肠道感染细菌

第10章,肠道感染细菌,肠杆菌科细菌： 埃希菌属 、志贺菌属、 沙门菌属、克雷伯菌属、 变形杆菌属等10个菌属幽门螺杆菌霍乱弧菌副溶血性弧菌弯曲菌属,共同生物学特征,革兰阴性杆菌，无芽胞，多数有周身鞭毛 （除志贺菌外），致病菌多有菌毛,某些菌 有荚膜样物质。营养要求不高，能在普通培养基上生长， 兼性厌氧生化反应活跃（乳糖发酵试验）抗原结构复杂O抗原（菌体抗原）H抗原（鞭毛抗原）K抗原（包被抗原）,IMViC试验,（大肠杆菌+-）,（产气杆菌-+）,糖发酵试验吲哚（）试验 甲基红（M）试验 VP（V）试验 枸橼酸盐（C）利用试验 尿素酶试验 硫化氢试验,生化反应,糖发酵试验,乳糖发酵试验葡萄糖发酵试验,乳糖,乳糖酶,乳酸,鉴别致病性肠道杆菌,葡萄糖,丙酮酸,各种酸类,细菌,甲酸,解氢酶,H2+CO2,吲哚（）试验,色氨酸,色氨酸酶,吲哚,对二甲基氨基苯甲醛,玫瑰吲哚,甲基红（M）试验,葡萄糖,细菌,丙酮酸,脱羧,乙酰甲基甲醇,（中性）,PH5.4 橘黄色 阴性,PH4.5 红色 阳性,VP（V）试验,葡萄糖,细菌,丙酮酸,脱羧,乙酰甲基甲醇,氧化,二乙酰,含胍基化合物,红色化合物（VP试验阳性）,枸橼酸盐（C）利用试验,枸橼酸盐,碳酸盐,细菌,铵盐,氨,细菌,培养基变碱性,溴麝香草酚蓝由淡绿色变深蓝色,IMViC试验 大肠埃希菌 产气肠杆菌 ,大肠埃希菌,产气肠杆菌,尿素酶试验,尿素,尿素酶,氨,培养基变红（阳性）指示剂：酚红,硫化氢试验,含硫氨基酸,细菌,硫化氢,铅或铁,硫化铁（黑色）,第一节 埃希菌属,包括5个种： 大肠埃希菌（通称大肠杆菌，E.coli）代表种肠道中正常菌群,合成维生素B及K；能抑制腐败菌及病原菌和真菌的过度增殖；条件致病菌，引起肠外感染（化脓性感染、泌尿道感染）有些特殊菌株能导致人类胃肠炎；大肠杆菌在环境卫生和食品卫生学中，作为粪便污染 的检测指标；在分子生物学的研究中，E.coli是最常用的实验材料。,一.生物学性状,革兰阴性杆菌；无芽胞；多数菌株有周身鞭毛，能运动；有菌毛，包括普通菌毛和性菌毛；兼性厌氧；营养要求不高；圆形凸起灰白色光滑性（S型)菌落。,生化反应活泼,发酵多种糖类,产酸产气,绝大多数发酵乳糖 (非致病菌分解乳糖，致病菌多数不分解乳糖）IMViC试验结果为+ + - -，凡IMViC试验示此结果的，判为典型的大肠杆菌，表明被检物已有粪便污染，有传播肠道传染病的危险。,抗原结构,O抗原：菌体抗原，170多种，血清学分型的基础 耐热，与相应的抗体(IgM)呈颗粒状凝集， 凝块形成慢，不易摇散。H抗原：鞭毛抗原，56种以上 与相应的抗体(IgG)呈现疏松絮状凝集， 凝块形成迅速，但易摇散。K抗原：多糖抗原，100种以上 包绕于O抗原的周围，能阻断O抗原与相应抗体的结合， 但加热后可消除K抗原的阻断作用。表示血清型的方式：O111：K58：H2,二.致病性,(一)致病物质1.肠杆菌科一般的毒力因子 内毒素、荚膜、型分泌系统2.大肠杆菌自身特殊的毒力因子 黏附素:使细菌黏在泌尿道和肠道细胞上，有高特异性。 包括定植因子抗原、集聚黏附菌毛等。 外毒素：（1）志贺毒素和（Stx-,Stx-） （2）耐热肠毒素a,b(STa,STb) （3）不耐热肠毒素和（LT-，LT-） （4）溶血素A：尿路致病性大肠埃希菌,（二）所致疾病,1.肠道外感染 机会感染，内源性感染化脓性感染： 腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染、败血症、 新生儿大肠埃希菌性脑膜炎。泌尿道感染： 上行感染，尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎 症状尿频、排尿困难、血尿和脓尿等。 某些血清型可引起泌尿系统感染，这些菌株统称 为尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）,2.胃肠炎（外源性感染）,直接涂片染色镜检（粪便标本不做） 分离培养（普通琼脂平板/鉴别培养基） 典型菌落 直接涂片染色镜检 生化反应（初步鉴定） 药敏实验,标本,细菌分离和鉴定,必要时应做肠毒素、DNA片段及侵袭力测定。泌尿道感染患者的尿标本还应作细菌总数测定，每毫升均超过105个有诊断意义。,三.微生物检查,血清学鉴定,卫生细菌学以“大肠菌群数”作为饮水、食品等粪 便污染的指标之一。大肠菌群：37培养24h，发酵乳糖产酸产气，需 氧和兼性厌氧的肠道杆菌（埃希菌属、枸橼酸菌 属、克雷伯菌属等)。大肠菌群指数:每1000ml(g)样品中的大肠菌群数。我国标准：大肠菌群数在每升饮水中不得超过3 个，瓶装汽水、果汁等每100ml不得超过5个。,第二节 志贺菌,人类细菌性痢疾最常见的病原菌，俗称痢疾杆菌一.生物学性状革兰阴性短小杆菌；无芽孢，无鞭毛，无荚膜，有菌毛营养要求不高生化反应弱，不分解乳糖IMViC 试验“- + - -”抵抗力弱,O抗原：分群特异抗原和型特异抗原 A群：痢疾志贺菌，10个血清型 B群：福氏志贺菌，13个血清型 C群：鲍氏志贺菌，18个血清型 D群：宋内志贺菌，只有一个血清型,二.致病性和免疫性,（一）致病物质1.侵袭力靶细胞是回肠末端和结肠部位的粘膜上皮细胞， 菌毛利于粘附于肠粘膜上皮细胞， 侵袭性蛋白诱导细胞膜凹陷,导致细菌内吞。2.内毒素 志贺菌所有菌株都有强烈的内毒素。,（1）内毒素-肠壁通透性增高-毒素吸收- 内毒素血症-发热、神志障碍、中毒性休克（2）内毒素-破坏肠粘膜-炎症、溃疡-坏 死、脱落-粘液脓血便（3）内毒素-肠壁自主神经-肠蠕动失调、痉 挛-腹痛、腹泻、里急后重 3.外毒素（志贺毒素） 中断蛋白质合成 毒素作用的基本表现是上皮细胞的损伤。,（二）所致疾病,细菌性痢疾，简称菌痢；传染源病人、带菌者；经粪口途径感染，随饮食进入肠道。急性细菌性痢疾 发病突然，发热、腹痛和水样腹泻粘液脓血便， 伴有里急后重，下腹部疼痛。 急性中毒性菌痢，多见于小儿，表现为全身中毒症状慢性细菌性痢疾 急性细菌性痢疾治疗不彻底，反复发作，迁延不愈,1天,（三）免疫力,免疫力不持久主要是局部粘膜细胞损伤，细菌不入血流， 所以免疫程度低。型别多，且各型间无交叉免疫。,第三节 沙门菌,2000多个血清型，少数对人致病对人致病：伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、 肖氏沙门菌、希氏沙门菌对人和动物致病：猪霍乱沙门菌、鼠伤寒沙 门菌、肠炎沙门菌引起人类的疾病称沙门菌病，主要有伤寒/副 伤寒、胃肠炎（食物中毒）、败血症等,一.生物学性状,阴性杆菌，有菌毛，有周身鞭毛；兼性厌氧，营养要求不高；不发酵乳糖，多数产生H2S（培养基变黑）；IMViC试验“-+-+”,抗原：O抗原： LPS中的特异性多糖，耐热，分组；H抗原： 鞭毛蛋白质，不耐热，组内分型；Vi抗原： 与毒力有关而命名，也是一种表面抗原。 伤寒沙门菌和希氏沙门菌有此抗原， 测定Vi抗体有助于诊断伤寒、副伤寒带菌者。,二.致病性,(一)致病物质1.侵袭力: 有Vi抗原的沙门菌具有侵袭力； inv基因（侵袭基因）表达产物介导侵袭力。2.内毒素: 体温升高、WBC下降，中毒性症状。3.外毒素: 类似肠产毒素性大肠埃希菌产生的肠毒素。,（二）所致疾病,粪-口途径（因食用患病或带菌动物的肉、乳、蛋或被鼠尿污染的食物等患病）,1.肠热症：伤寒和副伤寒，最严重。 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起机制和症状： 细菌被巨噬细胞吞噬通过淋巴液到达肠系膜淋巴结 繁殖经胸导管入血第一次菌血症随血流进 入肝、脾、肾、胆囊等发热、不适、全身疼痛 病菌在上述器官繁殖再次入血第二次菌血症 体温阶梯式上升，肝脾肿大，全身中毒症状明显，玫 瑰疹，外周血白细胞下降。,2.急性胃肠炎：（食物中毒） 最常见 鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌污 染食物引起，起病急。,3.败血症 猪霍乱沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、 希氏沙门菌引起； 多见于儿童和免疫力低下的成人； 肠道症状不明显。4.无症状带菌者 症状消失后1年仍可在粪便中检出相应沙门 菌，这些菌留在胆囊或尿道中，是伤寒和 副伤寒病原菌储存场所。,（三）免疫性,伤寒菌细胞内寄生，以特异性细胞免疫为主， 体液免疫为辅；肠热症时细菌两次入血，所以伤寒和副伤寒 病后可获得牢固免疫。,1.病原菌的分离和鉴定 标本 分离培养（S-S培养基） 可疑菌落 涂片染色镜检。 初步鉴定（生化反应） 血清学鉴定 药敏实验 （确定菌群和菌型） 菌血症时取血；胃肠炎取粪便、呕吐物或可疑食物； 肠热症在病程不同阶段采取不同标本： 第1、2w取血或骨髓，第2w以后取粪便、尿。 粪便标本应做多次培养。,三.微生物学检查法,2.血清学试验,肥达试验 .定义：用已知伤寒沙门菌O、H抗原和甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌H抗原与病人血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价，根据抗体的含量和增长情况辅助诊断肠热症。.诊断标准：诊断伤寒：O凝集效价1:80；H凝集效价1:160诊断副伤寒：H凝集效价1:80才有诊断价值,肥达试验测定病人血清中O抗体，病人血清做系列稀释，加到含有O抗原的试管中，O抗原与血清中的抗体发生颗粒状凝集的最高稀释倍数，即为报告值。图中稀释1:20 1:1280和阴性对照。菌体滴度为1:80。（37孵育2小时）,肥达试验测定病人血清中H抗体，出现絮状凝集的最高稀释倍数，即为报告值。鞭毛滴度为1:320。（37孵育3小时）,.动态观察：抗体效价随病程延长而递增或恢复期比早期高4倍以上有诊断价值。.O与H抗体的诊断意义： O，H-肠热症（伤寒或副伤寒）的可能性大 O，H-患病的可能性小 O不高，H-预防接种或非特异性回忆反应所致 O，H不高-感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有 交叉反应的其他沙门菌感染,早期使用抗生素治疗或患者免疫功能低下者，肥达试验在正常范围内3.伤寒带菌者的检出血清学方法检测可疑者Vi抗体效价，若1:10，再反复取粪便/胆汁等标本进行分离培养，以确定是否为带菌者。,变形杆菌,有周身鞭毛，运动活泼；迁徙生长，H-O变异；有尿素酶，分解尿素变形杆菌的重要特征；不发酵乳糖；普通变形杆菌代替立克次体作为抗原，外斐试验 阳性，辅助诊断立克次体病；,人体正常菌群，条件致病： 食物中毒、尿路感染、肺炎、心内膜炎、乳突炎、脑膜炎、创伤及烧伤感染等。也有的能引起夏季婴儿腹泻及新生儿败血症。 其中以泌尿系统感染最常见。,第四节 霍乱弧菌,弧菌属概述与肠杆菌科细菌主要不同点：氧化酶试验阳性和单根鞭毛；广泛分布于自然界，水中最多；已确定36个种，12个种与人类感染有关。,弧菌所致疾病：（1）霍乱 霍乱弧菌O1群和O139群（2）感染性腹泻（食物中毒）副溶血弧菌、 河弧菌、拟态弧菌、弗尼斯弧菌、霍利斯弧菌（3）创伤感染和败血症创伤弧菌、海鱼弧菌、 溶藻弧菌、鲨鱼弧菌,霍乱弧菌是引起烈性传染病霍乱的病原体。 一.生物学性状 革兰阴性弧形或逗点状菌体单端有一根鞭毛兼性厌氧;营养要求不高碱性环境生长良好（碱性蛋白胨水pH8.8-9.0）氧化酶阳性,抗原结构与分型 霍乱弧菌有耐热的O抗原和不耐热的H抗原 O抗原: 分200多个血清群O1、O139群引起霍乱0139群在抗原性方面与01群之间无交叉H抗原无特异性,二.致病性,1.致病物质（1）霍乱肠毒素 霍乱肠毒素是目前已知的致泻毒素中最为强烈的 毒素，是肠毒素的典型代表。 由一个A亚单位和5个相同的B亚单位构成。B亚 单位可与小肠粘膜上皮细胞GMl神经节苷脂受体结合， 介导A亚单位进入细胞，A亚单位可使细胞内cAMP水 平升高，主动分泌Na+、K+、HC03和水，导致严重 的腹泻与呕吐，水和电解质丧失。,（2）鞭毛、菌毛及其他毒力因子 霍乱弧菌活泼的鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜 表面粘液层而接近肠壁上皮细胞。细菌的普通菌毛是细菌定植于小肠的因子。 O139群还存在多糖荚膜和特殊LPS毒性决定簇 功能：抵抗血清中杀菌物质和能粘附到小肠粘膜上,2.所致疾病,烈性肠道传染病霍乱 传染源患者/带菌者传播途径通过污染的水源或食物经口感染临床表现 起病突然，多以剧烈腹泻开始，继之呕吐，大便 数次至数十次，初为稀便，后为米泔水样便（粘 膜、上皮细胞、弧菌）。一般无发热，少数有低 热。眼窝下陷，口渴唇干，腹下陷呈舟状腹，循 环衰竭，电解质平衡紊乱和代谢性酸中毒。,免疫性病后可获牢固免疫力以体液免疫为主防治原则预防：注意饮食卫生 菌苗 疫区管理治疗：补液，及时纠正脱水 抗菌药物治疗,副溶血性弧菌,海水、海底沉积物和鱼类、贝壳等海产品中；主要引起食物中毒；尤以日本、东南亚、美国及我国台北地区多见；我国大陆沿海地区食物中毒最常见的一种病原菌；该菌与霍乱弧菌的一个显著差别是嗜盐，在培养 基中含3.5NaCl最为适宜，无盐则不能生长， 但当NaCl浓度高于8时也不能生长。,经烹饪不当的海产品或盐腌制品传播，常见的为 海蜇、海