乾元浩生产实习报告

1、环境与生物工程学院毕业实习报告专 业： 姓 名： 学 号： 实习地点： 乾元浩生物公司南京生物药厂指导老师： 实习日期： 一. 实习目的本次乾元浩生物公司南京制药厂生产实习是对我们大学四年学习情况的检验，是知识与实践的一次结合。其目的是：（1）使我们了解生物公司的生产环境，掌握生产概况。工厂与实验室不一样，大批量的生产特性注定了生产环境与概况不同于实验室。通过实习能够让我们了解生物公司的生产环境，这对于即将步入社会参加工作的我们显得尤为重要。（2）对典型的生物技术有最直接、最直观的了解。工业生产中使用最广泛、最典型的生物技术是我们已知的，因而实习能够让我们对这些技术有更直接、更深刻的认识。对于

2、这些技术手段的原理也能够得到更清晰的理解。（3）将所学理论联系实际，印证、巩固和加深所学基本理论知识和专业知识。为我们后续走上工作岗位打下基础。实习是理论教学的补充和完善，是我们开始接触社会、接触工作的窗户。在实习的过程中，理论知识与实践结合在一起，这对于今后的工作也是具有重要意义的。二. 实习单位及岗位介绍1.实习单位乾元浩南京生物药厂系乾元浩生物股份有限公司下属生产企业，始建于1931年，是中国最早从事兽用生物制品研究与生产的企业。1978年定名为“南京药械厂”，是农业部直属兽医生物制品生产企业。1998年更名为“中牧股份南京药械厂”。2004年更名为“乾元浩南京生物药厂”。其是中国第一家

3、动物疫苗制造工厂，最早采用冻干保护剂的疫苗企业。乾元浩南京厂概况：工厂地点位于南京市雨花台区小行路33号，总占地面积300亩，具有3个GMP车间，9条疫苗生产线，总投资近亿元。2.岗位介绍乾元浩南京生物药厂共三个GMP车间，本次我们小组实习地在第五车间。本车间于1989年由农业部投资1700万元，按当时所理解的美国GMP标准建设的第一个准GMP生物制品生产车间。2008年乾元浩投资2000万元进行改造，并于2009年4月通过农业部GMP验收。本车间有猪瘟细胞活苗生产线，细菌活苗生产线，组织活苗生产线，猪瘟淋脾生产线。本次作为实习生，在车间主要工作是学习一些基本操作技术，并且参观认识生产流水线上

4、的各个环节设备以及工作原理，完成车间主任布置的工作任务。三. 实习安排实习安排计划表日期实习项目3月7日安全生产培训以及企业概况介绍3月8日第五车间 车间概况了解及生产设备参观3月9日-10日第五车间粗洗间参观实践3月11日、14日-17日第五车间贴签间参观实践3月18日全厂生产及设备参观四. 实习内容及过程本次实习期间，在车间主任等人的帮助下，我们有幸参与了整个生产流程。对于企业来说，安全生产是一条红线。虽然我们是以实习的名义去公司，公司的人力资源部仍旧给我们进行了安全生产培训。从我们专业的角度来说，生物制品与化学制品的危害与污染是极大的，所以公司特别重视安全问题是一家让人放心的企业。安全生

5、产离不开各种规章制度，乾元浩南京生物药厂在这方面取得了瞩目的成就。公司在2002年12月率先通过农业部兽药GMP认证，成为国内首家通过GMP认证的兽用生物制品中资企业，也是国内首家通过GMP动态验收的兽用生物制品企业。公司采用各种先进的工业生产管理技术、各种先进的检测手段，在质量把控、安全生产上取得了长足的进步。安全生产培训后，来到了我们的定点实习单位第五车间。车间负责人带领我们参观了车间外围生产设备。并通过监控录像了解生产进程。整个生产车间由粗洗间，分离间，精洗间，无菌间，接种间，培养间，轧盖间，贴标间组成。车间的主要环节都有监控，可以很好的预防意外的发生。监控中可以看到那些忙碌的工人，身穿

6、蓝色工作服的他们正在一丝不苟的进行生产，这正是我们今后工作时应该具备的品德。参观完外围生产设备后，进一步参观了粗洗间、贴签间。因生产车间要保持严格的无菌环境，并且生产的疫苗毒性较强，进入核心区域必须更换工作服且进行几次消毒处理，无法进入参观。在参观外围生产设备时，我们发现在第五车间周围有不少的辅助设备，用于保证生产环节的正常进行。其中包括蒸汽发生器，多效整流器，空气压缩机，真空冷冻干燥机等。车间用水主要分为三类：蒸馏水，纯化水和注射用水。其纯净程度依次增加，所配置的疫苗必须使用注射用水。各种等级的水由不同的管道输送，分配到各个需要的岗位。比如，我本人在粗洗间实习了两天，主要负责疫苗分装瓶的洗涤

7、工作。瓶子洗涤就是依次用这几类水进行清洗，当然，都是在超声中进行的，这样可以将附着在瓶壁内的微小杂质去除干净。洗涤之后的瓶子进入高压蒸汽灭菌箱中灭菌。空气压缩机，空气净化器，风机等为车间提供正压，以保证进入车间的空气清洁。当然，即使是在车间内部，接种室，洗涤间等隔离处也会有压差测量仪，这样更容易将压力控制在适宜的范围内。真空冷冻干燥机用来将疫苗干燥成固体，制成成品。之后将固体疫苗按照固定的质量分装到药瓶中。车间里面的冷冻干燥机体积很大，因此一次性处理量也很大。另外，所有的设备都是至少有两台以上，工作时间都是一台工作，另外的作为备用设备。本车间冷干机的型号为NLG-22型真空冷冻干燥机。车间主要

8、生产的疫苗是：猪瘟活疫苗。这种疫苗的工艺规程如下：1 毒种1.1 制造本品用的毒种为猪瘟兔化弱毒株，基础种子由中国兽医药品监察所鉴定、保管和供应。1.2 生产用毒种制备1.2.1 毒种繁殖1.2.1.1 脾毒繁殖1.2.1.1.1 接种 将基础种子用灭菌生理盐水稀释50倍，接种于发育良好的敏感家兔（体重1.53Kg），每兔耳静脉注射1毫升；家兔在接种前，至少测温观察3日，每日上、下午各测体温一次，选用体温正常、温差波动不大的家兔。1.2.1.1.2 测温观察家兔接种后，上、下午各测体温一次，24小时后，每隔6小时测体温一次。1.2.1.1.3 毒种收获选择定型热反应兔，从体温下降及其以后的24

9、小时内剖杀。以无菌操作采取脾脏冷冻或冻干保存，作为生产用毒种。1.2.1.2 细胞毒繁殖 用细胞维持液，将新鲜脾毒制成0.30.5的悬液，接种生长良好的牛睾丸单层细胞，置36.537继续培养。每隔45天收获换液一次，取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种。1.2.2 毒种鉴定1.2.2.1 对家兔的感染性将毒种用灭菌生理盐水作50倍稀释，耳静脉接种家兔4只，每只1毫升。接种后测温观察96小时，仅使家兔产生热反应，不致死家兔。1.2.2.2 病毒含量毒种对家兔的最小感染量为10-5/1ml；1.2.2.3 安全性脾毒用灭菌生理盐水稀释10倍，细胞毒用原液接种无猪瘟中和抗体的健康敏感猪4头，每头肌

10、肉注射5ml，测温观察21天，应无异常反应。1.2.2.4 纯净毒种应无细菌、霉菌、支原体及其它外源病毒污染。1.2.2.5 特异性将毒种用灭菌生理盐水稀释1000倍，与等量的抗猪瘟病毒特异性血清在1015中和1小时，同时设立阳对照组（病毒对照）和阴性对照组（生理盐水）；分别接种家兔2只，每兔耳静脉注射1ml。测量体温反应情况，除阳性对照组应出现热反应外，其余两组在接种后120小时内不引起热反应。1.2.3 毒种保存 在-20以下保存，脾毒不超过25日，细胞毒不超过半年，冻干毒不超过2年。1.2.4 毒种继代脾毒不超过5代，细胞毒不超过3代。2 疫苗制造2.1 犊牛睾丸单层细胞的制备2.1.1

11、 原代细胞的制备 选用非猪瘟疫区，无口蹄疫、粘膜病等传染病地区的14日龄健康小公牛，以无菌手术采取牛睾丸，置于含1000单位/毫升双抗的汉克氏液内。将采取的睾丸除去包膜、睾丸内皮部分，剪成23毫米大小的组织块，用胰酶消化制成细胞悬液，分装于细胞瓶中，每瓶分装量为转瓶的1/10，置36.537温室中转动培养，一般细胞培养24小时开始分裂，7296小时形成致密单层。2.1.2 次代细胞的制备将生长良好的原代细胞瓶内营养液倒净，加入EDTA胰酶分散液150毫升（瓶容量的1%），轻轻滚动转瓶，一旦发现瓶壁模糊、细胞顺瓶壁下滑或细胞呈星状的拉网等现象时，倒去分散液，加入乳汉液，摇匀，形成细胞悬液，分装至

12、46个细胞瓶中。2.2 制苗毒液的制备2.2.1 接种 将生产用毒种接种于生长良好的犊牛睾丸次代细胞转瓶中，按转瓶培养液液量的0.20.4%接入脾毒种或35%生产用细胞毒种，置36.537温室中转动培养。2.2.2 收获 接毒后5日作第一次收获换液，以后每隔4日收获换液一次，全收时可适当增加12天。收获的毒液装入灭菌容器内，送20保存。2.3 半成品检验2.3.1 无菌检验 各收次细胞毒液分别取样，进行无菌检验，应无细菌生长。2.3.2 病毒含量测定 各收次细胞毒逐瓶抽样组批混合，用家兔进行毒价测定，每1ml应含病毒80000个家兔感染量，方可用于配制疫苗。2.4 配苗与分装 将检验合格的细胞

13、毒液，混合于同一容器内，按设计头份，加入一定比例冻干稳定剂，同时加入适量的抗生素，充分混合后，定量分装进行冷冻真空干燥。在参观完设备及了解制造规程之后，我们主要活动区域还是在粗洗间和贴签间。本车间共两个粗洗间，一个是装药瓶的粗洗车间（一楼），另一个是发酵罐粗洗间（二楼）。在粗洗间，为了保持车间的清洁，我们进入必须时穿戴鞋套。正因为如此，车间地面几乎一尘不染。房间的地面使用的是环氧地坪漆，具有耐磨，耐压，耐冲击，耐强酸，防水，防尘，防滑以及防静电，防电磁波等特性。该车间使用这种地面时为了保持室内地面整体无缝，易清洗，不集聚灰尘、细菌，以满足该车间的无菌要求。一楼粗洗间主要是清洗装疫苗成品的小瓶子

14、。瓶子是从山东临淄运送过来，在仓库分装到运送盘里面，然后统一摆放在运送车里面。运送到粗洗间后，进入粗洗设备。在这过程中，我主要参与的是在仓库对瓶子进行分装。主要是配合几个有经验的老师傅把装瓶子的盘子摆到运送箱里。师傅们的工作效率相当高。经过长时间的磨合后，他们不是单独作战了。而是像流水线作业一般，工作效率很高。二楼粗洗间主要是进行发酵罐的初步清洗，以及对干燥好的发酵罐封口，瓶塞包扎灭菌处理。进入粗洗间的第一天，车间主任给我们安排了发酵瓶封口灭菌的任务。在实验室中，学习过发酵罐封口包扎灭菌处理，对于这次工作我们都是手到擒来。由于工作量有些大，大家商量过后决定进行流水线操作。搬运瓶子，递绳子，折叠

15、封口纸张，有条不紊的完成了第一项任务。 第二项任务，就是学习清洗大型发酵罐。15L的发酵罐有专门的一套清洗设备，包括机械转动的刷子和专配的清洗池。每个罐子先加入适量洗洁剂，再加入少量自来水，将机械刷插入瓶内，打开开关，清洗1分钟左右，然后将其取下并瓶口朝下插入清洗槽中，先后用热自来水，去离子水，纯净水各冲洗12min。另外一种发酵罐的清洗方法略有不同，需要先将其灌满水浸泡一两天再进行上述操作。第三项任务是进行发酵环节其他设备的灭菌前包扎处理工作。包括长塞子，短塞子，漏斗，橡皮管等设备。对于长塞子和橡皮管，都需要先用布包裹，再用三层玻璃纸（手感与实验室的称量纸相似）进行包扎；短塞子，漏斗直接用三

16、层玻璃纸包扎。绳子打结的手法都是一样的。实习期间，车间还有南京工业大学的学生，我们每天都是一起合作完成任务的。实习的后半段时间都是在贴签间度过的。这是疫苗生产的最后一个流程。即将疫苗对应的标签通过自动化的机器贴在瓶身上，再打上生产日期和保质期，基本上就可以出厂了。当然，贴签间并不是一直进行工作的，而是根据实际情况排班的。只有一批疫苗生产出来装瓶之后这里才会工作。本车间大概一周贴标签一次。贴签所用的机器是根据成品瓶的规格专门设计好的，需要人工操作的是将摆放好成品瓶放入转盘，以及给机器更换标签纸带和日期码带。我们一般都是被安排在搜集瓶子的岗位上。这份工作并不像表面理解的那么简单。首先必须要集中注意

17、力。瓶子不断从传送带上调入疫苗运转箱，由于机器运转较快，所以必须把掉落堆积的瓶子尽快铺平，以防溢出。另外，瓶子在传送的过程中可能会摔倒，如果出现这种情况，就必须立即转掉机器，将瓶子摆好，以免出状况！当然，对于我们这些新手，遇到这种情况基本都会感到紧张，还好有老师傅在，他们熟练的操作，每次都可以化险为夷，有惊无险。实习的第二个星期，主要的任务是将轧好盖的瓶子摆放在托盘上，便于最后的贴签工作。最后一天，丁主任带我们参观了所有车间，并给我们按照实际流程讲解了整个产过程。整个车间的设计令人惊叹，从原料进入车间，进行消毒，产品生产，到产品包装，每个生产环节紧紧相扣，采用自动化生产线，配合以先进的仪器设备

18、，生产便利快捷。从源头抓起,严把原材料质量关,从原料供应商的选择,资质的认证,到进厂后的验收、报验,检验合格后方可放行。不管在哪个企业，都能看见现在需要越来越多的高技术人才来使用或操作相关设备和仪器。所以我们必须有效的利用我们的在校时间，认真学习理论知识，并通过实习掌握所学知识在相关领域内的应用，加深对所学知识的应用和理解。而且我还看到，做每一件事情都不是简简单单就能完成的，必须付出自己的辛勤和努力、勤于思考才能做好自己的事情。五. 实习总结及体会为期两周的生产实习注定是一段难忘的时光，这里教会了我们很多实践知识。彼时刚刚迈入大学，对于生物工程这个陌生的专业没有太多的感觉。而到了生产实习的时候，我们已经积累了一定的专业知识，对于专业也有了一定的认识。不过，“纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。”书本知识，或者说理论知识只有与实际结合才能发挥出知识应有的作用。首先，实验室与生产车间区别还是很大的。实验室里是要创意，是科研的地方，而生产车间的最终目的是获得利益。如何才能获得利益？这