重组人胰岛素生产工艺ppt课件

重组人胰岛素和重组人生长激素生产工艺，2010.4.13，1，重组人胰岛素，定义：胰岛素是胰岛细胞由内源性或外源物质葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等分泌的蛋白质激素。胰岛素的生物合成胰岛素合成的控制基因在11对染色体短臂上。在细胞的核中，胰岛素基因部位DNA转录到mRNA，mRNA从细胞核转移到细胞质内质网，翻译成由109个氨基酸残基组成的全胰岛素源。Proinsulin经过蛋白质水解作用，生成由86个氨基酸组成的长肽链胰岛素。胰岛素与细胞浆中的微气泡一起进入骨固体，经过蛋白质水解酶的作用，切断与31，32，60岁精氨酸连接的链，产生没有效果的c肽，同时生成胰岛素，分泌到细胞外进入血液循环。没有被蛋白酶水解的胰岛素的生物活性只有胰岛素的10%。结构：胰岛素由a和b两肽链组成。a链中有21个氨基酸，b链中有15个30个氨基酸，共26个51个氨基酸。其中A7(Cys)-B7(Cys)，A20(Cys)-B19(Cys)四个半胱氨酸的巯基形成了连接a和b两个链的两个二硫化键。此外，a链的A6(Cys)和A11(Cys)之间存在二硫化连接。2，猪胰岛素牛胰岛素赖胰岛素(elilai，快速影响Ins)门冬胰岛素(norhenord，快速影响Ins)胰岛素胰岛素(anwant，长时间Ins)，人胰岛素原，B30A8A10B30B28B29B28A21B31B32，B32，3，3DStructureofInsulin，胰岛素二聚体(dimer)，胰岛素六聚体(hexamer)，4，Ins的特性，5，胰岛素的功能性胰岛素是体内降低血糖的唯一激素，糖原，糖尿病，消耗性疾病的药理作用。目前临床使用的胰岛素源1，动物胰岛素：从猪和牛的胰腺中提取，两者药效相同，但与人类胰岛素相比，猪胰岛素中的1个氨基酸不同，牛胰岛素中的3个氨基酸不同，因此容易产生抗体。2、准合成胰岛素：将猪胰岛素的第30个丙氨酸替换为与人类胰岛素相同的苏氨酸，就是半合成胰岛素。3、重组人胰岛素(现阶段临床上最常用的胰岛素):利用生物工程技术获得的纯度高的生物合成人胰岛素，其氨基酸排列顺序及生物活性与人体本身的胰岛素完全相同。6，1921年从动物胰腺提取胰岛素，开创了人类胰岛素治疗的历史。1926年再结晶胰岛素1930年传统中长期动物胰岛素1970s单峰胰岛素和单组分胰岛素70年代末准合成胰岛素1982使用基因重组技术生产的人类胰岛素正式发行。90年代现在重组人胰岛素类似物包括超短波效应和长期人胰岛素类似物在内，已成功研究并上市。7，动物胰岛素(28种)，8，半合成胰岛素(5种)，9，基因重组胰岛素(27种)，10， 货币东宝1998年12月，中国第一个基因重组胰岛素“丹参素”丹参素r-现有重组人胰岛素注射丹参素n-低蛋白重组人胰岛素注射丹参素30r-30/70混合重组人胰岛素注射(30%现有重组人胰岛素和70%低蛋白重组人胰岛素)深圳市柯兴水推挤华西医学院制药工厂，上海第一生化制药工厂，武汉生化制药工厂等，11，临床胰岛素分类，一般胰岛素：从动物胰腺中提取长期胰岛素的长期胰岛素类似物胰岛素类似物非注射胰岛素，12，传统长期胰岛素制剂低蛋白锌胰岛素：胰岛素，鱼精及锌结晶。例如：耶利哥、人类(rdna，Escherichia coli)诺诺(rdna，Saccharomyces cerevisiae)胰岛素锌悬浮：松锌胰岛素和普通胰岛素的悬浮：耶利哥、胡大棒迅速注射后15分钟发酵，30 60分钟达到药效顶峰。药效维持时间短，约3小时(2 4小时)。药动力学很像人体内源性胰岛素分泌，饭后能很好地控制血糖，不容易引起低血糖。14，Lispro (rehmannial胰岛素，Humalog)是临床用快速胰岛素类似物，由美国门房交替生产人胰岛素的B28和B29位氨基酸。即可从workspace页面中移除物件。Aspart(门冬氨酸胰岛素，诺沃罗格)是丹麦诺和诺德开发的。结构与人类胰岛素的不同之处在于，b链28上的脯氨酸被天冬氨酸取代。APIDRA(赖谷胰岛素，Apidra)安凡特公司开发了用利辛和谷氨酸代替人胰岛素B3位的天冬氨酸，B29位的赖氨酸。15，长期胰岛素-人胰岛素类似物，1。胰岛素甘氨酸：商品名称Lantus -甘氨酸代替胰岛素a链中的21位天冬氨酸，在b链末端添加2个精氨酸。把胰岛素与带正电的氨基酸残基结合，改变等电点，将等电点从5.4提高到中性。这样，胰岛素类似物在酸性溶解，生理上几乎中性的条件下决定。2.insulitemir: Levemir -胰岛素b链29位的赖氨酸侧链由酰化连接N-16-烷基酸的14碳游离脂肪酸此游离脂肪酸与白蛋白结合，延迟与胰岛素受体的结合，延长半衰期。16，InsulinDetemir(Levemir)诺和诺瑟公司开发，glargine(Lantus)安班特公司开发，17，胰岛素肺吸入剂-辉瑞，班安特，内克塔联合逆转酶法已经淘汰。模仿自然合成途径，通过胰岛素的cDNA合成，表达产物是胰岛素，通过工具酶切割，去除C肽引起的胰岛素。20，InsA链，InsB链，大肠杆菌转化，发酵，a链，b链，纯化，二硫键，活性胰岛素，AB链合成人胰岛素，21，逆转录酶全肽序列通过正确的分泌途径将目