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NKG2D配体的表达直接影响NK细胞对不同发育阶段DC的杀伤.docNKG2D配体的表达直接影响NK细胞对不同发育阶段DC的杀伤.doc

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NKG2D配体的表达直接影响NK细胞对不同发育阶段DC的杀伤作者涂三芳,郭坤元,胡亮衫,梅家转,周健,孙明【摘要】目的探讨NKG2D配体在不同发育阶段树突状细胞(DC)表面的表达及其对自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响。方法用细胞因子(RHIL4、RHGMCSF、TNFΑ)体外诱导培养单核细胞来源的未成熟树突状细胞(IDC)和成熟树突状细胞(MDC)并鉴定形态和表型,免疫磁珠法分离纯化NK细胞。流式细胞术(FCM)检测IDC和MDC表面NKG2D配体MICA/B、ULBP13的表达。用LDH释放法检测NK细胞对IDC和MDC的杀伤活性以及抗NKG2D单克隆抗体MAB阻断NK细胞后的杀伤活性。结果培养的IDC和MDC具有典型的细胞形态和免疫表型特征。IDC表面表达MICA、MICB、ULBP1、ULBP3,表达率分别为3239830)、1775340、2671648、3837689;MDC表面表达MICA、ULBP3,表达率分别为782267、836242,比IDC表面相应配体表达率低(PLT;001)。各效靶比NK细胞对IDC的杀伤活性均比对MDC的杀伤活性高,差异有统计学意义PLT;001。抗NKG2DMAB阻断NK细胞后对IDC杀伤活性比阻断前减弱PLT;005;对MDC的杀伤活性与阻断前相比无统计学意义PGT;005。结论NKG2D配体在IDC表面表达高,介导了NK细胞对IDC的杀伤,而对MDC的杀伤无影响,是NK细胞对IDC选择性高杀伤的分子机制之一。【关键词】NKG2D配体自然杀伤细胞树突状细胞[ABSTRACT]AIMTOINVESTIGATETHEEXPRESSIONOFNKG2DLIGANDSONDENDRITICCELLS(DC)ATDIFFERENTDEVELOPMENTSTAGESANDITSEFFECTONCYTOTOXICITYOFNATURALKILLER(NK)CELLSMETHODSTHEMONOCYTESWERECULTUREDINTOIMMATUREDENDRITICCELLS(IDC)ANDMATUREDENDRITICCELLS(MDC)WITHCYTOKINESNKCELLSWEREOBTAINEDFROMNORMALPERIPHERALBLOODBYCD56ANTIBODYMAGNETICISOLATIONTHEEXPRE
编号:201312182204314104    类型:共享资源    大小:37.50KB    格式:DOC    上传时间:2013-12-18
  
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