4种黄连生物碱的抑菌作用

1、4种黄连生物碱的抑菌作用【摘要】目的小檗碱，药根碱，黄连碱和巴马亭是黄连中4种重要的生物碱，为深化研究4种黄连生物碱身分的抑菌特性差异，本实行对它们的抑菌谱和抑菌活性举行了实行研究。要领以从石柱黄连中提取的4种生物碱为实行药物，接纳抑菌圈实行法，在2000g/L药液浓度下对常见的19种微生物举行了药物敏感性试验,并通过比浊法对敏感菌的最小抑菌浓度I举行了检测。效果4种生物碱身分的敏感菌范畴雷同但抑菌活性差异，此中小檗碱的抑菌活性最大,黄连碱和巴马亭次之，药根碱最小；4种黄连生物碱对革兰氏阳性菌的按捺活性大于革兰氏阴性菌和酵母菌；每种生物碱对耐药金葡菌R和金葡菌的抑菌本领根本雷同。结论4种黄连生

2、物碱均为黄连的抗菌活性身分，抑菌谱雷同，但抑菌活性有较大差异；4种黄连生物碱对耐药金葡菌的耐药性具有消除作用。【关键词】黄连小檗碱药根碱巴马亭黄连碱抑菌Keyrdsptidisrhize;Berberine;Jatrrrhizine;Palatine;ptisine;Antiirbialativity黄连是中医临床上的常见抗菌消炎中药，在临床上除重要用于治疗菌立肠炎、腹泻、胃炎等细菌性胃肠炎疾玻研究表白，黄连中的抗菌消炎的物质底子重要是此中所含的原小檗碱类生物碱身分，而小檗碱，药根碱，黄连碱和巴马亭是黄连中4种重要的生物碱身分，在分子布局特点上均属异喹啉类生物碱,具季铵基团1。为深化研究黄连中

3、差异生物碱身分的抑菌活性差异和拓展黄连生物碱的应用范畴，从石柱黄连中提取了小檗碱、药根碱、黄连碱和巴马亭，以常见的19种动植物病原菌为实行菌举行药物敏感性实行并对敏感菌的最小抑菌浓度I举行检测，以期为扩展小檗碱和别的黄连生物碱的应用范畴和临床用药提供科学根据。1东西实行药物：小檗碱、药根碱、黄连碱和巴马亭由实行室从石柱黄连中提取分散制备，HPL检测纯度均在97%以上。实行菌株：金黄色葡萄球菌(AT25923)，金黄色葡萄球菌耐药菌R，脓肿分枝杆菌，伤寒杆菌，绿脓杆菌，志贺氏痢疾杆菌，克雷伯氏菌，肠炎沙门菌，宏大芽孢杆菌，枯草杆菌，大肠杆菌变形杆菌，白色葡萄球菌，假丝酵母，白色念珠菌，四联球菌，

4、鱼害粘球菌和鱼肠型点状产气单胞菌实行菌株由重庆医科大学底子医学院病原微生物教研室和西南大学资源与环境科学学院微生物教研室提供。造就基：真菌接纳改进沙保氏造就基配方为：卵白胨10g，葡萄糖20g，蒸馏水1000l，鱼病原菌鲑肾杆菌，鱼害粘球菌和鱼肠型点状产气单胞菌接纳胰卵白胨醋酸钠造就基配方：胰卵白胨5.0g，醋酸钠2.0g，酵母膏5.0g，牛肉膏0.2g，蒸馏水1000l，别的细菌接纳平凡细菌造就基加减身分举行造就。配制时固体造就基参加1.5%的琼脂，液体造就基不加。实行装备：96微孔板，酶标仪，超净事情台，灭菌锅，恒温造就箱。2要领2.1微生物敏感性实行将备选的菌种接纳较高浓度的药液举行药物

5、敏感实行，开端确定3种生物碱对实行菌的抑菌作用，为进一步研究药物对敏感菌的抑菌本领提供根据。要领为：药液配制及纸片制备：将每种药液均配制成浓度为2.0g/l的溶液，将直径6.35的纸片浸泡于药液，100/30in灭菌，冷却后置冰箱保存。菌液制备：将实行菌种先接种到歪面活化造就24h,脓肿分枝杆菌造就2d后用灭菌生理盐水洗下，计数后用液体造就基配成108fu/l的菌液。抑菌圈试验：用灭菌后的涂布环将试验菌液匀称涂抹于固体琼脂平板上，每个平板放上3个药物纸片，脓肿分枝杆菌造就2d，别的实行菌造就24h后不雅察，记载抑菌环直经。2.2敏感菌的I定量实行对3种药液举行药物敏感性实行以后，选择敏感的菌种

6、，接纳液体造就基一连稀释法造就后检测每种黄连生物碱对敏感菌的最小抑菌浓度I。18，116，132，164，1128，1256，1512和11024共11个浓度。实行操纵在96微孔板上举行，每试验微孔用移液枪参加液体造就基100l，试验菌液20l，药液120l，混匀后置37造就，脓肿分枝杆菌造就2d，别的实行菌造就24h后不雅察。每个实行3个重复并设立不加实行菌的本底比较120l药液120l液体造就基。接纳酶标仪检测微孔板实行菌的生长环境，检测指标为微孔中造就液体系的光密度D值，检测波长620n。实行微孔的D值减去同浓度的本底比较的D值即为实行微孔的D净值。按照D净值判断药物对该实行菌的I。3效

7、果与讨论3.1药物敏感性实行表1为黄连中4种生物碱对常见19种微生物药物敏感性试验的不雅察效果，从表中可以看出，4种黄连生物碱的敏感菌菌谱除了药根碱以外别的3种根本雷同，从表中数据不难创造，黄连生物碱类对G+菌比对G菌和真菌的作用越发显着。表1黄连生物碱对19种病原菌的药敏实行略3.2黄连生物碱敏感菌的I测定表2为4种黄连生物碱在2000g/l浓度纸片法条件下挑选出的14种敏感菌的I测定效果，从表中数据可知：4种生物碱对同种敏感菌的抑菌本拥有必然的差异，总体阐发来看，小檗碱的抑菌作用和抑菌谱好似更大一些，黄连碱和巴马亭次之，药根碱最弱。由于药物的难溶性而限定进一步进步药物浓度，在外貌看来是抑菌

8、谱的差异现实上大概是抑菌本领的差异。同时在试验中还不雅察到4种生物碱对耐药金黄色葡萄球菌有较强的按捺作用，小檗碱，黄连碱和巴马亭对脓肿分枝杆菌具有必然的按捺作用。表24种黄连生物碱对敏感菌的Igl-1略小檗碱，黄连碱，巴马亭和药根碱是黄连中含量最为富厚的4种生物碱，4种生物碱具有雷同的基天职子骨架即原小檗碱类生物碱分子骨架和芳型季铵氮布局，4种生物碱均具有雷同的异喹啉基天职子骨架，抑菌谱理论上不会产生较大差异。而Iasa等2报道原小檗碱类生物碱的药效必须布局为7位的芳环季铵氮布局，4种生物碱在分子布局上的区别在于A环2，3位代替基团和D环9，10位的代替基团的差异，而在A环和D环代替基团差异对

9、原小檗碱类化合物的抑菌活性会有增减作用。张传美等3创造黄连复方三黄汤或黄连小檗碱对庆大霉素大肠杆菌具有很好的按捺活性，以为它们能按捺和消除耐药菌株的抗药性。本实行中4种黄连生物碱对金葡菌和耐药金葡菌R的I根本雷同，进一步证实白黄连生物碱对耐药菌株有较好的按捺作用，就此征象举行研究具有很高的医学代价。对原小檗碱类化合物药理作用的深化研究后创造，该类化合物除了具有较强的抗菌消炎作用外，并且还具有落血脂，落血糖，抗肿瘤和抗疟疾等药理作用35。因此，对原小檗碱类生物碱药物化学的深化研究具有较高的科研代价。【参考文献】1JiYB.Thepharalgyandappliatinftheativepnent

10、fhineseherbs.Harbin:HEilngjiangtehnlgialpress,1995：691.2KIasa,Kaigauhi,Ueki,etal.Antibaterialativityandstruture-ativityrelatinshipsfberberineanalgsJ.EurJedhe,1996,31:469.3Zhang,LiuNB,Yu,etal.InhibitinfpundingfGentayin,SanhuangtangandBerberinetE.liinVitrJ.JLaiyangAgri,2022，21(1):14.4eiJ,JiangJD,uJD,etal.Researhntheeffeti