PPAR-α激动剂(非诺贝特)对NAFLD大鼠肝细胞凋亡的影响

1、PPAR- 激动剂（非诺贝特）对NAFLD大鼠肝细胞凋亡的影响目的：采用高脂饲料喂养SD大鼠建立 NAFLD模型，观察 PPAR-激动剂（非诺贝特）对 NAFLD大鼠肝细胞凋亡的影响。 方法：将 66 只雄性 SD大鼠适应性喂养 1 周后，随机分为 3 组：对照组（ C组， n=18），模型组（ M组， n=24）和非诺贝特组（ F 组， n=24）。C组予普通饲料喂养， M组和 F 组予高脂饲料喂养。同时， F 组予非诺贝特（ 10mg/kg/d ），按 1ml 助溶剂溶解 2mg非诺贝特的比例进行腹腔内注射给药， 每日一次。C组和 M组给予助溶剂（ 5ml/kg/d ）腹腔内注射。在实验后

2、第 4、6、8 周时，分别处死对照组大鼠 6 只、模型组大鼠 8 只、非诺贝特组大鼠 8 只，迅速完整游离出肝脏，取肝左叶同一部位约 1cm×1cm×1cm组织，置于 10%甲醛溶液固定待病理切片。石蜡包埋处理后，一部分常规切片后 HE染色，观察肝脏脂肪变性及炎症程度；另一部分行 TUNEL染色，观察肝细胞凋亡程度；以及行免疫组织化学法，检测肝组织中 Bcl-2 、Bax、Caspase-3 蛋白表达情况。 另取肝组织 100mg左右放入EP管内，立即投入液氮中， 后保存于 -80 冰箱内，用于检测肝组织中PPAR-、Bcl-2 、Bax、Caspase-3mRNA的表达情

3、况。结果：4 周末，与 C组大鼠相比： M组大鼠肝细胞呈轻度脂肪变及气球样变，以小泡性脂肪变为主；炎症活动度计分显著升高（1.62 ±±0.00 ，P 0.01 ）；肝细胞凋亡指数升高（ 58.86 ±± 3.99 ，P 0.05 ）；肝组织 PPAR- mRNA和 Bcl-2mRNA的表达量均显著降低（ 0.366 ±±0.061 和 0.234 ±±0.053 ，均 P0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著升高（ 0.368 ±±0.052 和 0.363

4、77;± 0.031 ；均 P 0.01 ）；肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著下降（ 0.0098 ±±0.0004 ，P0.01 ）； Bax 和 Caspase-3 蛋白表达显著升高（ 0.1311 ±±0.0139 和 0.1297 ±±0.0038 ；均P0.01 ）。与 M组大鼠比较，F 组大鼠肝细胞凋亡指数降低 （43.92 ±± 13.59 ，P0.05 ）；肝组织 PPAR- mRNA和 Bcl-2mRNA的表达量均显著升高（ 0.510 ±±0.068 和 0.42

5、5 ±±0.099 ，均 P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著下降（ 0.249 ±±0.064 和0.226 ±±0.058 ，均 P0.01 ）；肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著升高（ 0.0148 ±± 0.0002 ，P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3 蛋白表达显著下降（ 0.0966 ±± 0.0050 和 0.0911 ±±0.0065 ； P 均 0.01 ）。6 周末，与 C组大鼠相比： M组大鼠肝细胞呈轻至重

6、度脂肪变，胞浆中出现大小不等的脂滴空泡， 将细胞核挤向一侧， 细胞核分布不均匀； 肝组织炎症活动度计分显著升高 （ 3.62 ±±0.00 ，P0.01 ）；肝细胞凋亡指数显著升高（74.07 ±± 11.38 ，P 0.01 ）；肝组织 PPAR- mRNA和 Bcl-2mRNA的表达量均显著降低（ 0.256 ±±0.098 和 0.249 ±± 0.065 ，均 P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著升高（ 0.449 ±± 0.054 和 0.446 &#

7、177;± 0.054 ，均 P 0.01 ）。肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著下降（0.0084 ±± 0.0005 ，P0.01 ）；Bax和 Caspase-3 蛋白表达显著升高（ 0.2331 ±± 0.0056 和 0.1680±±0.0063 ；均 P0.01 ）。F 组大鼠肝组织炎症活动度计分显著升高（3.12 ±±0.00 ，P0.01 ）。与 M组大鼠比较， F 组大鼠肝细胞凋亡指数显著降低（51.38 ±± 3.88 ，P0.01 ）；肝组织 PPAR- mRNA

8、和 Bcl-2mRNA的表达量均显著升高（ 0.426 ±±0.078 和 0.376 ±±0.036 ，均 P0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著下降0.290 ±± 0.097 和 0.291 ±± 0.043 ，均 P 0.01 ）；肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著升高（0.0162 ±± 0.0011 ，P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3蛋白表达显著下降（ 0.1081 ±±0.0230 和 0.1037 ±&#

9、177;0.0081 ； P 均 0.01 ）。8 周末，与 C组大鼠相比： M组大鼠肝细胞广泛肿胀，呈气球样变，可见中至重度脂肪变， 以大泡性脂肪变性为主的混合性脂肪变性；肝组织炎症活动度计分显著升高（ 5.12 ±±0.00 ，P0.01 ）；肝细胞凋亡指数显著升高（ 85.10 ±± 4.45 ， P 0.01 ）；肝组织 PPAR- mRNA和 Bcl-2mRNA的表达量均显著降低（ 0.201 ±±0.06 和 0.209 ±±0.084 ，均 P0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达

10、量均显著升高（ 0.486 ±± 0.039 和 0.521 ±± 0.053 ，均 P 0.01 ）；肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著下降（0.0053 ±± 0.0012 ，P0.01 ）；Bax和 Caspase-3 蛋白表达显著升高（ 0.2817 ±± 0.0114 和 0.2288± ±0.0027 ；均 P 0.01 ）。F 组大鼠肝组织炎症活动度计分显著升高（ 3.25 ±±0.00 ，P0.01 ）；肝细胞凋亡指数升高（ 62.14 ±±

11、;4.45 ， P 0.05 ）；PPAR- mRNA的表达量显著降低（ 0.381 ±± 0.065 ，P0.01 ）； Bcl-2mRNA表达量显著下降（ 0.359 ±± 0.084 ， P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著升高（ 0.354 ±±0.039 和 0.395 ±±0.053 ，均 P 0.01 ）；与 M组大鼠比较，F 组大鼠肝组织炎症活动度计分降低 （ 3.25 ±±1.64 ，P0.05 ）；肝细胞凋亡指数显著降低（62.14 

12、7;± 3.54 ， P 0.01 ）；肝组织 PPAR- mRNA和 Bcl-2mRNA的表达量均显著升高（0.381 ±± 0.035 和 0.359 ±± 0.080 ，均 P 0.01 ）；Bax 和 Caspase-3mRNA的表达量均显著下降（ 0.354 ±±0.061 和 0.395 ±± 0.080 ，均 P 0.01 ）；肝组织中 Bcl-2 蛋白表达显著升高（ 0.0173 ±±0.0002 ，P0.01 ）； Bax 和 Caspase-3 蛋白表达显著下降（ 0.1147 ±±0.01