P物质、阿片肽在痛觉调制中的作用及药物对其影响PPT课件

1、 吉林大学第二医院吉林大学第二医院于挺敏于挺敏吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院P物质、阿片肽在痛觉调制中物质、阿片肽在痛觉调制中 的作用及药物对其影响的作用及药物对其影响 主要内容主要内容l1.痛觉的调制及阿片肽、痛觉的调制及阿片肽、P物质在痛觉物质在痛觉l 调制中的作用调制中的作用l2.头痛宁胶囊及全蝎对实验性偏头痛大头痛宁胶囊及全蝎对实验性偏头痛大l 鼠中脑阿片肽、鼠中脑阿片肽、P物质影响的初探物质影响的初探痛觉调制及阿片肽、痛觉调制及阿片肽、P物质在痛觉调物质在痛觉调 制中的作用制中的作用吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院痛觉传递和调制的相关解剖结构痛觉传递和调制的

2、相关解剖结构 痛觉的传导径路痛觉的传导径路周围敏感化周围敏感化疼痛信号在脊髓中疼痛信号在脊髓中的传递的传递 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院脊髓背角神经元脊髓背角神经元1. 投射神经元投射神经元 非伤害性神经元非伤害性神经元 特异伤害性感受神经元特异伤害性感受神经元 非特异伤害性感受神经元非特异伤害性感受神经元2. 中间神经元中间神经元 兴奋性中间神经元兴奋性中间神经元 抑制性中间神经元抑制性中间神经元疼痛的解剖和生理疼痛的解剖和生理伤害性感受器伤害性感受器温度温度,机械机械,化学化学A 和和 C纤维纤维 脊髓后角脊髓后角1,2,5层层对侧脊髓丘脑束对侧脊髓丘脑束丘脑丘脑VPL核核

3、感觉皮质感觉皮质边缘系统边缘系统 脑脑 干干导水管周围灰质导水管周围灰质 蓝斑蓝斑 5-HTNA痛觉调制的相关结构痛觉调制的相关结构吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院1.脊髓水平的调制脊髓水平的调制2.内源性调制系统内源性调制系统3.间脑和端脑的调制间脑和端脑的调制脊髓水平的调制脊髓水平的调制 富有生命力的富有生命力的“闸门控制学说闸门控制学说”：在脊髓背角内存在一：在脊髓背角内存在一个类似闸门的神经机制，控制着从外周向中枢神经系统发放个类似闸门的神经机制，控制着从外周向中枢神经系统发放的神经冲动的强度，其解剖基础是脊髓后角各类神经元的相的神经冲动的强度，其解剖基础是脊髓后角各类神经

4、元的相互作用。互作用。吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院SGT闸门控制系统作用系统中枢控制系统粗纤维粗纤维细纤维吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院内源性痛觉调制系统内源性痛觉调制系统微量注射吗啡微量注射吗啡PAG电刺激电刺激下行抑制系统激活下行抑制系统激活神经降压肽神经降压肽延髓中缝核神经元激活延髓中缝核神经元激活脑干中缝旁网状核团脑干中缝旁网状核团脊髓背外侧索脊髓背外侧索脊髓背角脊髓背角、镇痛镇痛吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 1. 丘脑：丘脑接受来自脊髓、脑干的纤维投射，经过丘脑的中继投丘脑：丘脑接受来自脊髓、脑干的纤维投射，经过丘脑的中继投 射到大脑皮质

5、。射到大脑皮质。 2. 边缘系统：在疼痛时常伴有强烈的情绪变化，这与边缘系统的功边缘系统：在疼痛时常伴有强烈的情绪变化，这与边缘系统的功 能有关。能有关。 3基底神经节：尾状核是基底神经节中最大的核团，有资料显示，刺基底神经节：尾状核是基底神经节中最大的核团，有资料显示，刺 激尾状核头能能产生镇痛作用。激尾状核头能能产生镇痛作用。 4. 大脑皮质：大脑皮质的功能在于痛觉的分辨而不是痛觉的感受。大脑皮质：大脑皮质的功能在于痛觉的分辨而不是痛觉的感受。间脑和端脑的调制间脑和端脑的调制内源性阿片肽在痛觉调制中的作用内源性阿片肽在痛觉调制中的作用吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院内源性阿片肽

6、的成员内源性阿片肽的成员吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 内源性阿片肽：是哺乳动物体内天然形成的内源性阿片肽：是哺乳动物体内天然形成的 具有阿片样作用具有阿片样作用的肽类物质的总称。的肽类物质的总称。 脑啡肽系统：脑啡肽系统：甲硫氨酸甲硫氨酸-脑啡肽、亮氨酸脑啡肽、亮氨酸-脑啡肽、甲七肽和甲八肽；脑啡肽、甲七肽和甲八肽； 内啡肽系统：内啡肽系统：主要是主要是-内啡肽（内啡肽（-END）：）： 31肽肽 还包括还包括127肽、肽、126肽、肽、117肽。肽。 强啡肽系统：强啡肽系统：强啡肽强啡肽A、强啡肽、强啡肽B及及-新内啡肽等。新内啡肽等。 称为经典阿片肽，分别来源于称为经典阿片

7、肽，分别来源于3种前体大分子，即脑啡肽原、阿黑皮素原、种前体大分子，即脑啡肽原、阿黑皮素原、强啡肽原。强啡肽原。 内吗啡肽和孤啡肽。内吗啡肽和孤啡肽。 阿片受体；阿片受体； 受体、受体、受体、受体、受体受体内源性阿片肽的作用内源性阿片肽的作用吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 在各种神经肽中，阿片肽是与疼痛及镇痛关系最直接、在各种神经肽中，阿片肽是与疼痛及镇痛关系最直接、最密切的一类神经肽。尽管发现不少神经肽都参与疼痛最密切的一类神经肽。尽管发现不少神经肽都参与疼痛传递及调制，但它们的作用大多数与阿片肽有着直接或传递及调制，但它们的作用大多数与阿片肽有着直接或间接的联系。间接的联系。

8、内源性阿片肽的主要作用部位内源性阿片肽的主要作用部位吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 脑啡肽：脑啡肽：在脑内和脊髓均有镇痛作用，但其脑内含量远大于脊髓，在脑内和脊髓均有镇痛作用，但其脑内含量远大于脊髓， 因此以因此以脑内作用脑内作用为主。为主。 内啡肽：内啡肽：-END能神经元集中在下丘脑弓状纤维，它的投射纤维主要能神经元集中在下丘脑弓状纤维，它的投射纤维主要 为为PAG和中缝背核。因此和中缝背核。因此-END 发挥作用的主要部位在发挥作用的主要部位在脑内脑内。强啡肽：强啡肽：在在脊髓脊髓发挥显著的镇痛作用，而在脑内作用复杂。发挥显著的镇痛作用，而在脑内作用复杂。 脊髓水平的调制脊

9、髓水平的调制脊髓背根神经节合成阿片肽脊髓背根神经节合成阿片肽随中枢突进入脊髓后角随中枢突进入脊髓后角传入纤维的突触前膜传入纤维的突触前膜前膜阿片受体前膜阿片受体突触前抑制作用突触前抑制作用突触后间隙突触后间隙后膜阿片受体后膜阿片受体抑制抑制cAMP酶活性酶活性抑制抑制Ca +开放开放释放释放谷氨酸、谷氨酸、SP和其他损伤性和其他损伤性递质减少递质减少促进促进K+电导电导细胞膜超极化细胞膜超极化感受器动作电位时程降低感受器动作电位时程降低提高痛阈提高痛阈吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院下行抑制系统的调制下行抑制系统的调制PAG等脑干核团等脑干核团下行抑制系统激活下行抑制系统激活延髓中

10、缝核神经元延髓中缝核神经元脑干中缝旁网状核团脑干中缝旁网状核团脊髓背外侧索脊髓背外侧索脊髓背角脊髓背角、镇痛镇痛海马等高海马等高级中枢级中枢EOP神神经元兴经元兴奋性奋性释放释放EOP与阿片受体与阿片受体结合结合P物质在痛觉调制中的作用物质在痛觉调制中的作用吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 1931年，年，Von Euler和和Gaddum首次从马的肠和脑内发首次从马的肠和脑内发现一种具有引起肠平滑肌收缩、血管舒张和降低血压作用的现一种具有引起肠平滑肌收缩、血管舒张和降低血压作用的物质，命名为物质，命名为P物质（物质（substance

11、 P,SP）,是速激肽家族成员，是速激肽家族成员，也是最早发现的神经肽。也是最早发现的神经肽。 SP在伤害感受的外周传入和脊髓水在伤害感受的外周传入和脊髓水平的痛觉调制平的痛觉调制吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院背根神经节背根神经节细胞（细胞（DRG)SP合成合成轴浆轴浆运输运输脊髓背角脊髓背角SP释放释放脊髓背角脊髓背角I层神经元的层神经元的SPRNMDA诱导的背角神经元内Ca2+增加增加痛敏感痛敏感性性神经末梢神经末梢激活感受器激活感受器SP释放释放通过局部回路加强通过局部回路加强阿片肽的镇痛效果阿片肽的镇痛效果伤害性刺激SP与脊髓以上水平的痛觉调制与脊髓以上水平的痛觉调制吉林

12、大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 在脑内，主要是中脑，在脑内，主要是中脑，SP可以促进脑啡肽释放，起镇痛作用。给小鼠可以促进脑啡肽释放，起镇痛作用。给小鼠脑内注脑内注SP，可引起明显的镇痛作用，且可被纳洛酮所翻转。，可引起明显的镇痛作用，且可被纳洛酮所翻转。 SP与吗啡有交叉耐受性：给大鼠中脑中央灰质注入与吗啡有交叉耐受性：给大鼠中脑中央灰质注入SP后也可出现明显后也可出现明显的镇痛作用，并可纳洛酮所阻断；对吗啡耐受的小鼠，注入的镇痛作用，并可纳洛酮所阻断；对吗啡耐受的小鼠，注入SP也不产生镇也不产生镇痛。因此有人认为，痛。因此有人认为，SP也可作为一种内源性阿片样物质。有报道认为也可

13、作为一种内源性阿片样物质。有报道认为-内内啡肽（啡肽（-endorphin，-END）参与介导）参与介导SP在脑内的镇痛作用。在脑内的镇痛作用。SP对痛觉的调制对痛觉的调制吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 SP对痛觉信息的传递可能起对痛觉信息的传递可能起双重作用双重作用： 1. 作为伤害信息传入纤维的神经递质，在脊髓背角、作为伤害信息传入纤维的神经递质，在脊髓背角、 三叉神经脊束核等部位对痛觉传递的第一级突触起三叉神经脊束核等部位对痛觉传递的第一级突触起 促进或易化作用。促进或易化作用。 2. 在脑内则发挥镇痛作用，对痛觉感受进行调制，降在脑内则发挥镇痛作用，对痛觉感受进行调制，降

14、 低对痛觉的敏感度。低对痛觉的敏感度。 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院头痛宁胶囊及全蝎对偏头痛大鼠中头痛宁胶囊及全蝎对偏头痛大鼠中脑阿片肽和脑阿片肽和P物质影响的初探物质影响的初探 于挺敏于挺敏 吉林大学第二医院吉林大学第二医院吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 头痛宁胶囊是临床上应用较多，疗效为多数病人和头痛宁胶囊是临床上应用较多，疗效为多数病人和医生认可的中成药制剂，在临床上主要用于偏头痛、紧医生认可的中成药制剂，在临床上主要用于偏头痛、紧张型头痛的治疗。其主要成分之一全蝎是中医治疗各种张型头痛的治疗。其主要成分之一全蝎是中医治疗各种风湿痹痛、三叉神经痛、头痛、癌肿

15、疼痛的常用组分。风湿痹痛、三叉神经痛、头痛、癌肿疼痛的常用组分。为了了解头痛宁胶囊、全蝎是否对痛觉调制系统中阿片为了了解头痛宁胶囊、全蝎是否对痛觉调制系统中阿片肽、肽、SPSP产生影响，我们设计了本研究。产生影响，我们设计了本研究。立题意义立题意义吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院 本研究通过观察全蝎以及头痛宁胶囊对偏头痛大鼠内本研究通过观察全蝎以及头痛宁胶囊对偏头痛大鼠内源性痛觉调制系统的核心结构源性痛觉调制系统的核心结构中脑中中脑中P P物质及内源性阿物质及内源性阿片肽片肽的影响，研究全蝎以及头痛宁胶囊治疗偏头痛的中枢的影响，研究全蝎以及头痛宁胶囊治疗偏头痛的中枢作用，初步探讨全

16、蝎及头痛宁胶囊治疗头痛的可能机制。作用，初步探讨全蝎及头痛宁胶囊治疗头痛的可能机制。立题意义立题意义 WistarWistar大鼠大鼠3030只只对照组对照组偏头痛组偏头痛组偏头痛大鼠模型偏头痛大鼠模型提取总提取总RNA光学显微镜光学显微镜中脑导水管周围灰质区中脑导水管周围灰质区SPSP、亮氨酸脑啡肽和、亮氨酸脑啡肽和 -内啡肽的分布及表内啡肽的分布及表达达观察行为学变化观察行为学变化中中 脑脑免疫组织化学染色免疫组织化学染色“头痛宁头痛宁”治疗治疗组组“全蝎全蝎”治疗组治疗组“头痛宁头痛宁”对照对照组组“全蝎全蝎”对照组对照组SP片段片段脑啡肽原片段脑啡肽原片段重组质粒标准品重组质粒标准品荧

17、光定量标准曲线荧光定量标准曲线SP mRNA绝对定量绝对定量脑啡肽原脑啡肽原 mRNA绝对定量绝对定量脑组织脑组织提取总提取总RNASP、脑啡肽原片段、脑啡肽原片段技技术术路路线线吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院动物分组动物分组 选用成年健康选用成年健康WistarWistar大鼠大鼠3030只，体重只，体重21021010g10g，分，分6 6组组, ,每组每组5 5只：只： A A组：对照组组：对照组 B B组：偏头痛组组：偏头痛组 C C组：头痛宁胶囊对照组组：头痛宁胶囊对照组 E E组：全蝎对照组组：全蝎对照组 D D组：头痛宁胶囊治疗组组：头痛宁胶囊治疗组 F F组：全蝎

18、治疗组组：全蝎治疗组实验方法实验方法头痛宁胶囊头痛宁胶囊 3.75g/Kgd灌胃灌胃给药给药7天天全蝎粉全蝎粉 0.26g/Kgd灌胃给药灌胃给药连续给药连续给药7天天免疫组化免疫组化 WistarWistar大鼠大鼠3030只只对照组对照组偏头痛组偏头痛组 “头痛宁头痛宁” 治疗组治疗组 “全蝎全蝎” 治疗组治疗组 “头痛宁头痛宁” 对照组对照组 “全蝎全蝎” 对照组对照组皮下注射生理盐水皮下注射生理盐水 2mL/kg 2mL/kg 皮下注射硝酸甘油皮下注射硝酸甘油 10mg/kg 10mg/kg 造模成功的指标：频繁挠头、爬笼、咬尾、往返运动造模成功的指标：频繁挠头、爬笼、咬尾、往返运动

19、荧光定量荧光定量PCR 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院60min-90min60min-90min行为学评价：行为学评价：挠头、爬笼、咬尾、往返运动的次数总和挠头、爬笼、咬尾、往返运动的次数总和 （每个症状出现（每个症状出现1 1次计次计1 1分）分） 中脑中脑MNK、 内内啡肽，啡肽，SP检测检测2h吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结果结果1：各组大鼠行为学评价：各组大鼠行为学评价头痛宁治疗组和全蝎治疗组大鼠行为评分明显低于偏头痛组，头痛宁治疗组和全蝎治疗组大鼠行为评分明显低于偏头痛组，头痛宁治疗组大鼠行为学评分较全蝎治疗组评分更低。头痛宁治疗组大鼠行为学评分较全蝎

20、治疗组评分更低。吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果2. 全蝎对实验大鼠全蝎对实验大鼠中脑脑啡肽原中脑脑啡肽原mRNA表达表达全蝎可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头全蝎可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达。痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达。吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果3.全蝎对实验大鼠全蝎对实验大鼠中脑中脑P物质物质 mRNA表达表达偏头痛大鼠中脑偏头痛大鼠中脑P物质物质 mRNA表达减少；全蝎给药组大鼠中脑表达减少；全蝎给药组大鼠中脑P物质物质 mRNA表达较对照组和偏头痛组无显

21、著差异表达较对照组和偏头痛组无显著差异吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果3.全蝎对实验全蝎对实验大鼠大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响对照组对照组偏头痛组偏头痛组全蝎对照组全蝎对照组 全蝎治疗组全蝎治疗组 各组各组吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果3.全蝎对实验全蝎对实验大鼠大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响各组之间无显著差异各组之间无显著差异吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果4.全蝎对实验全蝎对实验大鼠大鼠PAG区区-内啡肽阳性细胞数的影响内啡肽

22、阳性细胞数的影响对照组对照组偏头痛组偏头痛组全蝎对照组全蝎对照组 全蝎治疗组全蝎治疗组 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果4.全蝎对实验全蝎对实验大鼠大鼠PAG区区-内啡肽阳性细胞数的影响内啡肽阳性细胞数的影响全蝎治疗组大鼠中脑全蝎治疗组大鼠中脑PAG区区-内啡肽阳性细胞明显增多内啡肽阳性细胞明显增多吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果5.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠中脑脑啡肽原基因表达的影响大鼠中脑脑啡肽原基因表达的影响头痛宁胶囊可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当头痛宁胶囊可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头痛时却可以提高其中

23、脑脑啡肽原的基因表达大鼠头痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果6.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠中脑大鼠中脑P物质物质 mRNA表达的影响表达的影响偏头痛大鼠中脑偏头痛大鼠中脑P物质物质 mRNA表达减少；头痛宁给药组大鼠中表达减少；头痛宁给药组大鼠中脑脑P物质物质 mRNA表达较对照组和偏头痛组无显著差异表达较对照组和偏头痛组无显著差异吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果7.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响对照组对照组偏头痛组偏头痛组头痛宁

24、胶囊对照组头痛宁胶囊对照组 头痛宁胶囊治疗组头痛宁胶囊治疗组 吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果7.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响头痛宁治疗组大鼠中脑头痛宁治疗组大鼠中脑PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞明显增多区亮氨酸脑啡肽阳性细胞明显增多吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果8.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠大鼠PAG区区-内啡肽阳性细胞数的影响内啡肽阳性细胞数的影响对照组对照组偏头痛组偏头痛组头痛宁对照组头痛宁对照组 头痛宁治疗组头痛宁治疗组 各组各组吉林大学白求恩第二医院吉林大学白求恩第二医院结结 果果8.头痛宁胶囊对实验头痛宁胶囊对实验大鼠大鼠PAG区