TKI耐药以后的后续治疗_郭人花

1、中高度保守，改变此序列的组成或构象将显著影响激酶活性。T790T790位于位于EGFREGFR与与ATPATP结合的结合的关键区域，因此被称为关键区域，因此被称为“gatekeeper”gatekeeper”残基。残基。 T790mT790m突变即在突变即在EGFREGFR激酶区激酶区T790T790位点上出现了以大量甲位点上出现了以大量甲硫氨酸残基替代苏氨酸的替硫氨酸残基替代苏氨酸的替代突变，大量的甲硫氨酸残代突变，大量的甲硫氨酸残基可对基可对EGFR-TKIEGFR-TKI的结合形成的结合形成了位阻，并且突变后的了位阻，并且突变后的EGFREGFR与与ATPATP亲和力较亲和力较EGFR-

2、TKIEGFR-TKI明明显增强，从而使原来已经被显增强，从而使原来已经被抑制的磷酸化信号传导过程抑制的磷酸化信号传导过程被重新启动，最终使这类药被重新启动，最终使这类药物无法阻断物无法阻断EGFREGFR磷酸化所介磷酸化所介导的信号传导而导致耐药。导的信号传导而导致耐药。T790mT790m突变突变c-METc-MET扩增扩增c-METc-MET基因扩增可以通过基因扩增可以通过激活激活ErbB3-PI3KErbB3-PI3K信号途信号途径，从而绕过了径，从而绕过了GefitinibGefitinib作用的靶点作用的靶点EGFREGFR，导致，导致NSCLCNSCLC对对GefitinibGe

3、fitinib产生耐药。产生耐药。肿瘤诱导的血管生成在肿瘤局部生长、侵袭转移中起到重肿瘤诱导的血管生成在肿瘤局部生长、侵袭转移中起到重要作用，这种血管生成受到许多生长因子的调节，其中最主要作用，这种血管生成受到许多生长因子的调节，其中最主要的是血管内皮生长因子要的是血管内皮生长因子(VEGF)(VEGF)与碱性成纤维细胞生长因子与碱性成纤维细胞生长因子( (bFGFbFGF) )。大量证据表明大量证据表明EGFREGFR自分泌通路能够部分调控多种血管生成自分泌通路能够部分调控多种血管生成生长因子，其中包括生长因子，其中包括VEGFVEGF与与bFGFbFGF。体外研究发现，体外研究发现，EGF

4、REGFR的活化能够引起结肠癌、前列腺癌、的活化能够引起结肠癌、前列腺癌、神经胶质瘤及头颈部癌细胞内神经胶质瘤及头颈部癌细胞内VEGFVEGF表达增高表达增高 。EFGREFGR抑制剂能够通过抑制抑制剂能够通过抑制EGFREGFR活化从而下调肿瘤诱导活化从而下调肿瘤诱导VEGFVEGF介导的血管生成。肿瘤血管发生调控的改变可能是介导的血管生成。肿瘤血管发生调控的改变可能是EGFREGFR抑制抑制剂产生耐药的一个重要机制。剂产生耐药的一个重要机制。上皮细胞上皮细胞- -间质转化（间质转化（epithelial to epithelial to mesenchymalmesenchymal tra

5、nsition transition，EMTEMT）是一种生理现象，在胚胎发育过程中参与器官塑形。）是一种生理现象，在胚胎发育过程中参与器官塑形。上皮细胞在失去上皮特征、获得间质特征后，其细胞侵袭转移能力上皮细胞在失去上皮特征、获得间质特征后，其细胞侵袭转移能力都大为提高。都大为提高。EMTEMT的发生与肿瘤细胞外微环境的基质改变和重塑有关的发生与肿瘤细胞外微环境的基质改变和重塑有关. .SrcSrc通路、通路、MAPK MAPK 及及PI-3KPI-3K信号通路均参与诱导信号通路均参与诱导EMTEMT，而这些信号通路，而这些信号通路在在EGFR-TKIEGFR-TKI的耐药中发挥作用。的耐药

6、中发挥作用。最近的研究结果显示，最近的研究结果显示，EGFR-TKIEGFR-TKI原发性耐药细胞株往往呈现上皮基原发性耐药细胞株往往呈现上皮基因表达下调，出现间质性细胞表型，即产生所谓的因表达下调，出现间质性细胞表型，即产生所谓的EMTEMT现象。恢复现象。恢复NSCLCNSCLC的的E-E-钙黏素表达后，细胞则恢复对钙黏素表达后，细胞则恢复对EGFR-TKIEGFR-TKI的敏感性。的敏感性。这种上皮或间质表型的这种上皮或间质表型的NSCLCNSCLC细胞对细胞对EGFREGFR抑制剂的敏感性的差异与抑制剂的敏感性的差异与体外细胞周期的状况及体内异种移植肿瘤的生长速度无关，并且与总体外细胞

7、周期的状况及体内异种移植肿瘤的生长速度无关，并且与总的的EGFREGFR蛋白水平无关。以上结果表明蛋白水平无关。以上结果表明EMTEMT是是NSCLCNSCLC原发性耐受原发性耐受EGFR-EGFR-TKITKI的机制之一，但这一机制是否参与的机制之一，但这一机制是否参与NSCLCNSCLC对对EGFR-TKIEGFR-TKI的获得性耐的获得性耐药目前尚未明。药目前尚未明。n细胞学水平细胞学水平n体外动物实验体外动物实验n临床试验临床试验CL-387,7859CL-387,7859对对L858R&T790mL858R&T790m转染后转染后的的Ba/F3Ba/F3细胞的抗增细胞

8、的抗增殖作用，如殖作用，如图所图所示示，随着药物浓度梯，随着药物浓度梯度的增加，度的增加， L858R&T790mL858R&T790m转染后转染后的的Ba/F3Ba/F3细胞对细胞对GefitinibGefitinib、CetuximabCetuximab及及ErlotinibErlotinib均表现出均表现出耐药，而耐药，而CL387,785CL387,785在在1mol/L1mol/L浓度时浓度时即达到了即达到了50%50%的抑制的抑制率（率（IC50IC50）CL-387,7859CL-387,7859（ irreversibleirreversible inhibit

9、or of EGFR inhibitor of EGFR ）Alternative Inhibitor Overcomes Resistance Caused by a Mutation of the Epidermal Growth Factor Receptor Cancer Res 2005; 65: Alternative Inhibitor Overcomes Resistance Caused by a Mutation of the Epidermal Growth Factor Receptor Cancer Res 2005; 65: (16). August 15, 200

10、5(16). August 15, 2005如如图所图所示，在分示，在分子水平的检测中子水平的检测中，同浓度的，同浓度的CL-CL-387,785387,785较较GefitinibGefitinib可明显可明显抑制抑制EGFREGFR及其下及其下游信号通路的活游信号通路的活化，证实化，证实CL-CL-387,785387,785可以明显可以明显抑制抑制EGFR-TKIEGFR-TKI耐耐药细胞株的增殖药细胞株的增殖。 HKI-272HKI-272 & HKI-357 & HKI-357 （irreversible dual inhibitors of EGFR and ERB

11、B2irreversible dual inhibitors of EGFR and ERBB2）inhibitors of the EGF receptor may circumvent acquired resistance to inhibitors of the EGF receptor may circumvent acquired resistance to gefitinibgefitinib PNAS,May 24, 2005,vol.102,no.21:7665- PNAS,May 24, 2005,vol.102,no.21:7665-76707670 HC-toxin H

12、C-toxin （an HDAC inhibitoran HDAC inhibitor）联合联合MEKMEK或或PI3KPI3K抑制剂抑制剂 如图所示，如图所示，HC-toxinHC-toxin（组（组蛋白脱乙酰基酶抑制剂）蛋白脱乙酰基酶抑制剂）在在0.1mol/L0.1mol/L时联合低剂时联合低剂量的量的MEKMEK或或PI3KPI3K抑制剂可以抑制剂可以明显促进肺腺癌细胞明显促进肺腺癌细胞H1650H1650 （Del E749-A750&PTEN Del E749-A750&PTEN DelDel）凋亡并抑制下游信号凋亡并抑制下游信号通路的活化。通路的活化。Blocka

13、de of the ERK or PI3KBlockade of the ERK or PI3KAktAkt signaling pathway enhances the signaling pathway enhances the cytotoxicitycytotoxicity of of histonehistone deacetylasedeacetylase inhibitors in tumor cells resistant inhibitors in tumor cells resistant to to gefitinibgefitinib or or imatinibima

14、tinibAG1024 AG1024 (IGFR-TKI)(IGFR-TKI)联合联合 GefitinibGefitinibCombined inhibition of IGFR enhances the Combined inhibition of IGFR enhances the eVectseVects of of geWtinibgeWtinib in H1650: a lung cancer cell line with EGFR mutation and primary in H1650: a lung cancer cell line with EGFR mutation an

15、d primary resistance to EGFR-TK inhibitorsresistance to EGFR-TK inhibitors如图所示，如图所示，胰岛素样生胰岛素样生长因子长因子受体抑制剂受体抑制剂AG1024 AG1024 联合联合GefitinibGefitinib可以明显促进可以明显促进H1650H1650 （Del E749-A750&PTEN Del E749-A750&PTEN DelDel）细胞凋亡并抑制下）细胞凋亡并抑制下游信号通路的活化。游信号通路的活化。S-1S-1联合联合GefitinibGefitinibPC-9/ZDPC-9/ZD

16、细胞是稳定表达细胞是稳定表达Del E749-A750&T790mDel E749-A750&T790m突突变的诱导耐变的诱导耐GefitinibGefitinib肺肺腺癌细胞株腺癌细胞株 接受接受S1+GefitinibS1+Gefitinib联联合给药的小鼠体内的合给药的小鼠体内的肿瘤负荷明显小于单肿瘤负荷明显小于单一用药的小鼠一用药的小鼠H1975H1975细胞（细胞（L858R&T790mL858R&T790m）接受接受S1+GefitinibS1+Gefitinib联联合给药的小鼠体内的合给药的小鼠体内的肿瘤负荷明显小于单肿瘤负荷明显小于单一用药的小鼠

17、一用药的小鼠Addition of S-1 to the Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitor Gefitinib Overcomes Gefitinib Resistance in Non small cell Addition of S-1 to the Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitor Gefitinib Overcomes Gefitinib Resistance in Non small cell Lung Cancer Cell Lines with MET Amplificatio

18、nLung Cancer Cell Lines with MET AmplificationHCC827 GR5HCC827 GR5细胞是稳定表达细胞是稳定表达Del Del E749-A750E749-A750突变突变&MET &MET 扩增的诱导扩增的诱导耐耐GefitinibGefitinib肺腺癌细胞株肺腺癌细胞株 接受接受S1+GefitinibS1+Gefitinib联联合给药的小鼠体内的合给药的小鼠体内的肿瘤负荷明显小于单肿瘤负荷明显小于单一用药的小鼠一用药的小鼠Cetuximab Cetuximab 联合联合BIBW-2992BIBW-2992（ irrever

19、sible inhibitor of EGFR irreversible inhibitor of EGFR ）从影像学表现可从影像学表现可以看到，以看到， 在在EGFR EGFR L858R&T790mL858R&T790m及及EGFR T790mEGFR T790m突变突变型小鼠中，型小鼠中，Cetuximab Cetuximab 联合联合BIBW-2992BIBW-2992较单较单药明显减轻肿瘤药明显减轻肿瘤负荷。负荷。Dual targeting of EGFR can overcome a major drug resistance mutation in mouse

20、 models of EGFR mutant lung cancerDual targeting of EGFR can overcome a major drug resistance mutation in mouse models of EGFR mutant lung cancerVEGFR inhibitor VEGFR inhibitor HCC827-T790mHCC827-T790m细胞为细胞为稳定转染，表达稳定转染，表达T790mT790m突变的肺癌细突变的肺癌细胞。小鼠接受该细胞胞。小鼠接受该细胞种植后，分别予种植后，分别予GefitinibGefitinib、Erloti

21、nibErlotinib及及VandetanibVandetanib（VEGFR VEGFR inhibitorinhibitor）后，可）后，可以观察到以观察到VantetanibVantetanib较较EGFR-TKIEGFR-TKI能够明显能够明显抑制瘤体生长，延长抑制瘤体生长，延长小鼠生存期。小鼠生存期。Combined Vascular Endothelial Growth Factor Receptor and Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) Combined Vascular Endothelial Growth Factor Re

22、ceptor and Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) Blockade Inhibits Tumor Growth in Blockade Inhibits Tumor Growth in XenograftXenograft Models of EGFR Inhibitor Resistance Models of EGFR Inhibitor Resistance接受接受H1975H1975（L858R&t790mL858R&t790m）种种植的小鼠，分别植的小鼠，分别予予EGFR-TKIEGFR-TKI及及VEGFR inhibitorVEGFR inhibitor单一及联合给药单一及联合给药，观察到，观察到VEGFRVEGFR可可以较以较EGFR-TKIEGFR-TKI明明显抑制肿瘤生长显抑制肿瘤生长，并且单药与联，并且单药与联合用药间没有显合用