蔬菜水果中农药残留量的测定

蔬菜水果中农药残留量的测定一、目的要求1、了解电子捕获检测器（ECD）的检测原理和使用方法。2、掌握农药残留量的测定方法。二、基本原理ECD是一种选择性检测器，对含 X、S、P、N、O 电负性强的物质，影响很大，而对非电负性物质，则影响很小。放射源（ 3H或 63Ni）产生的 B射线将载气 N2电离成正离子和电子，这些离子和电子在电场作用下形成“基流”。当电负性样品进入检测器后，便捕获自由电子，形成的负离子和载气的正离子结合为中性分子，以使基流下降，产生对应的负信号倒峰。在一定范围内，检测器的响应信号和样品组分的浓度成正比。六六六、DDT 是目前用量叫大的有机农药，其化学性质稳定，施用后残留在大气、土壤、水体、植物中不易消失，对人体健康不利。本法利用己烷提取样品，采用 0.23%OV-17和 2.8%OV-210混合固体液分离，ECD 检测器，外标法定量。三、仪器与试剂仪器：气相色谱仪，ECD；离心机；布氏漏斗；0.5*22cm 玻璃层析柱；1000ml 分液漏斗 2只试剂：无水硫酸钠、硫酸钠、己烷、丙酮、浓硫酸(均为 AR)；硅藻土(3030 目)、OV17、OV210(色谱级)、Chromosorb WAWDMCS；-666、-666、666、666、p，pDDE、o，p 一 DDT、p，p一DDD，p，pDDT。?四、实验步骤1色谱条件：3mm2m 玻璃柱，固定相：o23OV17+28OV210，Chromosorb? W，AW 一 DMGS，80100 目；T c=200，T D=210，T i=230；载气：N 2? (9999)，6070mlmin ；放大器高阻 108 脉冲间隔 50s。2试样的提取和净化：将洗净后的蔬菜或水果切碎，并充分混合称取 l00g样品放入捣碎缸中，加己烷 200ml，丙围 50ml，快速捣碎 2min。将浆液倒入 500m1离心怀中，用少许蒸馏水冲洗捣碎缸并入离心杯，在 3000rmin 的离心机中，离心 15min，离心液用布式漏斗过滤，用己烷冲洗离心怀，并经布式漏斗过滤，滤液倒入 1000mI分液漏斗使其分层。将水层分到第二个 1000m1分液漏斗中。己烷层用 500m12硫酸钠振摇 1min，使其静止分层。再将水层并入第二个分液漏斗中，加 50mI己烷轻轻摇 2min，静止弃去水层。最后将两个分液漏斗中的己烷提取液都通过装有无水硫酸钠的简形漏斗，滤入 250m1三角瓶中。提取液在水浴上浓缩到 20一 30mI左右，用己烷定容到 50ml。从 50mI容量瓶中吸出 5mI提取液在氮气流中浓缩到 1m1后倒入层析柱中净化。层析柱为 0.5cm22cm玻璃管，内装硅藻土(1g 硅藻土滴加 0.6mI的浓硫酸混和)，柱的底部放一段经己烷洗涤过的破璃棉，硅藻土层的顶端放入少许无水硫酸钠。洗涤浓缩器的己烷也倒入层析柱中，然后用己烷冲洗柱，用 25m1容量瓶收集。?自 25m1容量瓶中吸取一定体积的净化溶液，经浓缩即可进样分析。3仪器调试：(1) 将载气调至需要量，接通主机电源；(2) 先升检测器温度，再升汽化室温度和柱温； 打开微电流放大器“电源”开关和放大器开先，灵敏度高阻为 108，衰减调到适当位置，“基补”-“零调”开关放在基补”上；() 打开“脉冲电源”开头，“s 选择”调到 50s；() 打开记录仪电源和记录笔开关，调“基补”电位器，把记录笔调到 0.8一 0.95位置。() 检查基流时，“脉冲电源”开关处于关位置，记录笔指针向零点方向移动(否则应改变“正”“负”开关位置)，指针移动量应在记录仪量程范围 6内，但不应小于 0.1mV；() 各恒温器稳定后，就可进样分析。4标准溶液配制：用己烷配制“666、666、666、666、p，pDDE、o，p 一 DDT、p，p一 DDD，p，pDDT各为 l00ppm(666 要先用少量蒸苯溶解)的贮备液。 操作溶液浓度与样品浓度相近。5色谱测定：(1)用各种浓度的六六六、DDT 标准溶液注入色谱仪，以确定 ECD的线性范围；(2)进样品溶液，根据样品的峰高，用标准贮备液配制浓度相近的操作溶液；(3)在相同色谱条件下，依次进样品和标样，记录 tR和色谱图。五、数据处理根据色谱图测量蜂高，计算蔬菜和水果中的六六六、DDT 的含量。ci? hs*Wi*K (mg/kg)=hi*cs*Ws? 式中：ci样品中农药的浓度；hi扣除试剂空白后的峰高；Ws一标准溶液进样邑；Wi样品溶液进样量；hs标准溶液峰高；cs标准溶液的浓度(mgkg )，K浓缩系数六、问题讨论1脉冲间隔对测定有何影响？如何选择？2如何防止 ECD的污染？3所用的注射器和玻璃器皿为什么不能用丙酮、氯仿等洗涤？4测定时为什么要先确定 ECD的线性范围？七、注意事项1.使用 ECD时应采用高纯度载气，并经净化处理。2新装填的色谱柱必须在高于使用温度的条件下充分老化，未老化好绝对不得与 ECD相连。3使用 ECD时，如短时间停