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文档简介

Sag精英名校考研 /三、DNA的三级Sag精英名校考研 /DNA的三级结三级结构包括链的扭结和超螺旋链形成的环或是环状DNA中的连环Sag精英名校考研 /(一)DNA的超螺松驰型超螺旋(Supercoied)正超螺旋(positive负超螺旋(negative以一根两股以右旋方向缠绕的细绳做下述实;Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /检测DNA三级结构的密度梯度凝胶电镜Sagiv精英名校考 9-2同类型DNA三级结构及性类型形拓扑结数系电泳迁移Ⅰ闭合超螺最闭合松弛最Ⅱ开松弛Ⅲ线松弛中等速Sag精英名校考研 /Sagiv

超螺旋的定量描L(Linkingnumber):链环数或称拓扑环绕数,指cccDNA(covalentlyclosedcircleDNA)中在cccDNA中任何拓扑学状是一个整T(Twistingnumber):扭转数,即双螺旋的圈数。是双螺旋结构自身的特性。由每圈多少碱W(Writhingnumber):缠绕数,即超螺旋数。对松散分子而言W=0。Sag精英名校考研 /超螺旋的定量描White方程:L=L链环数是整数,右手螺旋时L取正W缠绕数可以是非整数;是变量,右手螺Sagiv精英名校考 则L=T=42, 松弛如松开6圈,再连接两端成将出现两种情1L=T=42,W=0 DNA趋向保持BT=W 产生负超Sag精英名校考研 /超螺旋的意 Sagiv

DNA拓扑异构兼有DNA内切酶和DNA连接酶的功 Sagiv

拓异构//Sagiv

拓扑异构Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /σ=(L–L0)/L0L/L0在天然DNA中,σ约为-Sag精英名校考研 /(二)三链和四链碱基体通过Watson-Crick氢键配对和Watson-Crick-Watson-Crick-reversedHoogsteenReversedWatson-Crick-HoogsteenReversedWatson-Crick-reversedSag精英名校考研 /三链Pu-Pu-Py构象(如A.A-T,G.G-Sagiv精英名校考 H|Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /鸟嘌呤端端Sag精英名校考研 /RNASagivt713ph3692boo/susuallysingle-strandedSag精英名校考研 /Sagiv精英名校考研作46php RNAisthegeneticmaterialof RNAfunctionsastheintermediate(mRNA)betweenthegeneandtheprotein-synthesizingRNAfunctionsasanadaptor(tRNA)betweenthecodonsinthemRNAandaminoacids.RNAservesasaregulatorymolecule,whichthroughsequencecomplementaritybindsto,andinterfereswiththetranslationofcertainSomeRNAsareenzymesthatcatalyzeessentialreactionsinthecell(RNasePribozyme,largerRNA,self-splicingintrons,etc).Sagiv精英名校考 BiologicalrolesSagiv精英名校考 体内的遗传物 、作用于RNA转录后的加工与、参 表达的调、一些RNAs具有生物催化剂功能Pribozyme,largerRNA,self-splicingintrons,etc).a英insfoldbackonthemselvestof/rmlocalregionsofdoublehelixsimilartoA-formRNAhelixarethebase-pairedsegmentsbetweenRNAhelixarethebase-pairedsegmentsbetweenshortstretchesofcomplementarysequences,whichadoptoneofthevariousstem-loopstructuresSagiv精英名校考 ThedoublehelicalSagiv精英名校考 Theminorgrooveiswideandshallow,butofferslittlesequence-specificinformation.Themajorgrooveissonarrowanddeepthatitisnotveryaccessibletoaminoacidsidechainsfrominteractingproteins.ThusRNAstructureislesswellsuitedforsequence-specificinteractionswithproteinsSag精英名校考研 /an--室713po399o/tadditionalregularbasepairinginRNA,whichenrichedthecapacityfor G:UbaseSag精英名校考研 /ThreemajorclassesofMessengerRNA(mRNA)RibosomalRNA(rRNA)Sagiv

R Sag精英名校考研 /三叶草Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /Sagiv精英名校考研

Prokaryotic 5S16s23s

Eukaryotic5S5.8S18s28sSagiv精英名校考研工作室4514pho3 Sag精英名校考研 /SomeRNAsareRibozymesareRNAmoleculesthatadoptcomplextertiarystructureandserveasbiologicalThecommonthemeofribozymeisthatthecanperformanintramolecularorintermolecularreactionthatinvolvescleavageorjoiningofphosphodiesterbonds.Sagiv精英名校考 IntronsofthegroupIandgroupIIpossesstheabilitytosplicethemselvesoutofthepre-mRNAthatcontainsthem.TheenzymeribonucleasePisaribonucleoproteinthatcontainsasingleRNAmoleculeboundtoaprotein.SmallRNAsoftheviroidclasshavetheabilitytoperformaself-cleavagereaction.Sag精英名校考研 /Sag76133h59bySelf-splicingoccursbySelf-splicingoccursbyreactionsinwhichbondsareexchangeddirectly.Thebondsthathavebeengeneratedateachstageareindicatedbytheshadedboxes.Sag精英名校考研 /GeneticinformatincanbeprovidedbyDNAorRNASag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /复性(renaturation):或退火形成氢键,称为成核作用(nucleation)。接称为拉拉链作用(Zippering)。Sag精英名校考研 /导致DNA变性的因素高酸碱尿甲酰DNA变性后物理性质发生的变提高了对紫外线的吸收能力,称为增色效应(hyperchromiceffect)Sag精英名校考研 /Sagiv精英名校考 A的A260=1.00(浓度为Sag精英名校考研 /A260/A280值可以反映核酸的纯PureDNA:A260/A280Sagiv精英名校考 解链温度(meltingSagiv精英名校考 ,是A260值升高达到极大值一半时温度。即是变性温度范围的DNA的解链Sag精英名校考研 /影响变性的因升或Tm=69.3+0.41(G或Tm=69.3+0.41(GGC%=(Tm-Sag精英名校考研 /Marmur-Doty1xSSC (0.15MNacl+0.015MSodiumLimonate)GC%=3070%Tm=69.3+0.41×

whatismeaning

EvaluationGC%of

Tm1<Sag精英名校考研 /773h58aaannealingSag精英名校考研 /影响复性的因DNA分子的复杂DNA的浓度 段的大温度(最佳复性温度一般比Tm低Sagiv

复性动力

=1 即:C0t1/2C:单链DNA的浓度 :初始时单链DNA的浓度K:复性的速度常当阳离子浓度、 段长度为一定的条件下,可确定复度与度与C0t1/2Sag精英名校考研 /单链DNA浓度(c)反应速率取决于初始的单链浓度(4)通过C0t1/2值可测原核生物组的大小;已知大肠杆菌的组为 C0t1/2=9M.secC0t1/2(任何 =任 组大小原核生 组大小不同,复性曲线也不同可用以区分真核生物和原核生物Sag精英名校考研 /Sagiv精英名考一 /学曲线 Sag精英名校考研 /单一顺序复性曲DNA开始时是单链,变性中止时是Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /第一相为性组分,代%DNA,范围10-4~2×10

DNA,范围80 o36a/esentineukaryotesarecommonlydividedintothreeclasses:Uniqueorsingle-copyDNAsequences--1to10copiespergenome. yrepetitiveDNAsequences--10to105copiesper HighlyrepetitiveDNAsequences--morethan105copiespergenome.Sag精英名校考研 /Sag精英名校考研 /在复性反应中如何知道单链已经结合双链了可以通过哪些法来检减色效应(hpochromic 羟基磷灰石柱羟基磷灰石对双链DNA吸附较牢,不易吸Sag精英名校考研 /DNA变性-复性的应---分子杂交技Sagiv

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