D-二聚体的临床应用及研究进展最新

专家简介,胡 娟 主任、教授、主任技师,医学硕士、管理学博士、研究生导师，在法国、美国、日本等国家留学和授课，美国芝加哥大学和法国巴黎大学客座教授。 全军检验专委会病原组副主任委员全军医用标准物质专委会常务委员全军检验医学专业委员会常务委员 成都军区临床医学检验中心主任 成都军区检验专业委员会主任委员四川省医学检测专业委会主任委员四川省食品和药品监督管理局专家,实验医学的发展向两极分化,D-D 概述 检测方法 临床应用 研究进展,现代检验医学 用先进的技术方法，为临床提供早期诊断治疗和评估监测的依据。 循证医学 EBM 证据： 诊断 、治疗 、评估、监测 、预防等。,因此：检验医学的重要任务之一 1、提供新的理论 2、发现新的证据 3、建立新的方法 研究、生产、整合技术应用于临床 不断完善和进步的过程！,特点1 新的分析技术和研究目标需要 多学科 基础、临床、预防、统计等医学 多部门 行政管理、知识产权 、监管机构 多技术 工程学、信息学、卫生学、环境,是一项系统工程支撑下完成的工作,特点2 应用领域不断扩展,特点3： 参考体系的建立， 是我们必须应对新的变革和跃迁 。,溯 源 传 递，,国家参考品，,参考实验室，,准确、通用。,检验医学为临床提供的检测结果 简 单 概 括分为四种 ： 1、未知物质的未知功能 2、未知物质的已知功能 3、已知物质的已知功能 4、已知物质的未知功能,3、 D-二聚体,一、 D-二聚体的概述,血浆DD含量变化,鉴别指标,体内凝血状态,原发性与继发性纤溶,ELISA,免疫渗透法,乳胶凝集法,D- D 测定方法 10种方法,全自动血凝检测仪,半自动血凝检测仪,免 疫 比浊 免疫荧光,二、测定方法的原理,A. 乳胶凝集法 被检血浆中D-二聚体与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体相作用，产生絮状沉淀反应。 方法经典 1983年R ylat t、 1986年Elms、 第一株D D单克隆抗体 第一次吸附在乳胶颗粒上,B . ELISA 采用2 个针对D-二聚体的单抗建立的 , 以抗原为中心，2 种抗体夹心法， 并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应 1983年R ylat t 和 Elms 建立了双抗夹心 ELISA,C .免疫渗滤法挪威 将抗D D 单克隆抗体包被于测试卡上,血浆由加样孔加入 ,膜中抗体捕获标本中的D D ,洗涤后加入胶体金标记的 D D 单克隆抗体,与被捕获的 D D分子结合而显红色,其显色程度与含D D量成正比,经标准卡比对或用专门检测计测量可定量测定 D D含量。,三种方法不同的特点,乳胶凝集试验简便快捷,适用于急诊检验。只能定性，半定量，敏感性低。 常用于 S查，半定量结果不理想。EL ISA法敏感精确、速度比较快，可定量分析, 常用于成批检测。 但操作繁琐、要求较高，不能满足急诊检验需要。胶体金免疫渗滤试验则结合了上述2种方法的优势, 简单、快速、特异性好，能定量、单个标本均可随时检测。满足急诊检验需要。,不同方法的特点,1、全自动 和半自动 血凝检测仪 ,使DD 检测结果更加精密、准确，特异 ，具良好的线性关系。但不适合对DD过高的样本直接检测！ 会出现阴性结果 2.在仪器上有必要设置预稀释程序及预稀释标准曲线、编程时设定两个DD实验程序，增加一个生理盐水试剂位。,荧光抗体检测法 法国梅里埃公司VIDAS DD在VIDA免疫分析仪进行，是在酶免疫法基础上与荧光检测相结合，利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统，对单份样本进行检测。VIDAS DD是目前研究最多的检测技术，敏感性高，与经典的ELISA有很好的一致性。,对DVT的敏感性和NPV分别是96 99 95 99 相比较缺点为速度慢，抽血后离心15分钟，用纸条吸入血浆后，所有步骤由仪器完成，大约35分钟。 适合单人检测 ，不适合大样本 。,日本Sysmex CA-1500全自动血凝仪日本Sysmex CA-500半自动血凝仪 德国BE公司 Rack Ratar自动血凝仪美国Beckman Coulter 7000全自动生化仪 意大利亚特斯全自动酶免分析仪,三、 D- D指标的临床应用,增高或阳性见于继发性纤维蛋白溶解功能亢进，如高凝状态、弥散性血管内凝血、肾脏疾病、器官移植排斥反应、溶栓治疗等。,只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动，D-二聚体就会升高。心肌梗死、脑梗死、肺栓塞、静脉血栓形成、手术、肿瘤、弥漫性血管内凝血、感染及组织坏死等均可导致D-二聚体升高。特别对老年人及住院患者，因患菌血症等病易引起凝血异常而导致D-二聚体升高。,D-二聚体测定较FDP测定的优点,D-二聚体可作为溶栓效果的定量监测指标 而FDP(纤溶蛋白/原降解产物)可来自纤维蛋白原，且在原发性纤溶中也升高。因此后者不能作为溶栓效果的定量指标。,D-二聚体或FDP测定都可作为纤溶活性增强的某些疾病的辅助诊断，例如DVT、DIC、肾功能衰竭及溶栓疗效判断。理论上 DIC时纤溶形成的小碎片 对FDP检测法不敏感， 而D-二聚体试验较之敏感。,D-二聚体可采用血凝标本(血浆), 而FDP是能采用血清标本。后者受血清制备是否完全的影响。 FDP乳胶颗粒法3分钟完成试验, D-二聚体胶体金免疫过滤法2分钟完成试验。 前者为半定量测定, 后者若采用读数仪可与ELISA法比美。,诱发新生儿DIC的因素未足月产先兆子痫胎盘早剥妊娠高血压综合征,DIC,D D 检测与妊娠高血压综合征,妊娠高血压综合征 患者存在着凝血与纤溶平衡失调的因素, 与非孕及正常妊娠妇女相比, D D 水平有显著性差异, P0.05，并且随病情加重而升高,如不及时处置极易形成血栓倾向。提出论点：患者血中D D 水平异常升高可能是妊娠高血压综合征发生D IC 时 最早出现的！,D-D 检测与胎盘早剥,检测血清D-D 对胎盘早剥诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为 67%、93%、91%、48%。血小板计数、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间和纤维蛋白原水平等的敏感性尚不足20%。提出论点： D-D 水平是早期诊断胎盘早剥的快速、有效方法。,DIC诊断标准,DIC临床表现缺乏特异性 1 : 临床需要医护人员密切观察， 2 : 诊断需要实验室提供分析指标， 90%的患者：PLT 、APTT、PT、纤维蛋白原含量、3P实验及D-D 确诊。 要求简单实用，先易后难 。 提出论点： 后者为首选 ！,-二聚体溶栓药物疗效的监测指标,D-D 检测与肝病患者,肝病患者：血液呈高凝状态 其血管内皮的损伤激活了外源性凝血途径, 最终激活纤溶系统导致D - D 增加。 肝病并发纤溶亢进引起的出血倾向, 必须动态观察血浆D D水平,预警！ 重要的临床应用价值,D- D 检测与恶性血液病,白血病 患者易并发凝血功能紊乱, 可表现为出血、血栓。白血病细胞释放多种促凝活性物质及纤溶酶原激活物。进入血中引起凝血功能紊乱所致。 指导临床治疗有较重要的意义提出论点： D D 检测可作为白血病患者体内出凝血异常及纤溶亢进诊断的有效指标 。,DD 检测与恶性肿瘤,大量的文献表明 ： 肿瘤可以引起患者D- D浓度升高，并且可以作为分期、预后等判断标准。Masatoshi Oya等在一项研究中发现 ： 结直肠癌患者 D- D比良性疾病患者的明显要高，术前的D- D与肿瘤的病理结果和分期正相关，术前D- D水平高的患者，术后生存期明显要比低的患者短。 提出论点： ？！,D- D升高与动脉粥样硬化的发生和严重程度有关。 研究发现： 血浆C反应蛋白(CRP) 、 纤维蛋白原( Fib) 、 D D的联合检测, 提出论点： 可反映原发性高血压 病情发展程度, 为早期诊断和及时有效治疗提供依据。,D- D检测与心、脑血管疾病,急性心肌梗死,急性心肌梗死实验,冠心病又分为三组：急性心肌梗死组稳定性心肌梗死组不稳定性心肌梗死,急性心肌梗实验结果,1、急性心肌梗死组、不稳定心绞痛组 D D 、Fib 含量及阳性检出率明显高于稳定性心绞痛组 和对照组, 2、而急性心肌梗死组的D D 、Fib含量又明显高于不稳定心绞痛组， 3、 同时发现：重度病变组 D D 、Fib含 量高于轻、中度病变组。,急性心肌梗死实验的结论,提出论点： 急性心肌梗死发病时, 其血浆D-D的含量明显升高, 反映了患者体内有血栓形成。 血浆D-D 检测可以为临床提供急性心肌梗死的诊断指标 。 。,三、 D- D检测的进展,1. D- D和急性主动脉瘤 Sodeck 等研究发现D- D水平的检测,可以排 除急性主动脉瘤，诊断的 敏感性为100%。然而： 急性主动脉瘤是一种威胁生命的疾病 D- D水平不应作为诊断该病的唯一依据, 应结合其他检查共同确诊。,D-D 检测的进展,2 .yengli等研究了血中FDP物和DD 水平对硅 沉着(矽肺)病早期诊断的意义。 发现 ：硅沉着病早期FDP和 DD水平很高,随着病情的发展, 水平逐渐下降,尤其是 DD特异性较高作者认为： 2项指标有希望用于(矽肺) 的早期诊断, 尤其是对大规模筛查 有很高适用的价值。即有望用溶栓药物达到早期治疗的效果, 将为(矽肺) 病治疗开辟另一途径。,D- D检测的进展,3. 研究发现：深静脉血栓患者其D- D水平低于正常者，复发概率很低,有较高的阴性预测值。 有研究发现：608 例无明显诱因、初患静脉血栓栓塞的患者，在接受了 3 个月口服抗凝剂治疗，停药1 个月后检测D- D 。水平异常 正常D- D水平 者较水平正常者的复发风险率高2.27% 。,D-D 检测的进展,4.血液透析：促红细胞生成素治疗有几种不良反应，包括血 栓形成、高黏血症、高血压和潜在的癌变可能。 接受血液透析 、癌症或化疗引起贫血的患者， 使用促红细胞生成素有严格的用药指征。 科研人员： 开始研究促红细胞生成素治疗的凝血标志物。,D- D检测的进展,5.化疗某项关于使用沙利度胺治疗多发性骨髓瘤患者血栓病的研究发现： D- D水平高者其静脉血栓栓塞发生的概率大，延长抗凝剂使用时间可以有效预防血栓的发生。但这一结论尚需更多的试验予以证实,D-D 检测的进展,6.据报道多种化疗药和免疫抑制剂均可增加血栓形成的风险。研究发现慢性B 淋巴细胞白血病患者接受抗CD20 单克隆抗体（利妥昔单克隆抗体）治疗后可出现细胞因子释放综合征，包括D- D、乳酸脱氢酶和转氨酶的 。Weitz 等发现乳腺癌和肺癌患者重复系统的化疗周期可导致D- D水平，化疗前单独使用肝素可预防此现象。 可监测化疗诱导血栓 ，此结论还有待证实。,D- D检测的进展,7.干细胞移植：干细胞移