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文档简介

沙门菌属,1,分类与命名,沙门菌属隶属于细菌域,变形菌门,-变形菌纲,肠杆菌目,肠杆菌科。,2,二、生物学性状,(一)形态与染色沙门菌属细菌为革兰阴性杆菌,菌体大小为(0.7-1.5)um x (2.0-5.0)um。无芽孢,无荚膜(除个别菌株如鸡沙门菌等外),一般都有周鞭毛。,3,4,5,(二)培养特性沙门菌属为需氧或兼性厌氧菌,最适生长温度3537,最适pH6.87.8。能在普通培养基上生长。在血平板上孵育24小时,可呈灰色或灰白色中等大小的圆形、湿润菌落,菌落直径24mm,6,7,8,在中国蓝,麦康凯,EMB等选择性培养基上,呈透明或半透明琥珀色,边缘整齐,中等大小的菌落。,9,在SS平板上形成中心为黑褐色的菌落,10,在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色,大部分菌落中央呈黑色。在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色在液体培养基中均匀混浊生长。,11,(三)生化特性可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇,除伤寒沙门菌产酸不产气外,其余沙门菌均产酸产气;不发酵乳糖和蔗糖(亚利桑那菌除外);不分解尿素;大多可产生H2S;动力阳性;IMVIC试验结果为+-,MIU试验为+-。,12,IMVIC试验,I:吲哚(indol)试验M:甲基红(methyl red)试验V:V.P(Voges-Proskauer)试验C:柠檬酸(citrate utilization)实验(枸橼酸盐)作用:这4个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌,多用于水的细菌检查。,13,1.吲哚试验试验菌用蛋白胨水培养基37培养24小时.在培养液中加入乙醚1ml(使呈明显的乙醚层)充分振荡,使吲哚试剂溶于乙醚.静置片刻,待乙醚浮于培养液上面时沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴.呈玫瑰红的为阳性,不变色的为阴.(注:加入吲哚试剂后,不可再摇动,否则红色不明显)2.甲基红试验试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37培养24小时.沿管壁加入M.R.(甲基红)试剂3-4滴.红的为阳性,黄的为阴性.,14,3.V.P试验试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37培养24小时.加入40%KOH 10-20滴,再加入等量-茶酚,用力振荡(拔去棉塞)再放入374h后再观察,仍无色产生为阴.4.柠檬酸实验将试验菌培养在柠檬酸盐培养基斜面上37培养24-28小时.观察有无细菌生长与培养基颜色变化.如果含有溴麝香草酚蓝的斜面蓝色者为阳性反应,呈绿色的为阴性反应;含苯酚红的斜面如果呈红色为阳性反应,呈黄色为阴性反应.,15,MIU试验,为动力、吲哚及脲酶复合试验 原理:培养基为含尿素、蛋白胨的半固体培养基,指示剂为酚红。具色氨酸酶的细菌能分解色氨酸产生吲哚,加入吲哚试剂后,培养基上层的吲哚会变红;具脲酶的细菌能分解尿素产氨,使整个培养基变碱呈红色;有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。作用:常用于肠杆菌科细菌的鉴定。,16,(四)抗原构造沙门菌的抗原结构较复杂,主要包括菌体O抗原,鞭毛H抗原,少数的菌种有表面Vi抗原,均具有分类鉴定的意义。,17,1.菌体抗原(O抗原)化学成分是脂多糖,耐热,它刺激机体产生的抗体以IgM为主,与相应的抗体结合出现颗粒状凝集。是沙门菌分群的依据,每个沙门菌的血清型可具有一种或树种O抗原,将具有共同O抗原成分的归为一个群。临床上常见的是AF群。,18,2.鞭毛抗原(H抗原)化学成分为蛋白质,不耐热,刺激机体产生的抗体以IgG为主,与相应抗体结合出现絮状凝集。是沙门菌分型的依据。H抗原分两个相:第一相为特异相;第二相为沙门菌所共有,称非特异相。仅具有一相H抗原的为单相菌,具有两相H抗原的称为双相菌。,19,3.表面抗原(Vi抗原)位于菌体外层,抗原性强,相应抗体可作为筛选带菌者指标;不耐热;能阻止O抗原与相应抗体发生凝集反应,影响沙门菌的血清学鉴定。,20,(五)抵抗力对理化因素抵抗力弱尤其对酸敏感对消毒剂敏感易产生耐药性对胆盐和煌绿等抑制剂有抵抗力,21,临床意义,致病物质:菌毛、内毒素、Vi抗体所致疾病:1.胃肠炎 2.菌血症或败血症 3.食物中毒 4.肠热症免疫性:病后免疫力牢固,以细胞免疫为主。,22,23,微生物学检验,标本采集:根据不同疾病,不同病程取不同标本,最好在使用抗生素前采集。肠热症的标本采集第一周取血液第23周取粪便和尿液全程可取骨髓,24,25,检验方法血清学鉴定,首先用AF多价O血清进行玻片凝集。再用单价O因子血清鉴定到具体的群。再用第一相与第二相H因子血清定型。若细菌生化反应符合沙门菌属,但与AF多价O血清不产生凝集现象,应考虑是否有表面抗原(Vi)存在,可将细菌悬液水浴加热30分钟后再进行凝集试验。,26,检验方法免疫学诊断,肥达反应原理:肥达反应是用已知伤寒沙门菌O、H抗原以及甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌H抗原与受检者血清进行凝集试验,测定受检者血清中有无相应抗体及其效价。意义:辅助诊断伤寒和副伤寒(肠热症),27,肠热症病人血清抗体出现情况,28,肥达反应结果判定:O凝集效价达到或超过1:80H抗体效价达到或超过1:160副伤寒H抗体效价达到或超过1:80病程中逐周检查效价递增或恢复期达到初次效价的4倍或以

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