毕业论文 芦荟通畅胶囊遗传毒性研究

目录摘要III1前言12材料与仪器221样品222主要仪器与试剂223实验动物23方法331样品制备332剂量选择与受试物给予方式333小鼠淋巴瘤TK基因突变实验（MLA试验）434鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验（AMES试验）635骨髓微核试验74结果841MLA实验结果842AMES实验结果943骨髓微核试验结果105讨论11参考文献13综述14致谢19芦荟通畅胶囊的遗传毒性研究摘要目的评价芦荟通畅胶囊的遗传毒性；方法采取小鼠淋巴瘤TK基因突变试验（MOUSELYMPHOMAASSAYTKGENEMUTATIONTEST）、鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验SALMONELLATYPHIMURIUN/REVERSEMUTATIONASSAY，AMESASSAY以及骨髓细胞微核试验评价芦荟通畅胶囊的遗传毒性。设芦荟通畅胶囊提取液剂量组20、10、5、25、125MG/皿，在添加S9和不添加S9条件下，通过AMES试验和TK试验对其进行体外遗传毒性评价；设芦荟通畅胶囊混悬液剂量组025、0125、00625G/ML，通过骨髓细胞微核试验对其进行遗传毒性评价。AMES试验中，设置计数TA97A、TA98、TA100、TA102四个标准测试。菌株在四个浓度下，于37、48H培养后回复突变菌落数；MLA试验中，计算大小集落的孔数、平板效率PE、基因突变频率MF和小集落百分率SC；骨髓细胞微核试验中，每只动物计数1000个嗜多染红细胞，其微核发生率以含微核的PCE千分率计。结果芦荟通畅胶囊提取物AMES试验受试物各剂量组回变菌落数均未超过溶剂对照回变菌落数2倍，未出现剂量反应关系；MLA试验中，芦荟通畅胶囊提取物各剂量组MF值与溶剂对照组相比均无显著性差异，未出现剂量反应关系；骨髓细胞微核试验中受试物各剂量组的微核发生率差异无显著性（P005），而雌雄小鼠阳性对照组均明显高于阴性对照组P005,THEMALEANDFEMALEMICEPOSITIVECONTROLGROUPWERESIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHENEGATIVECONTROLGROUPP005），而雌雄小鼠阳性对照组均明显高于阴性对照组P005），而雌雄小鼠阳性对照组均明显高于阴性对照组P001。说明该受试物对小鼠骨髓细胞染色体无致突变作用。本次试验只对芦荟通畅胶囊只进行了遗传毒性的研究。没有进行体外细胞毒性以及体内急性毒性进行全面的评价，如有机会，应该对芦荟通畅胶囊的胶囊壳以及内容物进行全面的生物学评价，以保证其安全性全面评价。参考文献1车玉梅,马超英,徐洁,等国内抗肿瘤中药毒理研究进展J时珍国医国药,2012,336150515062盐晓莺,董菊,王明艳遗传毒理学检测方法在中医药研究中的应用J湖北中医药大学学报,2011,13262654GB/T1519342003,鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物为微粒体酶试验S北京中国标准出版社20035帅培强TK基因突变试验三种人类淋巴母细胞的比较及两类突变集落形成的机理研究D四川四川大学,20056张天宝新药遗传毒性评价方法的研究现状和发展趋势J2002年10月,第14卷第4期，2432467中华人民共和国卫生部保健食品检验与评价技术规范2003版S20030302,1701868GIOVANNIBRAMBILLA,FRANCESCAMATTIOLI,LUIGIROBBIANO,ETALGENOTOCITYANDCARCINOGENICITYSTUDIESOFANTIHISTANMINESARCHTOXICOL,2011,85117311789SHDOAK,BMANSHIAN,GJSJENKINS,ETALINVITROGENOTOXICITYTESTINGSTRATEGYFORNANOMATERIALSANDTHEADAPTATIONOFCURRENTOECDGUIDELINESJMUTATIONRESEACH,2012,74510411110胡燕平,马锐,宋捷蔡司多功能护理液的遗传毒性研究J癌变畸变突变,2012,24537938211刘蓓,吴素蕊,罗晓莉,等某保健食品遗传毒性试验研究J中国预防医学杂志,2009，109808811综述芦荟通畅胶囊各成分作用研究芦荟（学名ALOEVERA）芦荟属，为百合科多年生常绿草本植物。芦荟是集食用、药用、美容、观赏于一身植物新星。芦荟具有预防和治疗各种疾病的功效。如芦荟素具有高效的健胃整肠的功效,并能提高新陈代谢的速度,使人的皮肤变得美丽。芦荟肉质部分含有芦荟熊果甙，芦荟熊果甙除了可以预防继父老化外,对胃及十二指肠等溃疡、粘膜溃烂也有明显的治疗成效。芦荟熊果甙可防止肌肉组织的瘢痕化,使皮肤组织迅速恢复原状。芦荟中的芦荟酊是抗菌性很强的物质,具有直接杀菌作用。芦荟中的芦荟咪酊具有抗癌症的作用,能破坏癌变细胞。芦荟中的芦荟乌鲁辛对溃疡有很好的疗效,能治疗胃及十二指肠溃疡病。而芦荟通畅胶囊既是采用了芦荟的此种保健功能。本综述就芦荟通畅胶囊其主要成分的通便作用进行概述。1主要成分芦荟通畅胶囊主要成分有芦荟、大豆膳食纤维、西洋参、荷叶等成分。芦荟是排毒通便、清热降火产品最常用之原料。其富含芦荟甙、多糖、有机酸、微量元素等多种有效成分，可对抗体内“火毒”自由基，促进肠壁释放水分，润滑肠道，改善便秘上火症状。芦荟还有抗菌解毒、消炎止痛、保肝健胃的作用，可帮助改善胃肠功能。此外，芦荟还经常被用于护肤养颜、保湿防晒，帮助修复毒素对肌肤造成的各种伤害。西洋参中医认为西洋参“清热生津、补气养阴”，常用于虚热烦倦、口燥咽干等症。现代医学研究证明，西洋参含十余种人参皂甙、少量挥发油、糖类、氨基酸和无机元素等，对增强免疫、抗氧化、抗疲劳、调节血糖、保护心血管和神经系统机能均有帮助。西洋参与芦荟并用，即可清热生津、滑肠通便，又补气养身，做到畅而不虚。膳食纤维有很强的吸附和膨胀性，可吸附肠内毒素、促进肠蠕动、消滞排毒；对于改善肥胖、便秘、痔疮、三高等症非常有益，是排毒、瘦身、降脂产品常用之原料。荷叶含莲碱、荷叶碱等多种生物碱、黄酮类及维生素C等。荷叶清热解毒、凉血止血、利湿解暑，中医常用于暑热烦渴、脾虚泄泻、痔疮便血等，另在减肥、调节血脂血压、保护心肌、抗病毒等方面均有帮助作用。其所含黄酮类物质还对平滑肌有解痉作用，可避免迅速通便时产生痉挛、疼痛和腹泻，做到畅而不泄、不腹痛。12芦荟芦荟素能让肠内细菌活化并分解，促进肠蠕动和肠内肌肉收缩，有通便利尿的作用，能明显的治疗便秘。芦荟所含氨基酸测定的结果表明，芦荟叶中含有谷氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、组氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、精氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、丝氨酸等19种氨基酸3，其中精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸含量丰富，所含的精氨酸、亮氨酸、苏氨酸、赖氨酸等8种氨基酸为必需氨基酸。芦荟中含有的天冬氨酸、丝氨酸等，是有利于皮肤代谢的氨基酸，可阻止阳光中长波紫外线对表皮的伤害与氧化，保护表皮细胞的还原，从而提高其抗辐射能力。3膳食纤维水溶性膳食纤维在肠道内呈溶液状态，有较好的持水力，且易被肠道细菌酵解，产生丁酸、丙酸、乙酸等短链脂肪酸（SCFA），这些短链脂肪酸能降低肠道内环境的PH值，刺激肠粘膜；水溶性膳食纤维被肠道菌群发酵后产生的终产物二氧化碳、氢气、甲烷等气体，亦能刺激肠粘膜，促进肠蠕动，从而加快粪便的排出速度。2水不溶性膳食纤维具有较强的溶胀性和吸水力，不容易被消化道的酶消化或肠道内微生物酵解，会形成较多的固体食物残渣，增加粪便的重量和体积，使粪便柔软，易于排出。粪便重量和体积的增大能机械性地刺激肠壁引起便意，使肠道蠕动加快，从而缩短食物残渣在肠内的通过时间，防止便秘的发生。该产品所含的不溶性膳食纤维，主要来自大豆纤维。有关大豆纤维促进排便的作用早有研究。4西洋参中医认为西洋参“清热生津、补气养阴”，常用于虚热烦倦、口燥咽干等症。现代医学研究证明，西洋参含十余种人参皂甙、少量挥发油、糖类、氨基酸和无机元素等，对增强免疫、抗氧化、抗疲劳、调节血糖、保护心血管和神经系统机能均有帮助。西洋参与芦荟并用，即可清热生津、滑肠通便，又补气养身，做到畅而不虚。5荷叶荷叶为睡莲科植物莲的叶，苦、平，归肝、脾、胃经，功能清热解暑、升发清阳、凉血止血，临床用于暑热烦渴、暑湿泄泻、血热吐衄、便血崩漏，主要含有生物碱、黄酮、精油、维生素、有机酸等成分，具有抑菌、调脂、抗氧化、止血等药理作用。6结语便秘是一种常见的消化系疾病，随着人们生活节奏的变化，饮食结构的改变，便秘患者有增多的趋势，其中功能性便秘与饮食结构有着密切的关系，现代人饮食过于精细，高脂肪、高蛋白摄入过多，膳食纤维摄入过少，长期久坐、生活作息没有规律，常常是引起便秘的主要原因。防治便秘除注重饮食调配、药物治疗外，服用润肠通便类保健食品是更好的选择。芦荟通畅胶囊具有润肠通便作用，且含有多种有益作用，低毒副作用，是一种十分好用的产品。综上所述,芦荟通畅胶囊中的各成分都具有通畅大便、医治便秘作用。其中芦荟起到了关键性作用。芦荟（ALOE），系百合科芦荟属多年生常绿肉质草本植物，又名龙角、油葱，原产非洲，广泛分布于热带、亚热带地区，是集药用、食用、美容和观赏于一体的重要经济植物。芦荟药用已有悠久的历史，最早可追溯到4000年前古埃及金字塔中发现的“纸革”耶比鲁斯巴比路斯一书中，当时芦荟主要作为泻剂、安眠剂及苦味剂。芦荟含有70多种对人体有益的生物活性物质，具有促进伤口愈合、抗菌、治疗肠胃道溃疡、通便、降血糖、调节免疫、抗癌和抗病毒等效用。芦荟的化学成分非常复杂，已知的有160多种，具有药理活性和生物活性的成分也不下100种。目前已确定芦荟中含有丰富的蒽醌类化合物、多糖、氨基酸、有机酸、酶类、植物固醇、皂苷、多种微量元素等有效化学成分。其功效主要包括两类一类是存在于芦荟叶片底部及其表皮附近的黄色汁液，主要含有蒽醌及其苷、萘酮类、树脂、有机酸；另一类是汁液渗完后留下的凝胶，含有99995的PH为45的极性水，固体成分主要有糖类、氨基酸、纤维素等。蒽醌类化合物是芦荟叶片渗出液的主要成分，也是芦荟活性成份中最主要的部分，种类很多，多呈酸性，溶于水，水溶液呈淡黄色、黄色，有荧光，当调节溶液偏碱性时呈黄色，在空气中长时间放置后逐渐氧化颜色加深，包括芦荟苷（BARBALOIN）、芦荟大黄素（ALOEEMODIN）、芦荟大黄酚（CHNYSOPHANAL）、异芦荟大黄素苷（ISOBARBALOIN）、蒽酚（ANTHRANOL）等20余种成分，还有以二聚体形式存在。芦荟含蒽醌类化合物的种类和数量，因品种、栽培条件、收获时期不同有较大的变动，特别在不同的品种之间存在较大的差异，其中主要的活性成分是羟基蒽醌类衍生物。而膳食纤维也有一定的作用。自从70年代BURKITT首次提出膳食纤维摄入量减少与冠心病、肥胖、便秘、大肠癌等西方现代“文明病”的发生有一定联系后4,膳食纤维具有许重要生理功能，如通便、调节肠道菌群、降低血脂、控制血糖、减肥、预防癌症等，其中膳食纤维有降低肠癌发生的风险性这一结论已被世界卫生组织、世界粮农组织等国际专业机构认可。参考文献1戴必胜,熊凤琴芦荟保健品研制与妙用J北方园艺,2001427282蔡健芦荟的保健功能成分与保健功效J食品与药品,2006,80827303姚立华,何国庆，陈启和芦荟活性成分的生物学作用研究进展J科技通报,2007，23（06）8128154张春玲，赵秀兰，厉保秋芦荟通便作用的研究进展J食品与药品,2007,90359625王蕾，王英平，许世，等西洋参化学成分及药理活性研究进展J特产研究,200773776任贻军，张宏琳，高逢喜荷叶的药理作用研究进展J食品与药品,2009,182075767KOLETZKOS,BALLAUFFA,HADZISELIMOVICF,ETALISHISTOLOGICALOFNEURONALINTESTINALDYSPLASIARELATEDTOCLINICALANDMANOMETRICFINDINGSINCONSTIPATEDCHILDRENJPEDIATRGASTROENTEROLNUTR,1993,17159658FREEMANGLPSYLLIUMHYPERSENSITIVITYJANNALLERGY,1994,736490492,199