分 结块、霉变或有效成分水解 灰分 控制药物本身及泥土、沙石等无机杂质 重金属 环境污染和使用农药引入 砷盐 剧毒，常由除草剂、杀虫剂或化肥引入 残留农药 有毒,（一）水分测定法,测定用的供试品，一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片。直径和长度在3mm以下的花类，种子和果实类药材，可不破碎。减压干燥法需先经二号筛。,烘干法,适用于不含或少含挥发性成分的样品 测定法：取供试品25g，平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100105干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。,甲苯法,适用于含挥发性成分的样品 仪器装置：如图。A为500ml的短颈圆底烧瓶；B为水分测定管；C为直形冷凝管，外管长40cm。使用前，全部仪器应清洁，并置烘箱中烘干。,测定法：取供试品适量（约相当于含水量14ml），精密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗， 再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。检读水量，并计算供试品中的含水量（%）。,【附注】用化学纯甲苯直接测定，必要时甲苯可先加水少量，充分振摇后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后使用。,减压干燥法,适用于含挥发性成分贵重药的样品 减压干燥器：取直径12cm左右的培养皿，加入五氧化二磷干燥剂适量，使铺成0.51cm的厚度，放入直径30cm的减压干燥器中。 测定法：取供试品24g，混合均匀，分取约0.5 1g，置已在供试品同样条件下干燥并称重的称量瓶中，精密称定，打开瓶盖，放入上述减压干燥器中，减压至2.67kPa（20mmHg）以下持续半小时， 室温放置24小时。在减压干燥器出口连接无水氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称量瓶迅速精密称定重量，计算供试品中的含水量（%）。,GC法,色谱条件与系统适用性试验：用直径为0.250.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体，柱温为140150，热导检测器检测。注入无水乙醇，照气相色谱法（附录- E）测定，应符合下列要求： （1） 理论板数按水峰计算应大于1000；理论板数按乙醇峰计算的应大于150。 （2） 水和乙醇两峰的分离度应大于2。 （3） 将无水乙醇注样5次，水峰面积的相对标准偏差不得大于3.0%。,标准溶液的制备：取纯化水约0.2g，置25ml量瓶中，精密称定，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取供试品适量（含水量约0.2g），粉碎或研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇50ml，密塞，混匀，超声处理20分钟，放置12小时，再超声处理20分钟，密塞放置，待澄清后倾取上清液，即得。 测定法：取无水乙醇、对照溶液及供试品溶液各5 l，注入气相色谱仪，测定，即得。,【附注】 （1） 对照溶液与供试品溶液的配制须用新开启的同一瓶无水乙醇。 （2）用外标法计算供试品中的含水量。计算时应扣除无水乙醇中的含水量， 方法如下： 对照溶液中实际加入的水的峰面积对照溶液中总水峰面积K对照溶液中乙醇峰面积 供试品溶液中水峰面积供试品溶液中总水峰面积K供试品溶液中乙醇峰面积 K无水乙醇中水峰面积/无水乙醇中乙醇峰面积,（二）灰分的测定,1.总灰分测定法：测定用的供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品23g（如须测定酸不溶性灰分，可取供试品35g），置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500600，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或10硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化。,2.酸不溶性灰分测定法：取上项所得的灰分，在坩锅中小心加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩锅，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。,碱融法破坏 湿法破坏,碱融法,H+,（五）残留农药的测定 1、总氯量的测定 2、总磷量的测定 3、GC法,五、中成药检查,按制剂通则各剂型规定的项目进行。 1.合剂和口服液,2.丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等,一种或多种药材混合制成的粉 末状制剂，分内服和外用散剂,3.散剂,4.颗粒剂,5.片剂,硬胶囊剂 软胶囊剂 肠溶胶囊剂,6.胶囊剂,中国药典中药制剂含量测定所占比例 版本 % 1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09 （HPLC 36% TLCS 24% GC 3%),六、含量测定,测定成分的选定原则 1.首选君药及贵重药、剧毒药建立含量、限量测定方法 2.其次考虑臣药及其他味药 3.有效成分明确的，可选有效成分 4.成分类别清楚的，可测某一类总成分的含量 5.检测成分应归属某单一药味 6.检测成分应与中医用药的功能主治相近 7.确无法含量测定的，可测定浸出物含量,TLCS法 测定薄层板上斑点对单色光的吸 收或反射的强度而进行定量的方法 特点 A、分离效果好 B、适用于无法用UV、HPLC 法测定的组分 C、准确度、精密度低