照山白抗前列腺增生药效物质基础与药物代谢动力学研究(可编辑)

照山白抗前列腺增生药效物质基础与药物代谢动力学研究河必运钭六拳博士研究生毕业论文照山白抗前列腺增生药效物质基础与药物代谢动力学研究究杨秀岭研生教授师张兰桐导业专药理学二级学院药学院研究起止日期年月一年月提交日期年月中文摘要照山自抗前列腺增生药效物质基础与药物代谢动力学研究摘要中药现代化研究主要解决的问题之一是阐明其药效物质基础和作用机制,使传统中药的理论、学说和经验符合当代技术特征,从本质上说明中药的安全、有效。只有明确了中药的有效成分,才能使中药的药理、毒理更加明确,才能使质量更加可控,才能建立规范化、标准化的质量评价体系,使中药的质量、药效以及安全性评价与国际接轨。照山白为杜鹃花科植物照山白办如沈办聊聊朋耽扬扰聊的枝叶,广泛分布于东北各省及河北、甘肃、山东、四川等省。照山白中含有皂苷、鞣质、还原性物质、多糖、黄酮、油脂和挥发油等,具有祛风散寒,活血通络,祛痰止咳的作用,主要用于治疗急慢性气管炎、哮喘、痢疾、痛经、产后周身疼痛、高血压等。现代医学研究表明,照山白提取物具有杀菌抗炎的作用,临床研究证明照山白浸膏片用于前列腺增生症,用药后病人经超声检查,前列腺有不同程度的缩小。为探讨照山白抗前列腺增生的药效物质基础,我们对照山白进行了系统地研究。本课题利用药理学和血清药物化学的研究方法,进一步确定照山白治疗前列腺增生的物质基础,分离出有效的单体成分,建立多成分同时定量分析方法,进而对各有效成分进行药代动力学和体内代谢研究,为研制开发新型抗前列腺增生药物奠定理论基础。第一部分照山白抗前列腺增生药理作用研究目的研究照山白提取液抗前列腺增生作用,确定照山白抗前列腺增生作用的有效部位,并进一步研究其有效部位的抗炎、镇痛、抗前列腺增生作用。方法照山白乙醇提取液蒸去乙醇,加水分散,依次用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到部分即乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部分。用丙酸睾丸素引起的小鼠前列腺增生模型研究照山白总提物、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部分的抗前列腺增生作用,确定其有效部位。采用聚酰胺柱层析制备照山白总黄酮使总黄酮含量。中文摘要正常雄性小鼠,用丙酸睾丸素引起前列腺增生模型研究照山白总黄酮的抗前列腺增生作用用小鼠毛细血管通透性和耳廓肿胀模型研究其抗炎作用用小鼠醋酸扭体模型研究其镇痛作用。结果对照山白总提物抗前列腺增生作用的研究显示,照山白总提物对丙酸睾丸素所致的前列腺增生有明显的抑制作用。高、低剂量组的前列腺指数分别为土和土,与模型组比较士明显缩小,提示照山白具有明显的抗前列腺增生作用。对照山白的各部分的研究显示,乙醚部分没有抗前列腺增生作用胗,乙酸乙酯部分作用明显,高、低剂量组的前列腺指数分别为土和士,与模型组比较士,显示具有明显的药理作用尸,正丁醇部分高剂量组有明显抗前列腺增生作用尸,低剂量组作用较弱。残留部分前列腺指数和模型组比较没有显著差异。照山白总黄酮高、中、低个剂量组前列腺指数分别为士、士和士,与模型组土比较明显减小,说明照山白总黄酮高、中、低剂量组均可显著抑制丙酸睾丸素所致的实验性前列腺增生。照山白总黄酮低、中、高个剂量组能显著抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加,抑制率分别为尸、尸和尸。照山白总黄酮中、高剂量组能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为和。照山白总黄酮中、高剂量组能显著抑制醋酸所致的小鼠扭体反应,减少扭体次数。结论照山白提取物有明显的抗前列腺增生作用,药效物质基础是总黄酮部分。照山白总黄酮具有明显的抗前列腺增生、抗炎、镇痛作用。第二部分照山白黄酮类化学成分的研究目的研究照山白总黄酮灌胃给药后,根据能够吸收入血的化学成分,并以此为指导,对照山白总黄酮的成分进行研究。探讨用此方法进行中药药效成分研究的可行性。,方法取只大鼠,分别照山白总黄酮,每天次间隔连续给药天,第天给药次,后眼眶取血,血样处理后取,注入高效液相色谱仪。记录色谱图。中文摘要照山白提取液利用聚酰胺柱色谱,以不同浓度的乙醇为洗脱系统,初步分离,再以硅胶柱色谱,采用氯仿一甲醇为洗脱系统进一步分离,制备液相分离精制,得到个化合物。利用理化性质、光谱数据鉴定结构。结果高效液相色谱图显示,大鼠灌胃给药后,在取样时间点各黄酮成分在血液中均有吸收,但吸收程度不同。分离得到的个化合物,经鉴定分别为槲皮素、山柰酚、槲皮素一一,葡萄糖苷、金丝桃苷、槲皮昔和杨梅苷,其中槲皮素一一一葡萄糖苷、槲皮苷和杨梅苷个化合物为从该植物中首次分离得到。结论本研究进一步阐明照山白抗前列腺增生的药效物质基础。并为照山白总黄酮质量标准的制订、体内药代动力学及体内代谢研究奠定了物质基础。第三部分高效液相色谱法同时测定照山白中杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素的含量目的建立反相高效液相色谱法测定照山白中种主要黄酮类成分杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素的含量。为照山白药材的质量控制提供有效的分析手段。,方法色谱条件为采用色谱柱,对流动相的组成、配比、流速等因素进行优化,确定最佳色谱条件。对照品溶液的制备分别精密称取杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素适量,置量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度。分别精密吸取上述各溶液于量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。,置标准曲线的制备精密吸取对照品溶液量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,采用倍率稀释的方法,分别进样山,记录色谱图和峰面积。以各成分的峰面积】,对浓度托嵋进行线性回归分析,得标准回归曲线方程。方法学考察考察方法的精密度、回收率和稳定性试验。样品含量测定在确定的色谱条件下,测定照山白中杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素的含量。,结果色谱条件色谱柱为】色谱柱“,流动相为乙腈冰醋酸溶液,梯度洗脱中文摘要,检测波长为,柱温。流速,进样量“。在上述色谱条件下,被测组分与其它组分分离效果好,无其它杂质干扰,理论板数均大于,分离度大于,不对称因子均在范围内。严,线性范围为回归方程分别为杨梅苷卜严,线性范围为“佃金丝桃苷卜静京幔一槲皮苷册产,线性范围为槲皮素卜卜严,线性范围为。最低检测限分别为杨梅苷憋,金丝桃苷岭一,。槲皮苷,槲皮素方法学考察方法精密度良好,杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素的分别为,和。重复性试验结果表明,照山白中杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素含量的分别为、和,重复性好。回收率试验结果表明,杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素的平均回收率分别为、和分别为、和内稳定性良好,分别稳定性试验结果表明,供试品溶液在为,。依据上述色谱条件进行分析,由回归方程计算得到样品中杨梅苷的含量为,金丝桃苷的含量为,槲皮苷的含量为,槲皮素的含量为。结论本文首次建立了冲如法同时测定照山白药材中种黄酮含量的方法。经方法学研究表明,本方法准确可靠,灵敏度高。可作为照山白药材和制剂中有效成分含量测定方法。本方法的建立为照山白药材的质量控制提供了有效的分析手段,“为提高中药的质量标准奠定了基础。第四部分照山白总黄酮中杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷的药代动力学研究目的建立反相高效液相色谱法同时测定照山白总黄酮中杨梅苷、金中文摘要丝桃苷和槲皮苷的血药浓度,研究大鼠灌胃和静注给药后体内药代动力学参数,阐明大鼠灌胃和静注给药后体内药代动力学特征。方法采用高效液相色谱仪,色谱柱,岬,流动相为乙腈一冰醋酸溶液,梯度,洗脱,进样量,检测波长为,柱温。流速血浆样品的预处理精密吸取大鼠血浆山,置离心管中,精以,离心,取上清密加入甲醇“,涡旋混合液,供田分析。以峰面积外标法进行定量。对照品溶液的制备分别精密称取杨梅苷金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素适量,置量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度。分别精密吸取上述各溶液于量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。标准曲线的制备取空白血浆,置离心试管中,加入不同浓度的系列标准溶液,混匀,按“血浆样品预处理”项下依法操作,记录色谱峰面积,绘制标准曲线。方法学考察考察方法的专属性、定量下限、精密度和准确度、回收率和稳定性试验。灌胃给药取雄性大鼠,按。单剂量灌胃给药,分别于给药前、后不同时间眼内眦静脉丛取血,置于肝素化的离心塑料管中,混匀,。离心,取上清液,冷冻至冰箱保存,备用。静脉注射给药雄性大鼠,以单剂量尾静脉注射,于给药前、后不同时间眼内眦静脉丛取血,置于肝素化离心塑料管中,混匀,。离心,取上清液,冷冻至冰箱保存,备用。药代动力学分析所得血药浓度一时间数据,采药代动力学处理软件进行自动拟合,在此基础上,经批处理计算主要药代动力学参数。绝对生物利用度计算。结果在此色谱条件下,杨梅苷、金丝桃苷及槲皮苷分离良好,血浆中杂质及内源性物质均不干扰测定,样品中杨梅苷、金丝桃苷及槲皮苷的理论塔板数均大于,分离度大于,保留时间分别为杨梅苷中文摘要。,金丝桃苷,槲皮苷。,线性范围回归方程分别为杨梅苷产鼢金丝桃苷净蹦,线性范围槲皮苷净似,线性范围。结果表明,在各自的浓度范围内,种成分的峰面积与浓度有良好的线性关系。最低检测限分别为杨梅苷“,金丝桃苷“,槲皮苷岭。测得杨梅苷低、中、高种不同浓度样品的精密度与准确度,强,曰内精密度,日间精密度。金丝桃苷低、中、高种不同浓度样品的精密度与准确度,日内精密度,日间精密度。槲皮苷低、中、高种不同浓度样品的精密度与准确度,日内精密度,日间精密度。杨梅苷低、中、高种不同浓度的血浆样品回收率分别为,。金丝桃苷低、中、高种不同浓度的血浆样品回收率分别为,。,槲皮苷低、中、高种不同浓度的血浆样品回收率分别为,。稳定性试验结果表明,含药血浆样品室温放置稳定,杨梅苷,。金丝桃苷,槲皮苷迮,。预处理后的样品溶液室温放置、显示,种成分均比较稳定,含量无明显变化,杨梅苷迮,金丝桃苷,槲皮苷,。士大鼠灌胃给药后,金丝桃苷符合一室模型。其戕为,/。为土嵋。,为士,/。为土士,为士,为肛。士槲皮苷符合一室模型。其觚为土,觚为,/。为士,/。为土,。为士,为士岭。杨梅苷口服给药后,血中浓度很低,只能检测到几个点的血药浓度,因此无法进行体内药代动力学中文摘要参数的估算。大鼠尾静脉注射给药后,三者均符合二室模型,杨梅苷,/为士,/为。士,为士鹇。,为金丝桃苷/为士,/为士士烬。槲皮苷/为土,/为土,为土“。金丝桃苷的绝对生物利用度为,槲皮苷的绝对生物利用度为。结论本文首次建立了同时测定照山白总黄酮中杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷血药浓度的瑚,分析方法,方法专属性强,结果准确可靠。首次阐明了大鼠灌胃和静脉给予照山白总黄酮后,杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷的药代动力学特征,口服给药后金丝桃苷和槲皮苷的药代动力学符合一室模型,静脉给药后种成分的药代动力学均符合二室模型,金丝桃苷和槲皮苷的绝对生物利用度分别为和。说明不同结构对其体内吸收有很大的影响。第五部分金丝桃苷在大鼠体内的代谢研究目的采用瑚/技术研究金丝桃苷口服和静脉给药后在大鼠体内的代谢物,推测体内代谢过程,为其它黄酮在体内代谢的研究奠定基础。方法采用,/技术。高效液相色谱条件色谱柱为色谱柱,柱,岬流动相乙腈甲酸流速温进样量。质谱条件电喷雾离子化源正离子检测源电压鞘气流速毛细管温度。扫描范围砒相对碰撞能。口服给药大鼠给予金丝桃苷,给药次间隔每次,眼眶取血置入肝素化离心管,离心分体重,给药后离血浆,并连续收集尿液,置于冰箱冷冻保存。静脉给药大鼠尾静脉注射金丝桃苷,按。体重,给药后,眼眶取血置入肝素化离心管,离心分离血浆,并连续收集尿液,置于冰箱冷冻保存。中文摘要生物样本的制备血样和尿样均用固相萃取小柱处理,进行分析。结果灌胃给药后首次发现个代谢产物,经质谱分析推测分别为金丝桃苷苷元槲皮素、槲皮素甲基化产物、槲皮素甲基化产物的硫酸结合产物和槲皮素的葡萄糖醛酸结合产物。静脉注射给药后在血液和尿中首次发现个代谢产物,经质谱分析推测分别为金丝桃苷和葡萄糖醛酸的结合产物、金丝桃苷的甲基化产物、金丝桃苷甲基化产物的葡萄糖醛酸结合产物、金丝桃苷的硫酸盐代谢产物和金丝桃苷甲基化后的硫酸盐代谢产物。结论本文首次应用卸/联用技术,对金丝桃苷经灌胃和静脉给药后在大鼠体内的代谢进行了研究。研究结果表明,灌胃给药后,部分金丝桃苷在小肠内在乳糖苷水解酶的作用下去糖基化,被乳糖苷水解酶水解为苷元槲皮素,吸收入血,槲皮素在体内进一步代谢为甲基化产物、葡萄糖醛酸结合物以及硫酸盐结合物。静脉注射给药后金丝桃苷主要以原形存在,在血中和尿中可检测到微量的代谢产物,主要是金丝桃苷的葡萄糖醛酸结合物和甲基化产物,以及硫酸结合产物。关键词照山白总黄酮前列腺增生抗炎镇痛化学成分结构鉴定杨梅苷金丝桃苷槲皮苷槲皮素含量测定反相高效液相色谱法药代动力学代谢物英文摘要贝屁移咖比张加刀霉嬲,口船觑跖船蓟露庇如羽匆豫砌乃矿伍耗琵士士士,之办如如玎加聊聊朋刀砌扰耽,锄】七,甜耽厂办如如圪咖聊尸口托砌,印印行凡,扰砌如如玎办加以托砌,巧印印尺办如如玎幻日耽砌扰朋叩行办。比跑规咖规砌“垅巾印英文摘要嚣雹卫已庇口船加,托倪阮叩印,浙,行印仔印印叫尺办如冶阳咖垅朋配,日托砌“聊“。印印土士,士虢,埏印印士土。,、士尸。,仔尺办如如耽办聊阳以如“优,。英文摘要。一土、士,熊土,土垅刀扬甜聊尺办如比聊加朋矗,印、妒。,矗尺办幻沈托办聊聊,祝刀砌甜聊巧廷,尺办如沈刀办耽聊阳门砌“聊叩,。,印,印,甜五口如如,而聊历记朋,珈埘竹办如如胛矗而聊垅记口门砌“聊尺乃如如阳加垅,规日托砌铭,托办如沈”加聊耽以砌“,巧般向印仃印,如山,英文摘要知,叩一,行尺办。比如以历叼聊朋口以砌扰聊,巧,一,一,办如据以幻,行,”即砌“,咒,、叩办如如阳加朋阳门砌优聊,而砒朗跑,砌叼朋聊记,仃托珐跖聊,办如沈阳咖聊耽口玎砌“,酉,肛,“,、英文摘要够,玎,腕阳胛砌甜耽办如毖规阳聊印重,一,铲,行,伍,卜必厂,“,】,三,“。,卜产,卜拱,产叫,“,眦,锄,英文摘要,尺力出圪咖聊聊阳砌“聊,玎尺办如如船办聊耽配门砌扰聊,办如刀咖聊聊纪厂口胛砌甜聊里,贸忌口匆台咒如聊珊记口挖砌阳“,仃办如把门加聊聊尸口心砌“聊,一,矗,。唧“如,英文摘要嵋,烬“肛,行“啪,锄,玎,巧仔办。如沈聆办聊聊耽砌“聊艳如,也如“锄”,丘办如比力咖聊川口门历甜耽。百仔叫,锄如”,肿,印英文摘要,。,厂斛,】厂,“,叫,肛。,巧抽蠡矗办如如玎办聊阳以砌扰聊,土。,士,/士/。土士士,一,土,士“,/土士/士,。士,。,仔尺办幻如圪办垅聊刀砌扰聊、,土锄/,/土,士肛。,/土士士,。一,士土/,/,英文摘要土,仔历臼台刀矗而垅垅记阳玎砌扰,疵,仃一印,仃,删,删/瓜啪英文摘要,巧一仔,仃锄一印丑盆朋,如,办,如玎而聊聊以托砌扰叩矽一英文缩写英文缩写中文名称缩写英文名称曲。肿玎液一质联用掖一顾跃用上。核磁共振保二极管阵列检测器曲之反相高效液相色谱铲。尺办。如沈耽办。聊照山白总黄酮朋口刀砌扰聊前列腺增生电喷雾离子化相对标准差研究论文照山囱抗前列腺增生药效物质基础与药物代谢动力学研究中药现代化研究主要解决的问题之一是阐明其药效物质基础和作用机制,使传统中药的理论、学说和经验符合当代技术特征,从本质上说明中药的安全、有效。只有明确了中药的有效成分,才能使中药的药理、毒理更加明确,才能使质量更加可控,才能建立规范化、标准化的质量评价体系,使中药的质量、药效以及安全性评价与国际接轨。前列腺增生西印,是泌尿外科和男性科的常见疾病,近年来呈现发病率逐年增加的趋势,岁以上的男性患病的约占。前列腺增生症归属于中医之“癃闭”的范畴,其病机属三焦气化失职,是假实真虚、本虚标实的膀胱有水不通症。治则宜祛瘀通络,软坚散结,则可以起到迅速改善局部微循环,缓解纤维化,改善膀胱颈、后尿道粘膜的炎症及充血水肿。针对于前列腺增生的病因和症状,研发了很多化学合成药物,如。受体阻断剂类特拉唑嗪、阿夫唑嗪等,此类药物可使尿流速度提高,症状改善。但据报道,从患者个体来看,并不是全部患者都取得了明显的疗效,而且毒副作用较大。还有还原酶抑制剂类如非那雄胺,为睾酮的不可逆竞争性抑制剂,此类药物可使前列腺体积减小,并抑制进一步增大,但它起效慢,副作用明显,治疗费用较高。中药和天然药物包括植物药因具有针对于机体的综合复杂的调控作用,在治疗前列腺增生方面显示了独特的疗效。如锯齿棕果实的脂溶性成分有改善的疗效并与非那雄胺等同,然而无非那雄胺影响性功能的副反应。还有非洲臂果木的提取物在改善国际前列腺症状评分、生活质量、尿流率方面有效。天然药物的药理活性主要集中在调节体内性激素水平、抗炎消肿、改善膀胱颈痉挛、增加逼尿肌力、抑制纤维增生等方面。中药治疗前列腺增生的成分主要有黄酮类、一谷甾醇及其酯类和苷类衍生物、没食子酸衍生物等。照山白为杜鹃花科植物照山白尺办如沈阳咖聊玎砌“朋的枝叶,广泛分布于东北各省及河北、甘肃、山东、四川等省。照山白中含有黄酮、研究论文皂苷、还原性物质、鞣质、多糖、油脂和挥发油等,具有祛风散寒,活血通络,祛痰止咳的作用,主要用于治疗急慢性气管炎、哮喘、痢疾、痛经、产后周身疼痛、高血压等。现代医学研究表明,照山白提取物具有杀菌抗炎的作用,临床研究证明照山白浸膏片用于前列腺增生症,用药后病人经超声检查,前列腺有不同程度的缩小。经检索国内外有关文献,其作用的物质基础未见报道,为探讨照山白抗前列腺增生的药效物质基础,我们拟对照山白药材进行系统地研究。本课题旨在采用药理学和血清药物化学的研究方法,进一步确定照山白治疗前列腺增生的药效物质基础,确定其有效部位,分离出有效单体成分,建立多成分定量分析方法,建立体内血药浓度的检测手段,进而对各有效成分进行药代动力学和体内代谢研究,为研制新型的抗前列腺增生药物奠定理论基础。研究论文第一部分照山白抗前列腺增生药理作用研究“圣刖吾照山白为杜鹃花科植物照山白办如如圯办聊脚阳刀砌跣垅的枝叶,照山白中含有黄酮、皂苷、鞣质、还原性物质、多糖、油脂和挥发油等,具有祛风散寒,活血通络,祛痰止咳的作用,主要用于治疗急慢性气管炎、哮喘、痢疾、痛经、产后周身疼痛、高血压等【】。曾有文献报道照山白浸膏片用于治疗前列腺增生有一定的疗效【,】,但对其有效作用部位迄今为止未见报道,为探讨照山白抗前列腺增生的物质基础,本研究对照山白总提物、乙醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分及残留部分进行了抗前列腺增生作用研究,以进一步探讨其药效物质基础。材料与方法材料试验药物照山白药材购于石家庄乐仁堂,经河北医科大学药学院生药学教研室聂凤裎教授鉴定阿斯匹林片,石家庄制药集团欧意药业有限公司产品,批号己烯雌酚片,石家庄华龙药业股份有限公司产品,批号丙酸睾丸素注射液,天津金耀氨基酸有限公司,。,批号动物昆明小鼠,河北医科大学实验动物中心提供,动物合格证号冀医动字号。方法照山白总提物的制备称取照山白药材,加乙醇倍量,浸泡,加热回流提取次,每次,过滤,滤液合并,减压浓缩至无醇味,加水调节成每毫升相当于原生药的溶液,即得。照山白不同部位的制备取项下制备的溶液,依次用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别研究论文。,水部分减压浓缩,蒸去残留溶剂,加水至回收溶剂,加水照山白总黄酮的制备照山白总黄酮含量测定方法一分光光度法标准曲线的绘制量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻精密称取金丝桃苷,置,置量度,摇匀。分别量取此溶液、瓶中,甲醇定容。分别取各浓度溶液,加水,加醋酸一。三氯化铝,摇匀,放置。醋酸钠,加,照分光光度法在波长测定吸收度用水作空白对照,将测得的吸光度对金丝桃苷浓度作图,绘制标准曲线,其回归方程为,。,线性范围为“。照山白总黄酮含量测定,加热回流提取,精密称取照山白粉末,加倍量的水浸泡每次,提取次,过滤,滤液合并,减压回收溶剂,甲醇溶解,置量瓶,甲醇定容,过滤,取,加水,加。醋酸一三氯化铝,摇匀,放置,照醋酸钠,加分光光度法在波长测定吸光度,同时做空白。根据标金丝桃苷准曲线计算总黄酮含量,结果总黄酮平均含量按即丝桃苷计算为。照山白总黄酮的制备【】,取照山白药材,加倍量的乙醇浸泡,加热回流提取,每次提取次,合并提取液用纱布过滤,减压浓缩,过滤,聚酰胺柱层析,先用水洗脱,去除其毒性成分棂木毒素,直到洗脱液与/试剂反应不显粉红色为止,表明棂木毒素已经洗脱完全,弃去水部分,再用乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩蒸干即得总黄酮浸膏。总黄酮的含量为。药理作用研究总提物及各部位药理作用研究研究总提物及各部位对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的影响【】,雄性小鼠只,体重,随机分为正常组模型组照山白总提物组高剂量组照山白总提物低剂量组组乙醚部分高剂量组乙醚部分低剂量组乙酸乙酯部分高剂量组研究论文正丁醇部分高剂量组正丁醇部分乙酸乙酯部分低剂量组水部分低剂量组己烯雌低剂量组水部分高剂量组,酚组除正常组外,各鼠于皮下注射丙酸睾丸素,正常组和空白照组生理盐水蝇一,其余各组灌胃给药高剂量组相当于原药材,低剂量组相当于原药材。,己烯雌酚组己烯雌酚酉,灌胃容量为,每天次,每隔天称重一次,根据体重调节给药剂量。连续给药天,末次给药后,称小鼠体重后剖检小鼠前列腺,并小心将其完整地取出,称前列腺湿重,计算前列腺指数前列腺指数前列腺重/体重。总黄酮药理作用研究对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的影响岭】雄小鼠只,体重,随机分为组,各鼠于皮下注射丙酸睾丸素,对照组生理盐水,照山白总黄酮组分别照山白总黄酮、,己烯雌酚组己烯雌酚,灌胃容量为,每天次,每隔天称重一次,根据体重调节给药剂量。连续给药天,末次给药后,各鼠称体重后剖检小鼠前列腺,并小心将其完整地取出,称前列腺湿重,计算前列腺指数前列腺指数前列腺重/体重。对冰醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响】雄小鼠只,体重,随机分为组,对照组生理盐水,照山白总黄酮组分别照山白总黄酮、一,阿司匹林组阿司匹林埏,灌胃容量为,每天一次,连续天,末次给药后,尾静脉注射伊文思蓝生理盐水溶液。,并立即腹腔注射乙酸生理盐水,后处,死小鼠,腹腔注射生理盐水,轻揉腹部后剪开腹部皮肤肌肉,用吸管吸取腹腔液,离心,取上清液于分光光度计处测定吸光度。以空白对照组平均吸光度和给药组平均吸光度之差与空白对照组平均吸光度之比计算抑制率。对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响雄性小鼠只,体重,随机分为组,分组及给药方法同项,连续天,末次给药后,用二甲苯均匀涂于小鼠右耳两侧,研究论文打孔器在两耳相同部位切下后断头处死,剪下两耳,用直径耳片,置于精密天平上称重,计算右耳肿胀度肿胀度右耳片重一左耳片重。对小鼠醋酸扭体的影响雄性小鼠只,体重,随机分为组,分组及给药方法同项,连续天,末次给药后,腹腔注射醋酸溶液内的扭体次数。,记录给醋酸后结果照山白总提物及各部位对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的影响试验结果显示,模型组的前列腺指数明显低于正常组尸,表明模型制备成功,从试验药物来看,照山白总提物对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生有明显的抑制作用。高、低剂量组的前列腺指数分别为土和士,与模型组比较士明显缩小,提示照山白有明显的抗前列腺增生作用,结果见表。对各部分的研究显示,乙醚部分没有抗前列腺增生作用,乙酸乙酯部分作用明显,高、低剂量组的前列腺指数分别为土和土,与模型组比较士显示有明显的药理作用尸正丁醇部分高剂量组有明显抗前列腺增生作用,低剂量组作用较弱。残留部分前列腺指数和模型组比较没有显著差异,结果见表。总黄酮对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的影响照山白总黄酮高、中、低个剂量组前列腺指数分别为土、士和士,与模型组士比较明显减小,说明照山白总黄酮高、中、低剂量组均可显著抑制丙酸睾丸素所致的实验性前列腺增生,结果见表。总黄酮对冰醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响照山白总黄酮低、中、高个剂量组能显著抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加,抑制率分别为、和尸,结果见表。总黄酮对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响研究论文照山白总黄酮中、高剂量组能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为氏和氏,结果见表。总黄酮对小鼠醋酸扭体的影响照山白总黄酮中、高剂量组能显著抑制醋酸所致的小鼠扭体反应,减少扭体次数,结果见表。研究论文附表表照山白提取液及各部分对雌二醇所致小鼠前列腺增生的影响撒美国公司型液相色谱一离子阱质谱联用仪配有电喷雾离子化源、直接进样用注射泵和“进样器以及数据处理系统,配有光电二极管阵列检测器高效液相色谱仪泵,检测器超声波清洗器北京医疗设备二厂显微熔点仪上海精密科学仪器有限公司,温度计未校正。材料、试剂照山白药材购于石家庄市乐仁堂,经河北医科大学药学院聂凤裎教授鉴定硅胶青岛海洋化工厂聚酰胺一目,系浙江台州市路桥四甲生化塑料厂乙腈色谱纯,美国迪马公司水为重蒸水并经岬滤膜过滤其它试剂均为分析纯。实验动物雄性大鼠,体重土,由河北医科大学实验动物中心提供。实验前禁食,自由饮水。色谱条件,色谱柱色谱柱流动相,乙腈一冰醋酸溶液,梯度洗脱,柱温流速,进样量。检测波长液相色谱一质谱联用仪条件色谱柱锄】色谱柱,岬。流动相,乙腈一冰醋酸溶液,梯度洗脱,柱温。流速,进样量。总黄酮血液吸收成分的研究血清样品的预处理取只大鼠,分别照山白总黄酮一,每天次,连续给药。天,第天给药次,后眼眶取血,离心,取血清,置具塞离心管中,加甲醇,涡旋震荡,混匀,放置,离心,取上清液,氮气吹干,加甲醇溶解,微孔滤膜岬过滤,取,注入高效液相色谱仪,记录色谱图。空白血清加总黄酮研究论文,取空白血清,加入照山白总黄酮的甲醇溶液。处理方法同。取样,注入高效液相色谱仪