丹参注射液对慢性阻塞性肺疾病外周血白细胞黏附分子CD11b 表达的影响.pdf

实用医学杂志2008年第24卷第2l期丹参注射液对慢性阻塞性肺疾病外周血白细胞黏附分子CD1lb表达的影响袁文胜孙洁民摘要目的：研究外周血白细胞黏附分子CD1lb与慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的关系及丹参注射液对CD1lb表达及肺功能的影响。方法：采用全血直接免疫荧光流式细胞术检测我院81例COPD急性发作期患者(COPD组分为常规治疗组和丹参治疗组)和2l例正常对照组外周血白细胞黏附分子CD1lb的表达及其相应的肺功能(FEV。)。结果：(1)COPD组患者CD1lb水平明显高于正常对照组(P0O1)，二者肺功能差异亦有显著性(P001)。(2)常规治疗组和丹参治疗组治疗后CD1lb差异有显著性(P005)，二者治疗后肺功能差异亦有显著性(P005)(3)COPD组白细胞黏附分子CD1lb与肺功能呈显著负相关(治疗前r=一0536，P0O1；常规治疗组治疗后r=一0634，P0叭；丹参治疗组治疗后r=一0738，P001)。结论：CD1lb参与了COPD的发病丹参明显阻抑外周血CD1lb的表达这可能是此类中药具有抗炎活性的机制之一。关键词肺疾病慢性阻塞性丹参注射液CD1lb肺通气功能慢性阻塞性肺疾病(COPD)是全世界主要的死亡原因之一，很多人患有COPD并最终死于该病及其并发症。目前，COPD居全球死亡原因的第4位，在未来的几十年其发病率和病死率将会进一步上升。目前认识到COPD是一种慢性气道炎症，氧化与抗氧化失衡和肺部的蛋白酶和抗蛋白酶失衡进一步加重COPD肺组织炎症。近年来逐渐认识到黏附分子在COPD的气道炎症细胞浸润和聚集方面发挥重要作用同时也发现一些具有活血化瘀类中药具有抗黏附分子的作用。本研究主要观察黏附分子CD1lb在COPD发病中的作用，及中药丹参对CD1lb的影响及其在COPD治疗方面的作用及其可能机制。l对象与方法11研究对象COPD患者(慢支炎并肺气肿)诊断根据1997年中华医学会呼吸病学分会拟定的慢性阻塞性肺疾病(COPD)诊治规范(草案)。排除标准：(1)近期服用免疫抑制剂、激素、抗黏附、抗凝血药物患者；(2)患其他脑、心、肝、肾疾病者；(3)免疫代谢疾病患者；(4)肿瘤及结核患者。选择符合上述条件的2006年2月至2007年3月我院呼吸内科病房COPD患者8l例(COPD组)，FEVI级(轻)FEV70；1I级(中)FEV5069；m级(重)FEV150。81例患者分为两组：常规治疗组4l例，其中男27例，女14例，平均年龄(654-8)岁，其中轻度14例，中度19例，重度8例，合并肺心病l7例，肺性脑病9例，消化道出血1例，患者均给予常规抗感染、解痉、平喘及吸氧等西医综合治疗，以10d为1个疗程；丹参治疗组(雅安三九药业有限公司产品)40例，其中男26作者单位：430022华中科技大学同济医学院附属武汉市中西医结合医院呼吸科3751例，女l4例，平均年龄(649)岁，其中轻度l3例，中度20例，重度7例，合并肺心病15例，肺性脑病8例，消化道出血1例，弥漫性血管内凝血1例，均在常规治疗基础上，用丹参注射液16mL加入5葡萄糖500mL中静脉滴注，每日1次，连续10d为1个疗程。选择同期于本院健康体检者21例为正常对照组，各项检测指标均正常，男18例，女3例，平均年龄(644-8)岁。12研究方法121材料及仪器FACscalibur临床专用流式细胞仪。FITC标记鼠抗人CD1lbMacAb购自Biosource，流式细胞术专用红细胞裂解液由深圳晶美公司提供。122检测方法流式细胞术检测：每例受检者采静脉血lmL置于含EDTA的抗凝管中，采血后2h内完成直接免疫荧光染色。每管上样后检测2104个细胞，调整参数。应用依次测定每例受检者标本中表面的CD1lb的阳性细胞百分率测量数据输入计算机统计分析。12-3肺功能测定用Chest35综合肺功能仪检测。13统计学处理全部实验结果用荧光强度值表达，以正常对照组与COPD组、常规治疗组与丹参治疗组相对照，用SAS统计学软件处进行t检验。2结果21正常对照组与COPD组CD1lb的阳性细胞百分率及肺功能(FEV)的比较COPD组CD1lb的阳性细胞百分率与正常对照组经统计学处理差异有显著性(t=1782，P001)。COPD组FEV】与正常对照组经过统计学处理，差异有显著性(t=2226。PO01)。见表1。22常规治疗组与丹参治疗组CD1lb的阳性细胞百分率及FEV比较常规治疗组治疗后与治疗前CD1lb的阳性细胞百分率(t=1824，P005)及表1两组CD1lb的阳性细胞百分率及FEV比较s，注：与正常对照组相比，P0O1FEV(=1784，P005)，经过统计学处理，差异均有显著性。丹参治疗组治疗后与治疗前CD1lb的阳性细胞百分率(t=2043，P0。01)及FEVl(t=2226，P001)，经过统计学处理差异均有显著性。丹参治疗组治疗后与常规治疗组治疗后CD1lb的阳性细胞百分率(t=1775，P005)及FEVl(=2028，P005)比较差异有显著性。见表2。表2两组CD1lb的阳性细胞百分率及FEV。比较s，注：与同组治疗前比较，#尸O05；与常规治疗组比较，P00523两治疗组治疗前后CD1lb及与其肺功能的相关性治疗前CD1lb的阳性细胞百分率与FEV明显负相关(r=一0536P001)，常规治疗组治疗后CD1lb的阳性细胞百分率与FEV。明显负相关(r：一0634，P001)丹参治疗组治疗后CD1lb的阳性细胞百分率与FEV，明显负相关r=一0738，P001)。3讨论黏附分子在炎症、免疫反应等多种生理病理过程中发挥重要作用l2j。整合素家族的CD1lb是黏附家族的重要成员之一是白细胞黏附受体Mac1的亚单位，主要表达于巨噬细胞、中性粒细胞、大颗粒淋巴细胞，其配体为血管内皮细胞和气道上皮细胞所表达的细胞问黏附分子一I(ICAM1)，属免疫球蛋白超家族成员(黏附分子家族之一)。ICAM1与CD1lb互为配体在炎症细胞的黏附、出游中有重要作用。生理状况下CD1lb在白细胞表面均有一定的表达。各种外来因素均可导致其表达的上凋，如外来抗原、白细胞介素一l(IL1)、IL3和一干扰素(interferon)。近年来逐渐认识到COPD是一种慢性气道炎症，是一种有着多种炎症细胞和炎性介质参与的一种慢性气道炎症，其中氧化抗氧化失衡，蛋白酶及其抑制物失衡是其发病机制中最关键的因素3。在COPD慢性炎症中存在着中性粒细胞、CD8淋巴细胞、单核细胞等炎症效应细胞的激活，而炎症细胞的激活和释放，慢性炎症的维持需要黏附分子的持续表达，但其具体的作用机制尚不清楚。本研究结果表明COPD患者因为存在着慢性气道炎症，故其外周血黏附分子CD1lb实用医学杂志2008年第24卷第21期的表达水平明显高于正常人，与国内外的文献报道是一致的。丹参用于治疗慢性肺源性心脏病4、支气管哮喘、迁延性肺炎、tbJL重症肺炎，都取得不错的效果，但其抗炎机制一直未有阐明。丹参尚有抗菌、利尿、减慢心率、镇静安眠等作用。更多的研究表明丹参有抗白细胞黏附分子的作用。陈炫等5的研究表明，丹参对兔烧伤早期中性粒细胞与内皮细胞黏附有明显抑制作用，从而改善微循环及减轻PMNEC黏附所致的组织病理损伤。沙建平等通过建立兔的急性胰腺炎模型，发现丹参能降低黏附分子CD1laCD18、CD1lbCD18表达抑制中性白细胞和内皮细胞的黏附，改善微循环及减轻中性白细胞和内皮细胞黏附所致的组织损伤有助于急性胰腺炎的早期治疗本研究表明，黏附分子CD1lb参与了COPD慢性气道炎症，并且其表达的水平与其肺功能存在一定程度的相关。丹参具有明显抑制COPD整合素黏附分子CD1lb的表达，进而抑制炎症细胞的贴壁、移行、穿越、跨内皮黏附所致的炎细胞激活，炎性介质如IL8、TNFOt、LTB一4的释放，中性白细胞释放蛋白酶、氧自由基所造成对组织的损伤，进而减轻COPD气道炎症，改善肺功能，CD1lb表达水平的高低从一定程度上可反映COPD病情轻重。丹参抑制CD1lb的表达可能是其治疗呼吸系统疾病、具抗炎活性的又一作用机制。近年来，黏附分子已成为各学科领域的研究热点，黏附分子阻滞疗法已成为新兴的治疗方法，而活血化瘀类中药的抗炎活性也逐渐引起相当的学者的关注西医西药治疗COPD存在太多的问题，诸如抗生素耐药、药物的肝肾毒性等等，而长期使用抗生素及激素又容易导致霉菌生长。我们的研究不仅从黏附分子的角度揭示此类药物的抗炎作用机制，也为临床治疗COPD提供了新的思路。4参考文献1中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病(COPD)诊治规范(草案)J中华结核和呼吸杂志，1997，20(4)：1992032LimKJMolecularfactorsinhumanimplantation：adhesionmolecules，proteasesandcytokinesJMalaysJPathol，2003，25(1)：1133VandersliceP，BiedigerRJ，WoodsideDG，eta1DevelopmentofcelladhesionmoleculeantagonistsastherapeuticsforasthmaandCOPDJPulmPharmacolTher，2004，17(1)：1-104蒋浩明，王明弟。