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ICS07080 B30 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T309882014 多酚类植物基因组 DNA 提取纯化 及测试方法 MethodsofgenomicDNAextractionfromplantswithhighlevelsofpolyphenols2014-07-24发布 2015-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T309882014 目 次 前言 范围1 1 规范性引用文件2 1 缩略语3 1 原理4 1 实验室通用要求5 2 试剂与溶液6 2 仪器和设备7 2 提取步骤8 3 纯度 浓度测试9 DNA 、 4 GB/T309882014 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。本标准由中国测试技术研究院提出 。本标准由全国生化检测标准化技术委员会 归口 (SAC/TC387) 。本标准起草单位 中国测试技术研究院 中测测试科技有限公司 : 、 。本标准主要起草人 谭和平 沈兴中 唐祥凯 周李华 孙登峰 : 、 、 、 、 。 GB/T309882014 多酚类植物基因组 DNA 提取纯化 及测试方法1 范围 本标准规定了以茶树为代表的多酚类植物基因组 提取纯化方法以及 纯度 浓度测试 DNA DNA 、 方法 。 本标准适用于茶树 马 铃 薯 樱 桃 葡 萄 以 及 其 他 富 含 多 酚 类 的 植 物 的 植 物 基 因 组 提 取 及 、 、 、 DNA 纯化 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和实验方法 GB/T66822008 转基因产品检测 核酸提取纯化方法 GB/T19495.32004 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件 。 三 羟甲基 氨基甲烷 Tris: ( ) 十二烷基磺酸钠 SDS: 聚乙烯吡咯烷酮 PVP: 核糖核酸酶 RNaseA: A 二甲苯青 FF: 乙二胺四乙酸 EDTA: 三 羟甲基 氨基甲烷乙二胺四乙酸 TE: ( )4 原理 41 提取纯化 . 在液氮条件中 通过物理研磨方法破碎多酚类植物叶片的细胞 利用抗氧化剂防止多酚类化合物氧 , , 化褐变 同时利用聚乙烯吡咯烷酮 的粘接性去除多酚类化合物及其他次生代谢物等杂质 然后利 , (PVP) , 用化学方法使 从植物细胞中释放出来 再弃除 中的蛋白质等杂质 以及 提取过程中 DNA , DNA , DNA 加入的异戊醇 异丙醇 乙醇等有机溶剂 最后得到纯的 、 、 , DNA。42 纯度测试 . 在 下 根据 在 处有吸收高峰 蛋白质在 处有吸收高峰 硫氰酸盐 pH78.5 , DNA 260nm , 280nm , 、 碳水化合物
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