生化系统有效性资料教学文稿

1、生化系统有效性资料 技术规范 管理到位 质量达标 传统的临床检验，包括生化检验多是手传统的临床检验，包括生化检验多是手工劳动。工劳动。 要求技术人员要求技术人员: : 技能娴熟的，技能娴熟的， 操作专注，操作专注， 劳动强度大，劳动强度大， 工作效率低，工作效率低， 操作结果存在明显的个人差异操作结果存在明显的个人差异, , 可比性和质量受到影响。可比性和质量受到影响。 不适应临床医学的发展。不适应临床医学的发展。 自动检测起源于二十世纪的自动检测起源于二十世纪的80年代，年代， 西方发达国家和日本西方发达国家和日本 电子学电子学 光学光学 机器人机器人全自动自动化的进程全自动自动化的进程 计

2、算机和网络技术计算机和网络技术 生物技术生物技术 酶和蛋白质纯化酶和蛋白质纯化 抗体制备，特别是单克隆抗体的制备抗体制备，特别是单克隆抗体的制备 加速了加速了我国我国 80年代：引进自动生化分析仪，年代：引进自动生化分析仪， 90年代：引进自动免疫分析仪年代：引进自动免疫分析仪 全自动血球计数仪全自动血球计数仪 尿液自动分析仪尿液自动分析仪 微生物培养与鉴定微生物培养与鉴定 新千年：自主研发出自动生化分析仪新千年：自主研发出自动生化分析仪 血球计数仪血球计数仪自动化遍及到医学检验的所有领域自动化遍及到医学检验的所有领域 如核酸的提取如核酸的提取 酶联免疫自动加样酶联免疫自动加样 流水线流水线

3、根据自动程度根据自动程度生化分析仪生化分析仪 半自动生化分析仪半自动生化分析仪 全自动生化分析仪全自动生化分析仪 第一部分第一部分 半自动生化分析半自动生化分析（一）主要技术指标（一）主要技术指标分析过程中的部分操作：分析过程中的部分操作：加样加样加试剂加试剂 手工完成手工完成混匀混匀吸入吸入 比色比色孵育孵育 自动完成自动完成结果计算结果计算 半自动生化分析仪半自动生化分析仪 特点特点 体积小体积小 结构简单结构简单 操作方便操作方便 普通检查普通检查 （特种蛋白检测有困难）（特种蛋白检测有困难） 适合诊所适合诊所 吸吸样样废废液液蠕蠕动动泵泵 比比 色：石英卤素灯；色：石英卤素灯；0.00

4、1Abs 比比例例泵泵Peltier控温控温反应液（吸液量）：反应液（吸液量）：500l左右左右微量流动比色池：数十微升微量流动比色池：数十微升恒温器在数秒内使反应平衡到要求的温度恒温器在数秒内使反应平衡到要求的温度温度波动应：小于温度波动应：小于0.1结果：结果： 由显示窗显示由显示窗显示 打印打印 通过接口将数据输出通过接口将数据输出测定方法：测定方法： 动力学动力学 两点法两点法 终点法检测终点法检测编排项目：编排项目： 30- -100（二）使用注意（二）使用注意事项事项 1.仪器稳定：仪器稳定： 电压，温度，湿度电压，温度，湿度 2.规定的清洗液清洗管道规定的清洗液清洗管道 实验间隔

5、，管道用实验间隔，管道用一般情况：去离子水清洗一般情况：去离子水清洗 碱性液清洗碱性液清洗 去离子水清洗去离子水清洗特殊情况：去离子水清洗特殊情况：去离子水清洗 酸性液清洗酸性液清洗 去离子水清洗去离子水清洗 3.3.* *基于一级反应的动力学法测定项目基于一级反应的动力学法测定项目 要严格掌握要严格掌握启动反应即刻和吸样并开始记录吸光度的时间启动反应即刻和吸样并开始记录吸光度的时间* *基于零级反应的动力学法测定项目基于零级反应的动力学法测定项目 （酶催化活性浓度）（酶催化活性浓度）控制控制启动反应和吸样并开始记录吸光度的时间启动反应和吸样并开始记录吸光度的时间不能擅自缩短延迟时间不能擅自缩

6、短延迟时间*终点法测定终点法测定注意到：显色产物放置时间对测定具有影响注意到：显色产物放置时间对测定具有影响*动力学测定法动力学测定法 代谢物代谢物 连续监测法连续监测法 酶活力浓度酶活力浓度 注意到：在测定的延迟期内底物消耗注意到：在测定的延迟期内底物消耗 温度控制温度控制 光源光源 比色杯比色杯 检测器检测器 数据处理数据处理 打印输出打印输出 定量注加系统定量注加系统 样本样本 试剂试剂取样、加试剂、混合、孵育反应、检测、结果计算、清洗取样、加试剂、混合、孵育反应、检测、结果计算、清洗由仪器自动完成由仪器自动完成 二、二、全自动生化分析仪全自动生化分析仪连续流动式（管道式）连续流动式（管

7、道式）离心式离心式分立式分立式干式干式 分立式生化分析仪分立式生化分析仪 仪器机械手向分立的比色皿中自动定量注加样仪器机械手向分立的比色皿中自动定量注加样本和试剂，一定温度下孵育反应分别进行比色本和试剂，一定温度下孵育反应分别进行比色测定。测定。 “顺序分析顺序分析” 离心式自动生化分析仪离心式自动生化分析仪 结构特点结构特点: : 化学反应器装在离心机的转子位置上化学反应器装在离心机的转子位置上 仪器机械臂自动将样品和试剂分别置于转头中仪器机械臂自动将样品和试剂分别置于转头中 的样品槽和试剂槽中。的样品槽和试剂槽中。 离心机开动后圆盘内的样品和试剂受离心力的离心机开动后圆盘内的样品和试剂受离

8、心力的 作用流入盘外比色槽中，混合发生反应，通过作用流入盘外比色槽中，混合发生反应，通过 比色计进行检测。比色计进行检测。分析特点分析特点: :基于基于“同步分析同步分析”的原理而设计的原理而设计 不是随机任选式不是随机任选式, ,按项目顺序分析按项目顺序分析比色杯必须人工清洗比色杯必须人工清洗水平测光和垂直测光两种方式水平测光和垂直测光两种方式 A=ECL A=EC(TV/S)A=ECL A=EC(TV/S) 干化学生化分析仪干化学生化分析仪反应在固相载体上，反应在固相载体上，测定的是折射光测定的是折射光检测系统进行检测的一类仪器检测系统进行检测的一类仪器分为全自动、半自动生化分析仪分为全自

9、动、半自动生化分析仪检测项目：检测项目： 普通临床生物化学检验普通临床生物化学检验 药物检测药物检测 蛋白测定蛋白测定 第二部分第二部分 自动生化分析自动生化分析第二部分第二部分 自动生化分析仪自动生化分析仪主要结构主要结构1.1.样品装载装置样品装载装置 样品盘样品盘 弧弧 样品架样品架 直直 2.2.输送装置输送装置-传送带传送带靠步进马达驱动靠步进马达驱动将试管架依次前移将试管架依次前移再单架逐管横移至固定位置再单架逐管横移至固定位置样品分配臂采样样品分配臂采样 3.3.取样单元取样单元 组成：组成：取样针取样针取样臂取样臂取样注射器取样注射器前进马达前进马达采样针结构特点：采样针结构特

10、点：针的前端有液面传感器针的前端有液面传感器 防止空吸或深入采血管下层的凝血块防止空吸或深入采血管下层的凝血块 采样单元的故障高采样单元的故障高主要原因主要原因 血样血样 表面有气泡表面有气泡 未完全凝固就进行测定未完全凝固就进行测定 极易导致加样针阻塞极易导致加样针阻塞 此样本的测定值也假性降低；此样本的测定值也假性降低；加样针偏离正确位置加样针偏离正确位置 应经常注意观察应经常注意观察样品杯或样品管口径小样品杯或样品管口径小 样品管过细样品管过细 取样针扎偏：破坏采样装置取样针扎偏：破坏采样装置4.4.注加试剂单元注加试剂单元 组成：组成：试剂针试剂针试剂瓶和试剂仓试剂瓶和试剂仓试剂臂试剂

11、臂取试剂注射器取试剂注射器前进马达构前进马达构试剂取样针试剂取样针前端有液面传感器：防止空吸或针尖深入试剂前端有液面传感器：防止空吸或针尖深入试剂盒底部引起试剂针外壁液体挂淋。盒底部引起试剂针外壁液体挂淋。双试剂有第一试剂和第二试剂取样单元。双试剂有第一试剂和第二试剂取样单元。很多试剂内具有表面活性物质，操作不当，如很多试剂内具有表面活性物质，操作不当，如震荡试剂瓶，或加试剂的速度过快，试剂表面会震荡试剂瓶，或加试剂的速度过快，试剂表面会有气泡，此时试剂取样针前端的液面传感器也会有气泡，此时试剂取样针前端的液面传感器也会误以为取到样品，致使测定结果的偏差。误以为取到样品，致使测定结果的偏差。试

12、剂瓶试剂瓶形状及大小规格不同形状及大小规格不同应根据工作量考虑试剂规格应根据工作量考虑试剂规格残留试剂反复使用会影响结果的准确性残留试剂反复使用会影响结果的准确性要考虑试剂开盖后在使用过程中的稳定性要考虑试剂开盖后在使用过程中的稳定性不要在运行中添加、更换试剂不要在运行中添加、更换试剂封闭系统使用的试剂具有条形码封闭系统使用的试剂具有条形码 仪器设有条形码检查系统，对试剂的种类、仪器设有条形码检查系统，对试剂的种类、批号、规格、有效期等资料，进行核对校验批号、规格、有效期等资料，进行核对校验* *注意事项：注意事项：加样臂和试剂臂的活动区不可放置任何物加样臂和试剂臂的活动区不可放置任何物 品品

13、仪器在运行过程中不可用手调整任何部件，仪器在运行过程中不可用手调整任何部件， 以免发生穿刺伤以免发生穿刺伤 样品和试剂的定量注加系统需要定期校正样品和试剂的定量注加系统需要定期校正5.5.反应单元反应单元组成：组成：反应盘反应盘 混合装置混合装置 温控装置温控装置 反应盘反应盘多为转盘式多为转盘式按固定程序转动按固定程序转动反应和检测同在比色杯中进行反应和检测同在比色杯中进行比色杯：石英玻璃比色杯：石英玻璃 无紫外光吸收的塑料无紫外光吸收的塑料混合装置混合装置 搅拌棒搅拌棒 搅拌棒具特氟隆不沾涂层搅拌棒具特氟隆不沾涂层 超声波超声波6.6.孵育反应温控装置孵育反应温控装置孵育温度的调控和恒定由

14、计算机控制孵育温度的调控和恒定由计算机控制理想的孵育温度波动应小于理想的孵育温度波动应小于0.10.1 应该定期检测应该定期检测（水浴装置的控温性能可自行检测，采用国（水浴装置的控温性能可自行检测，采用国家计量院校准的温度计测定水温）家计量院校准的温度计测定水温）保持恒温的方式有三种保持恒温的方式有三种空气浴恒温：空气浴恒温： 在比色杯与加热器之间隔有空气。空在比色杯与加热器之间隔有空气。空气浴恒温的特点是方便、速度快、不需要气浴恒温的特点是方便、速度快、不需要特殊材料，但稳定性和均匀性与各厂家的特殊材料，但稳定性和均匀性与各厂家的设计有关。设计有关。水浴循环恒温式水浴循环恒温式 在比色杯周围

15、充盈有在比色杯周围充盈有水，加热器控制水的温度。水，加热器控制水的温度。水浴恒热的特点是温度恒水浴恒热的特点是温度恒定，但需特殊的防腐剂以定，但需特殊的防腐剂以保证水质的洁净，且要定保证水质的洁净，且要定期更换循环水。期更换循环水。恒温液循环间接加热式恒温液循环间接加热式 比色杯周围流动着一种特殊的恒温液比色杯周围流动着一种特殊的恒温液（具无味、无污染、惰性、不蒸发等特（具无味、无污染、惰性、不蒸发等特点）。比色杯和恒温液之间有极小的空气点）。比色杯和恒温液之间有极小的空气狭缝，恒温液通过加热狭缝的空气达到恒狭缝，恒温液通过加热狭缝的空气达到恒温。与水浴式循环式相比不需要特殊保养温。与水浴式循

16、环式相比不需要特殊保养。7.7.清洗系统清洗系统探针和搅拌棒采用激流式或瀑布式等方式探针和搅拌棒采用激流式或瀑布式等方式自动冲洗。自动冲洗。比色杯清洗装置比色杯清洗装置 吸液针吸液针 吐液针吐液针 擦拭刷擦拭刷 吸去杯壁上挂淋的水，吸去杯壁上挂淋的水， 刷体内部有负压抽吸装置刷体内部有负压抽吸装置 注意擦拭刷是否磨损注意擦拭刷是否磨损清洗工作流程清洗工作流程吸出反应液（吸干）吸出反应液（吸干）注入洗液（吸干）注入洗液（吸干） 碱性液冲洗碱性液冲洗 酸性液冲洗酸性液冲洗 去离子水冲洗三遍去离子水冲洗三遍擦干擦干应用生化分析仪的重要注意事项：应用生化分析仪的重要注意事项：启用前：启用前： 正确安装

17、、调试正确安装、调试 检测方法学的验证检测方法学的验证 携带和交叉污染试验及纠正携带和交叉污染试验及纠正启用后：启用后： 正确使用、维护和保养正确使用、维护和保养 质量控制质量控制携带（交叉）污染携带（交叉）污染 测试项目测试项目 A A试剂残留（试剂针、搅拌棒、比色杯）试剂残留（试剂针、搅拌棒、比色杯） 干扰下一个测试干扰下一个测试 B B样本样本1(1(高浓度高浓度) )项目项目样本针样本针( (携带携带) )污染污染干扰样本干扰样本2 2测定测定引发交叉污染的原因引发交叉污染的原因共有化共有化 ( (试剂试剂/ /样本针样本针/ /搅拌搅拌) )处理能力提高处理能力提高( ( 牺牲冲洗的

18、强度和时间为代价牺牲冲洗的强度和时间为代价) )使用使用/ /维护不当维护不当 污垢积聚污垢积聚 冲洗力低下冲洗力低下( (仪器仪器/ /配件老化配件老化/ /欠维护欠维护) )测定次序不当测定次序不当冲洗方式安排不当冲洗方式安排不当试剂组成试剂组成样本携带交叉污染样本携带交叉污染平均值平均值A平均值平均值B213579116421 2224262818314681115171020232527121929试剂携带交叉污染试剂携带交叉污染 AmylaseAmylase试剂试剂 钙钙 ALPALP试剂试剂 镁镁 镁试剂镁试剂 铁铁 含磷酸盐的缓冲液含磷酸盐的缓冲液 磷磷 胆固醇试剂胆固醇试剂 胆

19、汁酸胆汁酸 基于基于TrinderTrinder反应反应 基于基于TrinderTrinder反应反应 高含量测定项目高含量测定项目(Glu) (Glu) 高含量测定项目高含量测定项目(Ua)(Ua) 试剂厂家应提供特定仪器试剂厂家应提供特定仪器, ,一定试剂排序后一定试剂排序后, ,测定交叉污染测定交叉污染; ; 实验室的试剂排位与试剂厂家推荐的不同实验室的试剂排位与试剂厂家推荐的不同, ,或或试剂生产企业未能够提供试剂交叉污染试验结试剂生产企业未能够提供试剂交叉污染试验结果果, ,应该自己应该自己, ,或请有经验的技术支持做交叉污或请有经验的技术支持做交叉污染试验染试验; ; , ,杯空白

20、升高，杯间差变大杯空白升高，杯间差变大残留成分对下一分析的影响残留成分对下一分析的影响第第1循环循环全部项目全部项目第第2、3、4、5循循环受干扰项目环受干扰项目较大的偶然误差较大的偶然误差, ,一般是由一般是由于于残留成分的影响残留成分的影响8 8比色系统比色系统(1)(1)光源光源 卤素灯卤素灯, ,波长波长:325:325800nm800nm氙灯氙灯, ,波长波长: 285: 285750 nm 750 nm 寿命长寿命长发光强度不够时，仪器会自动报警，应及时更换发光强度不够时，仪器会自动报警，应及时更换 （2 2）比色杯）比色杯 比色杯也是反应杯比色杯也是反应杯 光径光径0.5-0.7

21、cm0.5-0.7cm 材料：石英、硬质玻璃或优质塑料材料：石英、硬质玻璃或优质塑料 要定期检查清洗要定期检查清洗 及时更换不合格的比色杯及时更换不合格的比色杯（3 3） 单色器单色器 各类自动生化分析仪应用的是可见各类自动生化分析仪应用的是可见- -紫外吸收光谱法，即监测紫外吸收光谱法，即监测200200700nm700nm光区光区某特定波长下发色基团吸光度的变化，辅某特定波长下发色基团吸光度的变化，辅以微机软件系统的计算来完成测定以微机软件系统的计算来完成测定 可见可见- -紫外吸收光谱定量的基础是紫外吸收光谱定量的基础是Lamber-BeerLamber-Beer定律。该定律说明的是一定

22、律。该定律说明的是一定浓度范围内吸光物质对单色光吸收的定浓度范围内吸光物质对单色光吸收的强弱与该物质的浓度之间的关系强弱与该物质的浓度之间的关系 A=-lgT=ECLA=-lgT=ECL 传统的分光光度测定：传统的分光光度测定： 前分光前分光 在光源灯和样品杯之间先要用滤在光源灯和样品杯之间先要用滤光片、棱镜或光栅分光，通过可调的光片、棱镜或光栅分光，通过可调的狭缝，取得与样品狭缝，取得与样品“互补互补”的单色光的单色光之后，照射到样品杯，再用光电池或之后，照射到样品杯，再用光电池或光电管作为检测器，测定样量对单色光电管作为检测器，测定样量对单色光的吸收量光的吸收量 现代大多生化分析仪采用：现

23、代大多生化分析仪采用： 后分光测量技术后分光测量技术 将一束白光（混合光）先照到样品杯，将一束白光（混合光）先照到样品杯，然后再用光栅分光，同时用一列发光二极管然后再用光栅分光，同时用一列发光二极管排在光栅后面作为检测器。排在光栅后面作为检测器。 后分光的优点：后分光的优点： 是不需移动仪器比色系统中的任何部件，是不需移动仪器比色系统中的任何部件，可同时选用双波长进行测定，这样可降低比可同时选用双波长进行测定，这样可降低比色的噪声，提高分析的精确度。色的噪声，提高分析的精确度。 单色器（分光装置）：单色器（分光装置）：滤光片滤光片光栅光栅光栅光栅全息反射式全息反射式 玻璃上覆盖一层金属膜后制成

24、，玻璃上覆盖一层金属膜后制成， 有一定程度的相差，易被腐蚀有一定程度的相差，易被腐蚀蚀刻式凹面蚀刻式凹面 所选波长固定地刻制在凹面玻璃上，所选波长固定地刻制在凹面玻璃上， 耐磨损、抗腐蚀、无相差耐磨损、抗腐蚀、无相差9.9.样本条形码识读系统样本条形码识读系统 样本的唯一标识清楚样本的唯一标识清楚 记录样本采集时间记录样本采集时间 记录样本接收时间记录样本接收时间 减少劳动强度减少劳动强度 自动化的要求自动化的要求 依赖依赖HISHIS的建设（医生工作站）的建设（医生工作站）急診看診門診看診 準備採血試管下醫囑令急診掛號處門診掛號處下醫囑令批價收費上傳檢驗報告值下載醫囑令下醫囑令批價收費病房看

25、診查詢檢驗報告查詢檢驗報告查詢檢驗報告急診採血 準備採血試管中央採血室(採血)病房採血 準備採血試管 送病房条形码识读系统：条形码识读系统：扫描系统扫描系统信号整形信号整形译码器译码器 以光源扫射黑条以光源扫射黑条/ /白空相间的条码符号白空相间的条码符号 （一维条码）（一维条码） 由于黑条由于黑条/ /白空对光的反射不同白空对光的反射不同 不同宽窄的条符反射光持续时间不同不同宽窄的条符反射光持续时间不同 产生强度不同的反射光产生强度不同的反射光 经光电转换元件接收并转换成相应强度的电信号经光电转换元件接收并转换成相应强度的电信号 最后通过信号整形，由译码器翻译最后通过信号整形，由译码器翻译用

26、于手工粘贴的普通条码贴完条码的试管 All-in-one 的概念条形码格式与参数条形码格式与参数初步规划：大小大小直直/横式横式参数内容：参数内容：姓名姓名病历号码病历号码 性别性别年龄年龄申请科别申请科别病房病房 优先优先*申请单号申请单号样本种类样本种类 抽血量抽血量日期时间日期时间注意事项注意事项 检验组别检验组别管别索引管别索引抗凝剂抗凝剂 保存期限保存期限 条形码提供的信息条形码提供的信息临床实验室工作流程与自动化CentrifugeDecappingAliquottingReceptionlabelingSample sorting生物化学免疫学免疫学物理连接多个分析仪的系统朴素朴

27、素功能最大集成化的、模块组合方式的连接系统（分析仪是一个模块）发展发展生化分析模块组生化分析模块组物理物理连接连接多个多个分析仪的系统分析仪的系统前处理功能最大集成化前处理功能最大集成化的、的、模块组合模块组合方式的、方式的、物理连接系统（分析仪物理连接系统（分析仪是一个模块）是一个模块）模块组合方式模块组合方式非在线分析仪方式非在线分析仪方式第三部分第三部分 全自动生化分析仪安装准备全自动生化分析仪安装准备1. 1. 自动生化分析仪工作环境的要求自动生化分析仪工作环境的要求仪器工作空间仪器工作空间实验室面积足够大，以保证仪器的操作、保养、维修实验室面积足够大，以保证仪器的操作、保养、维修的方

28、便及各种配套设施（如纯水机、的方便及各种配套设施（如纯水机、UPSUPS不间断电源）不间断电源）电脑控制设备的安置。电脑控制设备的安置。 仪器工作条件仪器工作条件没有阳光直接照射没有阳光直接照射灰尘非常少灰尘非常少平坦没有震动平坦没有震动地板承重为仪器重量的地板承重为仪器重量的130%-140%130%-140%接地接地电压波动电压波动10%10%避免：化学腐蚀物品避免：化学腐蚀物品 灰尘灰尘 电磁辐射电磁辐射 温度和湿度温度和湿度 温度应控制在温度应控制在18183030，工作时波动，工作时波动小于小于22，部分仪器内设置了允许温度范，部分仪器内设置了允许温度范围，当温度超过允许范围时仪器自

29、动停止围，当温度超过允许范围时仪器自动停止检测。检测。 湿度有严格要求，湿度过高可能引起湿度有严格要求，湿度过高可能引起仪器部件的生锈发霉等情况降低使用寿命仪器部件的生锈发霉等情况降低使用寿命或仪器不工作，过于干燥则可能引起静电或仪器不工作，过于干燥则可能引起静电增加，灰尘吸附增加而干扰光路系统的稳增加，灰尘吸附增加而干扰光路系统的稳定性。定性。电源的要求电源的要求 应根据仪器对电源的要求和总负载量应根据仪器对电源的要求和总负载量设计专用电路设计专用电路 要求始终连接符合要求的地线要求始终连接符合要求的地线并连接并连接UPSUPS不间断电源（最好延时不间断电源（最好延时3030分钟以上）。分钟

30、以上）。 不正常状态（如停电等）下的关机有不正常状态（如停电等）下的关机有可能降低仪器的使用寿命和测定数据的丢可能降低仪器的使用寿命和测定数据的丢失。失。 2. 2.自动生化分析仪的用水及处理自动生化分析仪的用水及处理 临床检验中必须使用纯水配置试剂和临床检验中必须使用纯水配置试剂和淋洗容器，完善的纯水或精制水的来源才淋洗容器，完善的纯水或精制水的来源才能获得良好的实验结果。能获得良好的实验结果。 蒸馏水蒸馏水 蒸馏法是最早使用的纯化水的方法，也是蒸馏法是最早使用的纯化水的方法，也是普遍使用的方法普遍使用的方法, ,但不是纯化水的理想方法。但不是纯化水的理想方法。这是因为用大蒸馏器制成的蒸馏水

31、重金属、无这是因为用大蒸馏器制成的蒸馏水重金属、无机物、悬浮物和微生物的污染较多，机物、悬浮物和微生物的污染较多，COCO2 2不能不能去除。去除。 蒸馏水的物理化学检查见中国药典二部。蒸馏水的物理化学检查见中国药典二部。去离子水去离子水 原水通过阳离子交换柱时，原水中阳离子与柱中阴原水通过阳离子交换柱时，原水中阳离子与柱中阴离子基团结合，氢离子被置换出来，当经阳离子树脂离子基团结合，氢离子被置换出来，当经阳离子树脂处理过的水流过阴离子交换柱时，水中阴离子滞留在处理过的水流过阴离子交换柱时，水中阴离子滞留在柱中，柱中氢氧根被置换出来，后者与柱中，柱中氢氧根被置换出来，后者与H H反应生成水。反

32、应生成水。 RH + MRH + M+ + RM +H RM +H （阳离子交换柱）（阳离子交换柱） ROH + XROH + X RX + OHRX + OH （阴离子交换柱）（阴离子交换柱） H H+ + + OH + OH H H2 2O O离子交换树脂具一定寿命，使用期限与水中离子交换树脂具一定寿命，使用期限与水中 所含杂质量有关。所含杂质量有关。经过阴阳离子交换树脂后的水应不含任何离经过阴阳离子交换树脂后的水应不含任何离 子，电阻可达子，电阻可达18M/CM(25)18M/CM(25)，柱效高，电，柱效高，电 阻也大。阻也大。随着使用时间的延长，纯化水的电阻减少，随着使用时间的延长，

33、纯化水的电阻减少， 当下降到一定范围（生化用水应当下降到一定范围（生化用水应0.5 0.5 M/CM M/CM），应更换离子交换柱。），应更换离子交换柱。 目前多用混合式离子交换树脂柱来纯化目前多用混合式离子交换树脂柱来纯化水，即在柱内装有阳离子和阴离子交换水，即在柱内装有阳离子和阴离子交换树脂的混合物。水通过混合床时逐步自树脂的混合物。水通过混合床时逐步自动去除阴、阳离子。动去除阴、阳离子。离子交换树脂不能去除水中非电离状态离子交换树脂不能去除水中非电离状态的有机物，悬浮颗粒和微生物。的有机物，悬浮颗粒和微生物。离子交换树脂纯化水的方法不应单独应离子交换树脂纯化水的方法不应单独应用，而应放在

34、经蒸馏或反渗透装备后面用，而应放在经蒸馏或反渗透装备后面处理经其初步纯化过的水，以延长交换处理经其初步纯化过的水，以延长交换柱的寿命。柱的寿命。反渗透水反渗透水 反渗透是用加压的方法使水渗透过极微反渗透是用加压的方法使水渗透过极微 小的渗透膜小的渗透膜 反渗透膜的孔径约为反渗透膜的孔径约为0.001m0.001m，较细菌，较细菌 （0.40.41m1m），病毒），病毒(0.02(0.020.4m)0.4m)要小要小 可过滤可过滤95%95%以上的溶解和非溶解的无机物、以上的溶解和非溶解的无机物、 重金属、细菌、病毒颗粒；重金属、细菌、病毒颗粒； 装置多放在离子交换柱前，为后者提供初装置多放在离

35、子交换柱前，为后者提供初 级纯水。级纯水。4.4.纯水系统纯水系统-超纯水的制备超纯水的制备国产纯水系统可替代国外产品国产纯水系统可替代国外产品纯水系统基本组成：纯水系统基本组成：聚酯纤维过滤柱聚酯纤维过滤柱5m5m活性碳过滤匣活性碳过滤匣 去除有机物去除有机物反渗透器反渗透器 多级混合离子交换床多级混合离子交换床悬浮粒子膜过滤单元悬浮粒子膜过滤单元0.22m0.22m反渗透反渗透- -离子交换纯水制备系统工作流程示意图离子交换纯水制备系统工作流程示意图目前，对于生化分析仪用水尚无行业标准。目前，对于生化分析仪用水尚无行业标准。但一般可从电阻或电导率、氯离子含量、但一般可从电阻或电导率、氯离子

36、含量、不挥发物、悬浮物和微生物、有机物几个不挥发物、悬浮物和微生物、有机物几个方面来检测水的质量。检查方法参照中国方面来检测水的质量。检查方法参照中国药典。药典。临床化学实验室主张用水超纯水，以保证临床化学实验室主张用水超纯水，以保证实验结果的准确性和仪器的正常运转。实验结果的准确性和仪器的正常运转。 纯水机技术指标：纯水机技术指标：采用单片机控制，在线检测超纯水水采用单片机控制，在线检测超纯水水质质当水质低于要求时，水质报警器可自动当水质低于要求时，水质报警器可自动报警，提示用户更换超纯水柱报警，提示用户更换超纯水柱高水位自动关机高水位自动关机低水位自动开机低水位自动开机自动监测进水端压力。

37、当水压不够时，自动监测进水端压力。当水压不够时，主机高压泵自动停止工作，避免高压泵空主机高压泵自动停止工作，避免高压泵空转影响工作转影响工作 进水压要求0.2Mpa反渗透膜自动冲洗反渗透膜自动冲洗在线监测反渗透水电导率，以提示在线监测反渗透水电导率，以提示用户及时更换反渗透膜用户及时更换反渗透膜水质：水质：18.318.31 M/CM1 M/CM，2525产水量：产水量：4040140L/h140L/h进水水源：自来水进水水源：自来水电阻率仪量程电阻率仪量程0 020 M/CM20 M/CM，分辨率，分辨率0.1 0.1 M/CMM/CM第四部分第四部分 全自动生化分析仪分析参数设置全自动生化

38、分析仪分析参数设置 生化分析仪的参数即仪器工作的生化分析仪的参数即仪器工作的指令，操作者通过参数控制仪器完成指令，操作者通过参数控制仪器完成一系列复杂而有序的操作程序。一系列复杂而有序的操作程序。 参数种类很多，有些参数是在生参数种类很多，有些参数是在生产制造中设置好的，如分析仪的一些产制造中设置好的，如分析仪的一些通用操作，取样、冲洗、检测、数据通用操作，取样、冲洗、检测、数据处理等，其程序均已经固化在存储器处理等，其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改，只需选择即可工里，用户不能修改，只需选择即可工作。作。 另外一些参数属于测试项目的另外一些参数属于测试项目的指令，即测定参数指令，即测定

39、参数 在我国目前临床化学常规测定在我国目前临床化学常规测定中，使用的分析系统一般有两种。中，使用的分析系统一般有两种。 一种是使用原厂家提供的试剂、校一种是使用原厂家提供的试剂、校准品和仪器，即所谓的准品和仪器，即所谓的“封闭系统封闭系统”。 这类系统的测定参数固化在仪器中，这类系统的测定参数固化在仪器中，除由于批号改变需要更改校准的定值外，除由于批号改变需要更改校准的定值外，其他测定参数一般勿需更改。其他测定参数一般勿需更改。 商品试剂带有与之配套的校准品，商品试剂带有与之配套的校准品，这类商品试剂规定了不同型号生化分析这类商品试剂规定了不同型号生化分析仪的测定参数，以保证测定结果的量值仪的

40、测定参数，以保证测定结果的量值溯源。溯源。 这一类测定系统称为这一类测定系统称为“开放的配套开放的配套系统系统”。为了保证测定结果的溯源符合。为了保证测定结果的溯源符合试剂出品商的声明，必须严格按照试剂试剂出品商的声明，必须严格按照试剂说明书输入测定参数。说明书输入测定参数。 Why?ISO 15189ISO 15189对检验程序的要求对检验程序的要求正确度(truness) 结果水平公认；结果水平公认； 因手工操作、要求高；因手工操作、要求高； 报告速度；慢无法适用于常规。报告速度；慢无法适用于常规。参考实验室参考实验室参考方法参考方法参考品参考品有资格的人员有资格的人员患者新鲜标本患者新鲜

41、标本具有参考值水平的结果具有参考值水平的结果一级参考品一级参考品参考方法参考方法常用方法常用方法新鲜患者标本新鲜患者标本参考值结果参考值结果常用方法结果常用方法结果标化标化检测检测检测检测获得获得可比性良好可比性良好校准品校准品获得获得校准校准一级参考品一级参考品参考方法参考方法常用方法常用方法新鲜患者标本新鲜患者标本参考值结果参考值结果常用方法结果常用方法结果标化标化检测检测检测检测获得获得可比性良好可比性良好校准品校准品获得获得校准校准校校准准品品试试剂剂 仪仪器器患患者者标标本本检检验验结结果果校校准准按按检检测测程程序序检检测测具具溯溯源源性性和和可可比比性性常规测量常规测量程序程序C

42、DC Approach to TraceabilityHuman Serum Samples Human Serum Samples Reference MethodReference MethodField MethodField MethodAssayAssayPatientPatientSpecimensSpecimensSameSameResultsResults? ?AdjustAdjustCalibrationCalibrationnonoyesyesReferenceReferenceReference methodReference method human sera huma

43、n seraRoutine Routine methodmethodReference standardisation of master calibrator(母校正品定值方案母校正品定值方案 )Routine method with Master-lot calibrator Reference method / material5 human pool sera master calibratorMaster-lot calibrator is mathematically adjustedvia the formula y = ax + b so that slope (a) = 1

44、and intercept (b) = 0Sales calibratorSales calibratorMaster calibratorMaster calibratorRoutine method concentration cRoutine method absorbance AValue assignment in calibrator sales lotsValue assignment in calibrator sales lotsThe sales lots are assigned as unknown samples with the master lot calibra

45、tor on analyzer with the routine method主（母）校准品赋值两条途径主（母）校准品赋值两条途径 使用人混合血清，通过与参考方使用人混合血清，通过与参考方法的方法学比较的间接校准。法的方法学比较的间接校准。 使用一级标准使用一级标准 ( (参考物质参考物质 如如. . NIST)NIST)的直接校准。的直接校准。picture placeholder 用于对商品校准品和控制品的赋值用于对商品校准品和控制品的赋值。 源于常规产品的一个生产批号，与商源于常规产品的一个生产批号，与商品校准品具有相同基质。品校准品具有相同基质。 储存于储存于-80-80稳定约稳定约2

46、 2年。年。工厂母校准品（工厂母校准品（Master CalibratorMaster Calibrator）又：主校准品又：主校准品小结：小结：必须严格按照厂家提出的要求，正确输入测定必须严格按照厂家提出的要求，正确输入测定参数；参数；与特定系统配套的校准品不可用于其它测定系与特定系统配套的校准品不可用于其它测定系统。否则，会影响到测定的准确性。统。否则，会影响到测定的准确性。 测试项目参数有很多，根据功能可以测试项目参数有很多，根据功能可以将其分为三个部分将其分为三个部分 检测参数检测参数 校准参数校准参数 监测性参数监测性参数 一、分析检测参数一、分析检测参数 分析检测参数是指项目分析应

47、具备分析检测参数是指项目分析应具备的基本参数，包括被分析项目：的基本参数，包括被分析项目：名称名称单位单位检测方法检测方法主主/ /副波长副波长反应方向反应方向试剂量和样品量试剂量和样品量反应时间和计时时间反应时间和计时时间1 1被分析项目名称被分析项目名称 项目名称常以项目的英文缩写来表示项目名称常以项目的英文缩写来表示 ALT PchE DBil Ua TBAALT PchE DBil Ua TBA AST Glu TC Urea AST Glu TC Urea ALP HbA1C TG SCr ALP HbA1C TG SCr GGT Alb HDL-C CCr GGT Alb HDL-

48、C CCr LDH TP LDL-C hs-CRP LDH TP LDL-C hs-CRP CK preAlb ApoAI ASO CK preAlb ApoAI ASO Amylase TBil ApoB AF Amylase TBil ApoB AF Ref to Tietz Fundamentals of Clinical Ref to Tietz Fundamentals of Clinical ChemistryChemistry2.2.单位单位(Unit)(Unit) 临床化学检验中的计量单位应为法定计量临床化学检验中的计量单位应为法定计量单位。单位。 离子如钾、钠、氯、总碳酸氢盐

49、以离子如钾、钠、氯、总碳酸氢盐以及含量较大的代谢物如葡萄糖、总胆固及含量较大的代谢物如葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿素、醇、甘油三酯、尿素、L-L-乳酸、乳酸、-羟羟基丁酸的计量单位为基丁酸的计量单位为mmol/L.mmol/L.对于含量相对较低的代谢物，如尿酸、对于含量相对较低的代谢物，如尿酸、胆汁酸等，其计量单位为胆汁酸等，其计量单位为mol/L mol/L 。 19791979年国际生化学会为使酶活性单位与年国际生化学会为使酶活性单位与国际单位制（国际单位制（SI)SI)相一致，规定相一致，规定1 1个催量的个催量的每单位为：规定的条件下，每单位为：规定的条件下，1 1秒钟转化的秒钟转化

50、的1mol1mol底物的酶量。底物的酶量。 酶的计量单位为酶的计量单位为“katalkatal”( (符号符号kat)kat)，含量以含量以Kat/LKat/L表示。由于表示。由于katal/Lkatal/L单位较大，单位较大，临床仍以临床仍以U/LU/L表示，前者转化为后者需乘以表示，前者转化为后者需乘以16.6716.67。1 U : umol/min1kat:mol/s1kat=16.67 U1U=1umol/min =(1/1000)/(1/60) mol/s1kal=(1/60)/(1/1000) U 对于蛋白，包括总蛋白、白蛋对于蛋白，包括总蛋白、白蛋白以及其他体液中的特定蛋白的浓

51、白以及其他体液中的特定蛋白的浓度单位根据含量的大小以度单位根据含量的大小以g/Lg/L或或mg/Lmg/L等单位表示。等单位表示。2. 2. 反应温度选择反应温度选择 IFCCIFCC推荐的酶催化活性浓度测定温推荐的酶催化活性浓度测定温度为度为3737。 临床化学实验室所做其他项目，如临床化学实验室所做其他项目，如血糖、血脂等也都用血糖、血脂等也都用3737测定。测定。 1979 1979年，年，IFCCIFCC制定了酶活性测定的制定了酶活性测定的总则，提出酶测定的条件，如底物浓度、总则，提出酶测定的条件，如底物浓度、pHpH、缓冲液种类和浓度、辅酶和辅因子以及测定缓冲液种类和浓度、辅酶和辅因

52、子以及测定的延滞期、测定酶活性的时间间隔等，应控的延滞期、测定酶活性的时间间隔等，应控制在最适条件下，以保证酶具有最大的催化制在最适条件下，以保证酶具有最大的催化活性。此后其陆续发布了活性。此后其陆续发布了ASTAST、ALTALT、LDHLDH、CKCK、GGTGGT、ALPALP、AMYAMY等酶在等酶在3030测定参考方测定参考方法法; ; IFCC IFCC第一批发布的酶测定参考方第一批发布的酶测定参考方法规定酶反应温度为法规定酶反应温度为3030，是因为金，是因为金属镓的熔点为属镓的熔点为29.929.9容易标化。但在容易标化。但在实际工作中，当室温超过实际工作中，当室温超过2525

53、时，生时，生化分析仪控制酶反应温度有困难。化分析仪控制酶反应温度有困难。 20022002年又重新发布了年又重新发布了3737新的测新的测定参考方法（见表定参考方法（见表1 1）。）。 3. 3. 波长选择波长选择单波长单波长 多选在指示物最大吸收波长处此时检测具有最多选在指示物最大吸收波长处此时检测具有最高的灵敏度和最好的稳定性。高的灵敏度和最好的稳定性。双波长双波长 由于生化分析仪多采用光电二极管阵列由于生化分析仪多采用光电二极管阵列检测，很容易做双波长检测。检测，很容易做双波长检测。 双波长检测的原理是同时检测两个波长双波长检测的原理是同时检测两个波长下的吸光度，即用主波长的吸光度减去副

54、波下的吸光度，即用主波长的吸光度减去副波长的吸光度来计算待测物的含量。长的吸光度来计算待测物的含量。 第二波长，即副波长设置的主要作用来第二波长，即副波长设置的主要作用来补偿发光灯每次闪动给结果造成的差异。补偿发光灯每次闪动给结果造成的差异。副波长的选择原则：副波长的选择原则： 副波长应趋近于主波长，但吸光副波长应趋近于主波长，但吸光度应为度应为“0 0”。 如干扰物（内源性色源，如溶血、如干扰物（内源性色源，如溶血、乳糜）在主波长和副波长处吸收量相乳糜）在主波长和副波长处吸收量相同，那么副波长的设置就可以有效地同，那么副波长的设置就可以有效地减少干扰物造成的偏差。减少干扰物造成的偏差。 副波

55、长如果设置的不合适，会导致实验副波长如果设置的不合适，会导致实验结果出现系统偏差。结果出现系统偏差。 例如，以例如，以NADHNADH为指示物的测定项目，选为指示物的测定项目，选择择340nm340nm为测定波长，副波长应选在为测定波长，副波长应选在400nm400nm左左右合适，如选在右合适，如选在380nm380nm，因为，因为380nm380nm处处NADHNADH具具有吸收，会影响测定结果。染料结合法来测有吸收，会影响测定结果。染料结合法来测定某些物质的含量；定某些物质的含量； 很多染料在可见区就有吸收，此时应观很多染料在可见区就有吸收，此时应观察不同浓度待测物与染料结合后是否有等吸察

56、不同浓度待测物与染料结合后是否有等吸收的波长，如有，则应选择等吸收处作为测收的波长，如有，则应选择等吸收处作为测定的第二波长。定的第二波长。4. 4. 测定方法与读点时间的选择测定方法与读点时间的选择 （1 1）终点法：）终点法： 一定反应条件下一定反应条件下反应达到平衡，反应反应达到平衡，反应液的吸光度不再增加液的吸光度不再增加( (或降低或降低) )，吸光度的，吸光度的增加增加( (或降低或降低) )与被测定物的浓度成正比。与被测定物的浓度成正比。 应用终点法测定的项目有血清总蛋白、应用终点法测定的项目有血清总蛋白、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸、总胆固葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸、总胆

57、固醇、甘油三酯、总胆红素、结合胆红素、高醇、甘油三酯、总胆红素、结合胆红素、高密度脂蛋白密度脂蛋白- -胆固醇、铁、钙、镁等。胆固醇、铁、钙、镁等。 这类测定检测的波长一般都在可见光区，这类测定检测的波长一般都在可见光区，受样本色源的影响小。受样本色源的影响小。 终点测定法是最常用的分析法。优点是终点测定法是最常用的分析法。优点是吸光度信号变化大，吸光度稳定，对孵浴温吸光度信号变化大，吸光度稳定，对孵浴温度的精度、时间等的要求不高，所以重复性度的精度、时间等的要求不高，所以重复性好、精密度高。好、精密度高。 对于用酶作为催化剂来检测代谢物的对于用酶作为催化剂来检测代谢物的测定，反应的级别为一级

58、，反应体系中各测定，反应的级别为一级，反应体系中各组分的含量均较大，反应达到平衡的时间组分的含量均较大，反应达到平衡的时间一般为一般为2-3min2-3min。如反应达到平衡的时间过。如反应达到平衡的时间过长，说明试剂的质量不高或试剂失效。长，说明试剂的质量不高或试剂失效。 对于化学测定方法，反应一般比较迅对于化学测定方法，反应一般比较迅速，一般在反应后速，一般在反应后1-2min1-2min反应就可以达到反应就可以达到平衡。平衡。根据监测读点的不同，终点法还可以分为：根据监测读点的不同，终点法还可以分为：一点终点法：生物样品与相应的试剂在一点终点法：生物样品与相应的试剂在反应系统（反应杯）内

59、充分混合，在一定反应系统（反应杯）内充分混合，在一定温度下，经过一定时间的反应，通过比色温度下，经过一定时间的反应，通过比色系统测得反应平衡后在特定的波长下吸光系统测得反应平衡后在特定的波长下吸光度值，读取的吸光度值由微机系统处理并度值，读取的吸光度值由微机系统处理并计算测定结果。计算测定结果。两点终点法：两点终点法：生物样品与所用双试剂中试剂生物样品与所用双试剂中试剂1 1充分混合，在充分混合，在一定温度下孵浴一定时间时，在特定波长下，一定温度下孵浴一定时间时，在特定波长下，读取吸光度值，然后加入启动反应试剂启动读取吸光度值，然后加入启动反应试剂启动主反应，在反应达到平衡时，第二次读取吸主反

60、应，在反应达到平衡时，第二次读取吸光度值。两次吸光度差值由微机系统处理并光度值。两次吸光度差值由微机系统处理并计算测定结果。计算测定结果。 两点终点法的优点是可以减低样本空白两点终点法的优点是可以减低样本空白对测定的影响。对测定的影响。 但由于第一试剂的组成（如但由于第一试剂的组成（如pHpH等）和第等）和第二试剂不同，所以两点终点法对于内源性色二试剂不同，所以两点终点法对于内源性色原对测定的干扰的排除可能是有限的。要确原对测定的干扰的排除可能是有限的。要确认色原物质对测定影响的程度仍然必须做干认色原物质对测定影响的程度仍然必须做干扰实验。扰实验。 （2 2）一级动力学法：）一级动力学法： 动