本科毕业论文-多种干货多糖含量测定及抗氧化性的研究

本科毕业论文（设计）201届题目多种干货多糖含量测定及抗氧化性的研究学院专业学生姓名学号指导教师职称（学位）完成时间2014年5月10日成绩黄山学院教务处制目录中文摘要1英文摘要2引言31材料与方法411实验材料与试剂412实验器材413实验方法4131粗多糖提取的方法4132标准曲线的制定4133多糖含量的测定方法5134多糖对羟基自由基（OH）消除作用的测定方法5135多糖对超氧自由基（O2）消除作用的测定方法62结果与分析621干木耳粗多糖提取的条件优化及含量的测定6211浸提时间对多糖提取的影响6212浸提温度对多糖提取的影响6213浸提料液比对多糖提取的影响7214提取工艺的优化7215标准曲线的测定和回归方程的建立8216干木耳的粗多糖的含量测定822干枸杞的粗多糖的含量测定923干海带的粗多糖的含量测定924干百合的粗多糖的含量测定925干银耳的粗多糖的含量测定926干红枣的粗多糖的含量测定927干茶树菇的粗多糖的含量测定1028多糖对羟基自由基（OH）的清除作用10281茶树菇多糖10282干百合菇多糖11283枸杞多糖1129多糖对超氧自由基（O2）消除作用12291茶树菇多糖12292干百合多糖12293枸杞多糖133结论1331干木耳多糖提取的优化1332多糖的含量1333抗氧化活性134未来展望14参考文献15致谢16多种干货多糖含量测定及抗氧化性的研究摘要本文选用热水浸提法对干木耳的多糖进行了粗提取，同时研究了不同提取料液比、时间、温度对干木耳多糖提取率的影响。运用了单因素变量法和正交实验组合得出了提取干木耳多糖的最优的条件浸提温度90C，浸提时间35H，浸提料液比140，提取率为1702。并且用同样的方法提取多种不同干货的多糖，硫酸蒽酮法测定了各自多糖含量。选取的枸杞、茶树菇、百合三种干货在不同的抗氧化体系中均有抗氧化性，多糖的浓度与抗氧化能力成一定的剂量效性关系。以维生素C为参照、同浓度条件下茶树菇的抗氧化能力比维生素C强，百合的抗氧化能力和维生素C差不多，枸杞的抗氧化能力比维生素C低。关键词热水浸提；提取；含量测定；抗氧化性RESEARCHAVARIETYOFDRYPOLYSACCHARIDECONTENTANDANTIOXIDANTACTIVITYABSTRACTINTHISPAPER,THEHOTWATEREXTRACTIONMETHODWASUSEDTOCRUDELYEXTRACTPOLYSACCHARIDEOFDRYBLACKFUNGUS,ANDTHEEFFECTSOFDIFFERENTRATIOSOFSOLIDTOLIQUID,TIMEANDTEMPERATUREONTHEEXTRACTIONRATEWEREALSOSTUDIEDBYAPPLYINGSINGLEFACTORANALYSISANDORTHOGONALOPTIMIZATIONEXPERIMENT,THERESULTSOFTHEOPTIMUMEXTRACTIONCONDITIONSWEREOBTAINEDASFOLLOWSEXTRACTIONTEMPERATURE90C,EXTRACTIONTIME35H,RATIOOFSOLIDTOLIQUID140,ANDEXTRACTIONRATE1702INTHESAMEWAY,WEEXTRACTEDPOLYSACCHARIDEOFVARIOUSKINDSOFDRYGOODSANDALSOIDENTIFIEDEACHPOLYSACCHARIDECONTENTWITHTHEANTHRONESULFURICACIDMETHODTHESELECTEDDRYGOODSASMEDLAR,AGROCYBECYLINDRACEAANDLILYALLHAVEINOXIDIZABILITYINDIFFERENTANTIOXIDANTSYSTEMSTHEREARESOMEDOSEEFFECTRELATIONSHIPSBETWEENTHECONCENTRATIONOFPOLYSACCHARIDEANDITSANTIOXIDANTCAPACITYUNDERTHESAMECONCENTRATIONCONDITIONS,COMPAREDWITHVITAMINC,ITCANBEOBTAINEDTHATTHEANTIOXIDANTCAPACITYOFAGROCYBECYLINDRACEAISBETTERTHANTHATOFVITAMINC,THEANTIOXIDANTCAPACITYOFLILYISALMOSTTHESAMEASVITAMINC,ANDTHEANTIOXIDANTCAPACITYOFMEDLARISWORSETHANTHATOFVITAMINCKEYWORDSHOTWATEREXTRACTIONEXTRACTIONDETERMINATIONANTIOXIDANTACTIVITY引言干货是指去除了水分的食品。通常用晾晒、风干等方法来处理。中国是一个饮食大国，干货市场随处可见，它已经成为了我们生活中必不可少的食物之一。干货中含有蛋白质、植酸、多糖等营养成分，经过大量研究证明、这些都具有很高的营养价值。本文主要是针对干货中的多糖进行提取并且研究它的抗氧化活性。多糖是由大于10个单糖失水、缩合而组成的高分子碳水化合物。实质是一种糖链，由糖苷键结合而成。从20世纪下半叶以来，人们发现多糖具有很多的功能特点和生物活性。在临床方面有抗病毒、抗癌、免疫调节、降血糖、治疗等作用；在生活中也有美容的功能；在工业中可用于乳化13。近年来对多糖的提取优化工艺研究比较多，关于多糖的含量测定和它的抗氧化性质研究还是相对较少的。经过科学研究显示，大多数疾病、衰老、癌症的发生都与过量的自由基有关系。多糖的抗氧化活性可以通过消除自由基，使这些危害被有效的克服。所以抗氧化是化妆品、医学治疗等方面的重点研发方向之一。本文中选用了七种干货，选其中一种干货木耳，采用热水浸提法，进行浸提条件的优化工艺的研究4。再用硫酸蒽酮法测得它的多糖含量（因为糖类在比较高的温度下能被浓硫酸作用而脱水为糖醛，糖醛然后与蒽酮脱水缩合生成的这种物质是呈蓝绿色的糖醛衍生物，且在625NM处有最大吸收，可溶性糖溶液与它颜色深浅成正比）5。使用同一种方法对其他干货多糖进行了提取及含量测定。再从中选取三种干货多糖在不同的抗氧化性体系中进行研究，以维生素C为参照，比较他们的抗氧化能力。此次实验中选取的七种干货木耳，真菌类的一种。种子实体杯状、耳朵状、叶状，边缘似波浪形，较薄，色泽黑，可以用于防治缺铁性贫血、延缓衰老。枸杞，味道有点甜，可以明亮眼睛，滋养肝和肾。百合，属于多年生草本球根植物，基部稍宽，顶部尖，略向内弯，无嗅味苦。可以用来降火、润肺、安神等。海带，一种大型海藻类的植物之一。晒干后为黑色，含有丰富的矿物质、中等的蛋白质和多糖。银耳，真菌界的银耳目银耳属，洁白半透明，晒干后质地硬。有补肾美容等作用。红枣，植物界枣属，含有丰富的维生素，味甘，有补血抗衰老等功效。茶树菇，是一种口感极好，富有很高营养价值的食用菌类。晒干后，颜色黄褐，有浅皱纹。选取的这七种干货，产量高，价格适中，取材方便，营养价值高，功效多，都有很好的开发前景。1材料与方法11实验材料与试剂木耳、枸杞、干海带、干百合、干银耳、干红枣、干茶树菇，均购买于黄山市大润发超市。取一定量的干货样品于真空烘箱中低温烘干，用粉碎机粉碎，用40目筛筛取，留着备用。无水乙醇，邻苯三酚，双氧水，邻菲罗啉，磷酸盐生理盐水缓冲溶液（用分析天平称79000G氯化钠，02000G氯化钾，02400G磷酸二氢钾和18000G磷酸氢二钾，溶于800ML蒸馏水中，用盐酸调节溶液PH为74，然后加蒸馏水定容到1L），硫酸亚铁，葡萄糖为国产分析纯，蒸馏水，维生素C溶液，蒽酮硫酸溶液（称量02G的蒽酮，加入100ML、质量分数98的浓硫酸溶液，摇匀，放在棕色试剂瓶中，低温保存），无水丙酮，TRISHCL（PH820，005MOL/L）缓冲溶液（称取25GTRIS试剂溶于蒸馏水中，加8ML浓盐酸溶液，然后定容至1L，高压、高温灭菌后室温下保存）。12实验器材RE52AA旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、AL104电子分析天平瑞士梅特勒托利多仪器有限公司）、UV1100紫外可见分光光度计（上海美普达仪器有限公司）、离心机、SHA水浴恒温振荡器（江苏省金坛市医疗器械有限公司）、PHS3C型PH计（上海天达仪器有限公司）、真空抽滤机、DF101干燥箱、锥形瓶、吸量管1ML、2ML、5ML）、洗耳球、比色管、容量瓶。13实验方法131粗多糖提取的方法多糖的提取一般有超微波辅助法、微波辅助法、酶法、热水浸提法。本文所用的是热水浸提法。它的原理是在热力作用下，细胞的质壁分离。水溶剂渗入到细胞质、细胞壁中，溶解了液泡里的物质，并且通过细胞壁扩散到外部。取一定量预处理过的样品，按110的料液比加入95（V/V）的乙醇，低温浸泡12H。过滤，滤渣按一定的料液比加入蒸馏水，热水浴中保温一定时间。减压抽滤得到滤液，滤渣二次浸提，合并滤液，用旋转蒸发仪浓缩至原来体积的1/4，加入3倍于浓缩液的95（V/V乙醇，3下放置过夜，密封好，当有粒状沉淀和絮状胶状物产生后，用离心机以30分钟、3000R/MIN去上清液，沉淀复溶再离心、抽滤后，用无水丙酮、乙醇多次洗涤，干燥得到样品的粗多糖提取物，备用。多糖提取率多糖质量/样品质量100132标准曲线的绘制6先打开紫外分光光度计进行预热。清洗七个比色管，干燥编号备用。然后用分析天平称取01020G分析纯葡萄糖，蒸馏水溶解后，完全转移到100ML容量瓶进行定容，得01020MG/ML的葡萄糖标准溶液。然后用1ML的吸量管分别移取010、020、040、060、080、100ML的葡萄糖标准溶液于干燥的比色管中，再用2ML的吸量管分别移取090、080、060、040、020、000ML的蒸馏水到比色管中，补至100ML。将七个比色管放在冰水浴中，用5ML的吸量管迅速移取400ML的蒽酮硫酸溶液分别加入比色管内，摇匀。然后将7个比色管放在沸水浴中加热10分钟后，取出来，放在盛有自来水的大烧杯中冷却至室温。用紫外分光光度计从低浓度到高浓度在625NM波长下，分别测定它们的吸光度。记下数据，以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度为横坐标，用EXCEL绘制葡萄糖溶液的标准曲线，得到相关系数和回归方程。133多糖含量的测定方法用电子天平称取样品粗多糖提取物01000G，三份，蒸馏水溶解后，完全转移到100ML容量瓶中并且摇匀定容。移取040ML的稀释液于25ML的比色管中，再移取060ML蒸馏水补齐到100ML,将比色管放入冰水浴中，迅速加400ML的蒽酮硫酸溶液，摇匀。然后放在沸水浴中加热10分钟，取出，放在乘有自来水的大烧杯中冷却至室温。以蒸馏水为参比，迅速用紫外分光光度计在625NM的波长下，测得它的吸光度，然后代入回归方程求出多糖的浓度，并且算出多糖在样品粗提取物中的含量。134多糖对羟基自由基OH）消除作用的测定方法7本文采用的是用FENTON法反应形成羟基自由基的体系。FE2与H2O2在FENTON反应中产生羟基自由基的方程式如下22FEOH3FEOH向该反应体系中加入邻菲罗啉，由于羟基自由基活性很高，能够很有效的被邻菲罗啉所结合，产生有色物质。有色物质在510NM处有最大吸收。当加入多糖溶液后，多糖溶液就会与羟基自由基结合，减少了邻菲罗啉与羟基自由基结合而生成的有色物质，减弱了在510NM处的吸光值。通过测定添加了多糖溶液的体系的吸光度来判断它的消除能力。方法如下首先用分析天平精确称量提取的样品粗多糖沉淀10000G，用蒸馏水溶解后，在100ML的容量瓶中定容，配成浓度为1000MG/ML的母液，取母液进行稀释至浓度为020、040、060、080、100MG/ML。配制维生素C溶液用同样的方法。取6支干燥且干净的比色管，依次编号、分别向里面加入15ML的邻菲罗啉溶液，磷酸盐生理盐水（PH74）缓冲溶液380ML，和000、020、040、060、080、100MG/ML的多糖溶液050ML混匀（注1号为空白对照，用蒸馏水代替多糖溶液）。再加075MMOL/ML硫酸亚铁溶液150ML，迅速摇匀，再加001的过氧化氢溶液100ML，将五支比色管放在38的热水浴中反应1小时，然后迅速测定各管在510NM下的吸光度。再将维生素C药片研磨，称取，配制同浓度的维生素C溶液作对比。清除率的计算OH清除率A0A样品/A0100135多糖对超氧自由基（O2）消除作用的测定方法8对超氧阴离子清除采用的是邻苯三酚自氧化法。邻苯三酚可以在碱性条件下发生自身氧化生成超氧自由基（O2）、以及红色中间物质。超氧自由基能够加速邻苯三酚的氧化速率，如果有清除剂的加入，会消除O2，减少了红色中间产物的积累，降低了在310NM处的吸光度。通过测定加入多糖溶液的体系的吸光度来判断它的消除能力。方法如下取6支干燥且干净的比色管，依次编号、分别向里面加入220ML蒸馏水、TRISHCL（PH820，005MOL/L）缓冲溶液600ML，放在25的热水浴中25分钟，然后向比色管中依次加入000、020、040、060、080、100MG/ML多糖溶液050ML（注1号管为空白对照，用蒸馏水代替多糖溶液）。迅速加入在25热水浴中预热20分钟的邻苯三酚（07MMOL/L由10MMOL/L盐酸配制）100ML，摇匀。放置在20水浴槽中反应5分钟，最后加入100ML的HCL（8ML/L）溶液结束反应。将各管在310NM处测定它的吸光度，再将维生素C药片研磨，称取，配制同浓度的维生素C溶液作对比。清除率计算O2清除率A0A样品/A01002结果与分析21干木耳粗多糖提取的条件优化及含量的测定多糖在热水提取的过程中，有许多因素会影响多糖提取率。本文针对浸提料液比、温度、时间这三个条件进行探究9。211浸提时间对多糖提取的影响固定温度为85、料液比130不变。时间为1、15、2、25、3、35、4、45H，根据131方法分别测定他们的提取率，结果如下表21浸提时间对多糖提取率的影响时间/H115225335445提取率/45264392110891236141513321196由结果得出，随着时间的增大，提取率先增大后减小。当浸提时间为35H，提取率最大，继续增加时间，提取率开始下降。212浸提温度对多糖提取的影响固定浸提时间为35H，料液比130不变。温度为50、60、70、75、80、85、90、95。根据131方法分别测定他们的提取率，结果如下表22浸提温度对多糖提取率的影响温度/5060707580859095提取率/35681291010351345149616511679由上表中数据表明，随着温度的升高，多糖的提取率也会随之增加。但是过高温度会分解多糖，多糖的活性受到影响，所以我们选择90作为我们的浸提温度。213浸提料液比对多糖提取率的影响由表21、表22可知，固定浸提时间为35H，浸提温度为90不变。料液比分别120、130、140、150、160、170。根据131方法分别测定他们的提取率，结果如下表23料液比对多糖提取率的影响料液比120130140150160170提取率/未完全浸没16531726160815941455由表三中的数据可看出，随料液比的增加，多糖的提取率先增加后减小，当料液比为140时，提取率最大。214提取工艺的优化根据单因素实验我们分别得出了最佳浸提时间、温度和料液比。数据显示也看出了这三个因素对提取率的影响很大。为了进一步优化木耳多糖提取工艺，我们采用了L9（33）正交实验法10。表24因素水平水平A时间/HB料液比C温度33070354080123307090表25正交实验结果试验号列号ABC木耳多糖提取率/111184621221265313314804212134252231726623190173131575832198293321204K111970125439097K2132301324312730K3125371195015973极差126012936840从以上的正交实验、极差分析结果显示影响木耳多糖提取率的三个因素的大小排序是浸提温度料液比浸提时间。最佳的提取工艺条件是浸提温度90，浸提时间35H，料液比140。215标准曲线的测定和回归方程的建立根据312的方法测定出的吸光值拟合的葡萄糖标准曲线如下0240681204608102葡萄糖溶液浓度MG/L吸光度A图1由图1可知，葡萄糖溶液的标准曲线的方程是Y99712X00090，相关系数是09880。216干木耳多糖含量的测定根据133方法测定木耳多糖含量，最佳的提取条件是浸提温度90，浸提时间35H，料液比140。表26测得干木耳的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/011355043010985065011114989503207622干枸杞的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比130，温度90，浸提时间2H11表27测得干枸杞的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010321577010151586010211582158200923干海带的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比125，温度90，浸提时间5H12表28测得干海带的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010194362010224314010244387435407324干百合的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比130，温度80，浸提时间2H13表29测得干百合的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010235237010285311010175332529309525干银耳的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比120，温度80，浸提时间6H14表210测得干银耳的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010055003499501801014499701021498526干红枣的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比140，温度100，浸提时间1H15表211测得干红枣的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010337998010258086010348005803008827干茶树菇的粗多糖的含量测定参考文献得最佳提取条件料液比120，温度90，浸提时间4H16表212测得干茶树菇的粗多糖的含量多糖粗提取物质量/G多糖含量/平均值/RSD值/010074078010094052010024146408909428多糖对羟基自由基OH）消除作用羟基自由基由于具有很高的氧化电位（280V），所以氧化能力很强，对生物体的组织有很强的危害。它可以降解DNA，而且膜系统也会被诱导产生损伤，造成膜通透性增加，从而引起膜内外物质的内流、泄漏，出现线粒体膨胀和红细胞溶血等现象。也会使蛋白质、氨基酸、核酸、脂类和糖类发生氧化，造成破坏损伤。经研究发现，如果加羟基自由基的消除剂后，影响会明显减小。281茶树菇多糖根据134方法，不同浓度的茶树菇多糖，对照维生素C对羟基自由基的作用，结果如图表201230456078902046081试液浓度/MGL清除率/茶树菇多糖维生素C图2维生素C和茶树菇多糖对OH的清除作用图2显示，茶树菇多糖对羟基自由基具有清除能力，且和维生素C一样随着浓度增加清除作用增强。当茶树菇多糖溶液浓度为10MG/ML时，它的清除率将近90。并且可以看出在试液浓度相同的情况下，茶树菇多糖对羟基自由基的清除能力比维生素C的强。282干百合多糖根据134方法，不同浓度的百合多糖，对照维生素C对羟基自由基的作用，结果如图301230456078046081试液浓度/MGL清除率/百合多糖维生素C图3维生素C和百合多糖对OH的清除率图3显示，百合多糖具有清除羟基自由基的能力，并且和维生素C一样，随着浓度的增加，清除能力也相应增大。在04MG/ML以下时，它的清除作用比维生素C低，但是在0610MG/ML时，百合多糖的清除作用略大于维生素C，并且在10MG/ML的清除率是648，具有比较强的清除作用。维生素C的清除率是723。总体来说，两者的清除作用相差不大。283枸杞多糖根据134方法，不同浓度的枸杞多糖，对照维生素C对羟基自由基的清除作用，结果如图401230456078046081试液浓度/MGL清除率/枸杞多糖维生素C图4维生素C和枸杞多糖对OH的清除率由图表显示，枸杞多糖对羟基自由基具有清除作用，并且随浓度的增加，清除作用也相应增加。并且当枸杞多糖浓度为10MG/ML时，它的清除率有767。说明枸杞多糖对羟基自由基的清除作用比维生素C稍高。29多糖对超氧自由基（O2）消除作用291茶树菇多糖根据135的方法，不同浓度茶树菇多糖，对照维生素C溶液对超氧阴离子的清除作用，如图表0123405678091046081试液浓度/MGL清除率/茶树菇多糖维生素C图5维生素C茶树菇多糖对O2的清除率由图5显示，茶树菇多糖对超氧阴离子具有清除作用，且随着浓度的增加清除能力增加。当茶树菇多糖浓度为02MG/ML时，它的清除率就达到了496。与同浓度的维生素C浓度比强很多。292干百合多糖根据135的方法，不同浓度干百合多糖，对照维生素C溶液对超氧阴离子的清除作用，如图表012304560782046081试液浓度/MGL清除率/百合多糖维生素C图6维生素C和百合多糖对O2的清除率由图6显示，百合多糖对超氧阴离子具有清除作用，并且随着浓度的增加，清除作用也逐渐增大。但是在04MG/ML浓度下，百合多糖的清除率大于维生素C溶液，但大于04MG/ML时，百合多糖的清除作用略低于维生素C。当达到10MG/ML时，它对超氧阴离子的清除率为452，维生素C的清除率为649。总体说明，百合多糖对O2具有一定的清除能力，且稍低于维生素C溶液。293枸杞多糖根据135的方法，不同浓度枸杞多糖，对照维生素C溶液对超氧阴离子的清除作用，如图表01230456072046081试液浓度/MGL清除率/枸杞多糖维生素C图7维生素C和枸杞多糖对O2的清除率由图7显示，枸杞多糖对超氧阴离子具有清除作用，并且随着浓度的增加，清除作用也逐渐增大。但是在试液浓度为10MG/ML时，枸杞多糖的清除率最高才达到289。明显要比维生素C的清除能力低很多。3结论31干木耳多糖提取的优化用热水浸提法进行多糖的提取，预先用95乙醇浸泡，是为了除去样品中的低聚糖、单糖等一些干扰成分。选取干木耳，采用单因素实验和正交实验对影响多糖提取率的浸提时间、温度、料液比进行探究。确定了干木耳多糖提取的最佳条件是浸提温度90，浸提时间35H，料液比140。提取率1726。32多糖的含量采用蒽酮硫酸法测出01000G粗多糖产品中，木耳多糖含量是5032，是枸杞多糖含量是1582，海带多糖含量4354，干百合多糖含量是5293，银耳多糖含量4995，红枣多糖含量8030，茶树菇多糖含量4089。33抗氧化活性选取了茶树菇多糖、百合多糖、枸杞多糖在超氧阴离子和羟基自由基两个不同的氧化体系中，以维生素C作参照，研究了这三种干货多糖的抗氧化抗氧化活性。根据抗氧化活性的试验结果显示，这三种干货多糖在不同的氧化体系中的抗氧化活性都是随着浓度的增加而增大的。在试验浓度的范围中，和同浓度的维生素C比较，茶树菇对羟基自由基和超氧阴离子的清除作用都很强，并且均大于维生素C的抗氧化活性，百合多糖对羟基自由基的清除作用和维生素C差不多，但是对超氧阴离子的清除作用稍低于维生素C。枸杞多糖对羟基自由基的清除效果大于维生素C，但是对超氧阴离子的清除作用低于维生素C。4未来展望近年来，有关多糖的研究国内外都有许多，但是关于多糖的抗氧化活性的应用还只是处于初级阶段。抗氧化活性在人类保健、美容、医学治疗上仍然有很大的潜在价值。关于这方面研究也已经得到了越来越多人的重视和参与。本文并没有对多糖的分子结构和生物活性的结构效应关系进行分析探究，对于多糖抗氧化性的研究结果也并不能代表药物在身体内的清除效果，但对于大面积离体的药物抗氧化活性的选择还是有一定作用和价值，同时也会为进一步研究提供有效依据。抗氧化活性的研究在未来一定会出现新的突破。新颖的设计思路在当今社会层出不穷，创新的设计带来的必定又是另一番全新的景象，伴随着这样的进展，以多糖抗氧化活性为中心的衍射分支必然也会推动主体的发展，必将在未来社会的各个领域取得巨大的进展。参考文献1胡敏敏,蔡宝昌,张志杰等百合多糖的药学研究J中药新药与临床药理,2007,18（2）1011022SEONJOOYOON,MYEONGAEYUTHENONTOXICMUSHROOMAURICULARIAAURICULACONTAINSAPLOYSACCHARIDEWITHANTICOAGULANTACTIVITYMEDIATEDBYANTITHROMBINJTHROMBOSISRESEARCH,2003,1121511583LIUF,FUNGMC,OOIVEC,ETALINDUCTIONINTHEMOUSEOFGENEEXPRESSIONYTOKINEIMMUNOMDULATINGCYTOLINEBYMUSHROOMPOPLYSACCHARIDEPROTEINCOMPLEXESJLIFESCIENCE,1996,5821179518034张惟杰复合多糖生化研究技术M上海上海科技出版社,1987,67,1105梁丽君,曾哲灵,熊淘蒽酮硫酸法测定大蒜多糖的含量J食品科学,2008,29（9）4995026王东,林力,袁昌鲁等车前子多糖含量的分析J中草药,2002,108968977齐亚娥,吴冬青,安红纲等玫瑰花蕾黄铜类化合物提取及清除羟基自由基能力J食品科技,2007,32482858张晓强,浦跃朴,尹立红等冬虫夏草及人工虫草菌丝对超氧阴离子自由基和请即自由基清除作用的实验研究J中国老年学杂志,2003,23117737759贾建会等深层发酵羊肚菌多糖的提取、分离及纯化研究J2002,234596210吴有炜,试验设计与数据处理（第一版）M苏州苏州大学出版社,2002,8510511高洪霞,刘军海等枸杞多糖提取工艺的研究J食品与机械,2008,245606212李利华百合多糖的含量测定及其抗氧化活性研究J湖北农业科学,2011,501477377513余华,海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究J中国食品添加剂,2006,272394114何伟珍,吴丽仙银耳多糖的提取分离与纯化J海峡药学,2008,207333415罗凯,胡廷章等红枣中多糖提取及纯化工艺的研究J安徽农业科学,2006,34225962596316王宗君,廖丹葵,张良军茶树菇多糖提取工艺研究J广州化工,2009,3779293致谢经过长时间的努力，毕业论文终于完成了，在这里对所有老师，同学及帮助过我的人说一声谢谢。本论文是在老师的指导下完成的。不论是论文课题的选择还是在写作当中遇到的困难，张老师都给予了大力的支持，细致耐心的指导论文的进行，不厌其烦的对我的毕业论文进行修改，并提出了很多建议。在开始的书写当中，遇到困难，张老师首先不是告诉我解决问题的具体方法和答案，而是循序渐进的引导，先让我寻找解决问题的方法，待自己有了想法后，对其进行验证，最后张老师对其进行补充说明。在整个论文的写作过程中，并不是我一个人跟着张老师学习，但对于每一个同学，都感受到了张老师的亲切关怀，认真负责。在这个过程中，完成论文尽管很重要，但更重要的是在张老师的教导下，锻炼了我独立完成论文的能力，培养了我看待事情的方式，授人以鱼不如授人以渔。再次感谢张老师，让我感受到了化学的乐趣，拓展了我的化学视野。感谢黄山学院给了我这样一个条件，使我在成才的道路上迈进了一大步。您好，为你提供优秀的毕业论文参考资料，请您删除以下内容，O_O谢谢ALARGEGROUPOFTEAMERCHANTSONCAMELSANDHORSESFROMNORTHWESTCHINASSHAANXIPROVINCEPASSTHROUGHASTOPONTHEANCIENTSILKROAD,GANSUSZHANGYECITYDURINGTHEIRJOURNEYTOKAZAKHSTAN,MAY5,2015THECARAVAN,CONSISTINGOFMORETHAN100CAMELS,THREEHORSEDRAWNCARRIAGESANDFOURSUPPORTVEHICLES,STARTEDTHETRIPFROMJINGYANGCOUNTYINSHAANXIONSEPT19,2014ITWILLPASSTHROUGHGANSUPROVINCEANDXINJIANGUYGURAUTONOMOUSREGION,ANDFINALLYARRIVEINALMATY,FORMERLYKNOWNASALMAATA,THELARGESTCITYINKAZAKHSTAN,ANDDUNGANINZHAMBYLPROVINCETHETRIPWILLCOVERABOUT15,000KILOMETERSANDTAKETHECARAVANMORETHANONEYEARTOCOMPLETETHECARAVANISEXPECTEDTORETURNTOJINGYANGINMARCH2016THENTHEYWILLCOMEBACK,CARRYINGSPECIALTYPRODUCTSFROMKAZAKHSTANASMALLARTTROUPEFOUNDEDSIXDECADESAGOHASGROWNINTOAHOUSEHOLDNAMEINTHEINNERMONGOLIAAUTONOMOUSREGIONINTHE1950S,ULANMUQIRARTTROUPEWASCREATEDBYNINEYOUNGMUSICIANS,WHOTOUREDREMOTEVILLAGESONHORSESANDPERFORMEDTRADITIONALMONGOLIANMUSICANDDANCESFORNOMADICFAMILIESTHE54YEAROLDWASBORNINTONGLIAO,INEASTERNINNERMONGOLIAANDJOINEDTHETROUPEIN1975HESAYSTHEREARE74BRANCHTROUPESACROSSINNERMONGOLIAANDACTORSGIVEAROUND100SHOWSEVERYYEARTOLOCALNOMADICPEOPLE“ICANSTILLRECALLTHEDAYSWHENITOUREDWITHTHETROUPEINTHEEARLY80SWESATONTHEBACKOFPICKUPTRUCKSFORHOURSTHESKYWASBLUE,ANDWECOULDNTHELPBUTSINGTHEFOLKSONGS,“NASUNSAYSTHEVASTNESSOFINNERMONGOLIAANDTHELACKOFENTERTAINMENTOPTIONSFORPEOPLELIVINGTHERE,MADETHEIRLIVESLONELY“THENOMADICPEOPLEWEREVERYEXCITEDABOUTOURVISITS,“NASUNRECALLS“WEDIDNTHAVEAFORMALSTAGETHEAUDIENCEJUSTSATONTHEGRASSUSUALLY,THEPERFORMANCESBECAMEABIGPARTYWITHLOCALPEOPLEJOININGIN“FORHIM,THEREWARDINGPARTABOUTTOURINGISNTJUSTABOUTSHARINGARTWITHNOMADICFAMILIESBUTALSOABOUTGAININGINSPIRATIONFORTHEMUSICANDDANCEULANMUQIRLITERALLYTRANSLATESAS“REDBURGEON“,ANDTODAYSPERFORMERSOFTHETROUPESTILLTOURTHEREGIONSVILLAGESANDENTERTAINNOMADICFAMILIES,BUTTHEIRFAMEHASSPREADAROUNDTHEWORLDONMAY16AND17,NEARLY100SINGERSANDDANCERSFROMTHETROUPEPERFORMEDATBEIJINGSPOLYTHEATERTHEIRSHOW,TITLEDULANMUQIRONTHEGRASSLAND,DEPICTEDTHEHISTORYANDDEVELOPMENTOFTHEARTTROUPE“BEINGFROMTHEREGIONALLOWEDMETOEMBRACETHECULTUREOFINNERMONGOLIAANDBEINGAMEMBEROFTHETROUPESHOWEDMEWHEREIBELONGED,“NASUN,THEARTTROUPESPRESIDENT,WHOISALSOARENOWNEDTENOR,TELLSCHINADAILYDURINGATOURIN1985,HEWENTTOAVILLAGEANDMETANELDERLYLOCALMAN,WHOTOLDHIMASTORYABOUTHISFRIENDSHIPWITHASOLIDERFROMSHENYANG,CAPITALOFNORTHEASTCHINASLIAONINGPROVINCE,DECADESAGOTHESOLIDERGAVETHEOLDMANAHANDMADESADDLEWHENTHEYBIDFAREWELLTHESTORYINSPIREDNASUNTOWRITECARVEDSADDLE,ASONGTHATLATERBECAMEONEOFHISMOSTPOPULARNUMBERSNOW,EVERYYEAR,NASUNRECRUITSYOUNGSINGERSANDDANCERSFORTHETROUPETHETROUPEHASALSODESIGNEDANEWREPERTOIRE,WHICHISMOSTLYBASEDONTHEDAILYLIVESOFMONGOLIANPEOPLE,ESPECIALLYTHELIVESOFNOMADICFAMILIES,ANDHASCOMBINEDCONTEMPORARYMUSICALELEMENTSWITHFOLKSONGSOFTHEREGIONHAIMU,A25YEAROLDKHOOMEIALOCALVARIANTOFOVERTONESINGINGSINGER,JOINEDTHETROUPETHREEYEARSAGOALONGWITHASIXMEMBERBAND,HEPERFORMSFASTSONGSANDSOFTONESTHATHEWRITESALLWHILEPLAYINGTHEHORSEHEADFIDDLE“ALTHOUGHILEARNEDTHEPIANOSINCECHILDHOODANDGREWUPLISTENINGTOVARIOUSKINDSOFMUSIC,TOME,THEFOLKMUSICOFINNERMONGOLIAISTHEROOT,“HESAYS“PERFORMINGINREMOTEVILLAGESISPLEASANTIFEELATHOMEONTHEBOUNDLESSGRASSLANDS,ANDTHEWARMPEOPLETHEREMAKEMEFEELFULFILLED“THEFIRSTROUNDOFSPRINGAUCTIONSEASONINBEIJINGENDEDLASTWEEK,BUTITFAILEDTOCREATEMUCHSPRINGINTHEARTMARKETALTHOUGHTWOPIECESOFCHINESEPAINTINGFETCHEDMORETHAN100MILLIONYUAN,THEDECLINEINTRADINGVOLUMEANDSALERATESHOWEDADOWNTURNTHISYEARINTHE“GRANDVIEWCHINESEPAINTINGHIGHLIGHT”SESSIONATCHINAGUARDIAN2015SPRINGAUCTIONS,PANTIANSHOUSREPRESENTATIVEWORKEAGLE,ROCKANDFLORAHITARECORDAUCTIONPRICEOF279MILLIONYUAN,WHILELIKERANSMASTERWORKJINGGANGMOUNTAINFETCHED1265MILLIONYUAN,ANUNEXPECTEDHIGHINRECENTYEARSHOWEVER,THETRADINGVOLUMEFELLSTO187BILLIONYUANFROM222BILLIONYUANINTHESAMEPERIODTHEYEARBEFORETHEHUANGCHEN2015SPRINGAUCTIONS,WHICHRECORDED425MILLIONYUANINTOTALSALES,EXPERIENCEDTHESAMETHESECTIONNUMBERWENTDOWNTO5FROM12COMPAREDTOLASTYEARACCORDINGTOEXPERTSHAOJIANWU,THEARTMARKETDIDNOTATTRACTMUCHEXCITEMENTTHISYEARDUETOTHEBOOMINGSTOCKMARKETANDTHEPERSISTENTPROBLEMSOFFORGERYANDFAKEDEALSTHETWOPIECESOFCHINESEPAINTINGNOTCHEDUPHIGHPRICETHISSPRINGDUETOTHEIROWNVALUENOTDUETOAREVIVALINTHEMARKET“THESUCCESSFULTRANSACTIONOFTWOWORKSWITHAHAMMERPRICEOFMORETHAN100MILLIONYUANONCEAGAINCONFIRMSTHATVALUABLEANDRAREWORKSOFHIGHQUALITYALWAYSEARNTHELONGLASTINGHIGHPRICECHINESEPAINTINGANDCALLIGRAPHYISSTILLTHEPILLAROFTHEMARKETHOWEVER,THEOVERALLSALESRATEHASDROPPEDSLIGHTLY,WHICHREFLECTSTHEDEMANDFORTHEORDINARYAUCTIONGOODSHASWEAKENED,”SAIDTHEPRESIDENTOFCHINAGUARDIANSHUYANYAN“BESIDES,THEENTRYOFNEWBUYERSALSOMAKESCERTAINCHANGESTOTHEDIRECTIONOFPURCHASINGINAWORD,THEOVERALLMARKETTRENDISVERYUNPREDICTABLEALTHOUGHCHINAGUARDIAN2015SPRINGAUCTIONSHASACHIEVEDREMARKABLERESULTS,ITDOESNOTMEANTHATTHEMARKETHASWALKEDOUTOFTHEPREDICAMENTWESTILLHAVETOWAITFORTHEBIGECONOMICBOOMTOINVIGORATETHEARTMARKET”EVENSO,THEHOTPURSUITOFSOMESPECIALITEMSAPPEAREDTHISSPRINGASPECIALSESSIONOFCHINAGUARDIANSPRINGAUCTIONSTITLED“FINEGILTBRONZEBUDDHISTIMAGES”ACHIEVEDAGREATDEALWITHTOTALSALESVOLUMEOF4189MILLIONYUANAND92PERCENTSALERATETHE5THSHAMARRINPOCHESTATUEFROM1617THCENTURYOFTIBETWASSOLDFOR506MILLIONYUANTHEBEIJINGCHENGXUANAUCTIONSFEATUREDALMOST2,800ITEMSOFCOINSANDSTAMPSINTHREESESSIONSWITHGOODSALERATETHEHUACHENAUCTIONSALSOSETASPECIALSESSIONOFPHOTOGRAPHSUNDERTHECONDITIONOFLARGESCALEDECLINEOFAUCTIONSESSIONSTHEREWASAPALPABLEDULLTHUDOFDISAPPOINTMENTTHATACCOMPANIEDTHERETURNOFTHEIMPERIALENTOURAGEOFZHENHUANTOHERHOMELANDITFOLLOWEDACOUPLEYEARSOFHUSHEDEXCITEMENTASCHINESEFANSWEREFEDTIDBITSABOUTTHEIRPROUDCONCUBINEWHOWASSUPPOSEDTOCONQUERTHEHIGHGROUNDOFTHENORTHAMERICANMARKETZHENHUANIS,OFCOURSE,THETITLECHARACTEROFTHELEGENDOFZHENHUAN,A2011TELEVISIONSERIESTHATSWEPTCHINAOFFITSFEETANDLATERTOOKOTHERASIANCOUNTRIESBYSTORMTWOYEARSAGO,ITWASREPORTEDTHATHBO,APREMIUMCABLESERVICEHEADQUARTEREDINTHEUNITEDSTATES,WASGOINGTOAIRITINNORTHAMERICAAFTERSOMEMODIFICATIONNOW,ACONDENSEDVERSIONTHATPROVIDESENGLISHSUBTITLESBUTNODUBBINGHASFINALLYBEENMADEAVAILABLEONNETFLIXFORONLINESTREAMINGTHISVERSION,HIGHLYANTICIPATEDASAMILESTONEINCHINASCULTURALFORAYOVERSEAS,HASBEENWIDELYPANNEDBYITSHOMEAUDIENCERETITLEDEMPRESSESINTHEPALACE,THEAMERICANVERSIONHASBEENSHORTENEDFROMITSORIGINAL76EPISODESAT45MINUTESEACH,TOSIX90MINUTEEPISODESTHEQUICKPACINGTHREWOFFMANYNATIVEVIEWERS,WHOAREACCUSTOMEDTOAMORELEISURELYDAYTIMESOAPSTYLENARRATIVERHYTHMCHINESETVSTATIONSWOULDRUNTWOORTHREEEPISODESEVERYDAYIDIDNOTFI