药物的杂质检查专题知识讲座

基本要求

掌握药品中杂质起源和分类，杂质限量定义和计算；氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、易炭化物、澄清度、炽灼残渣、干燥失重、有机溶剂残留量等检验项目标原理和方法。了解药品特殊杂质概念及其检验方法。重点：1．药品杂质起源，限量检验及计算2．氯化物、重金属、砷盐检验方法难点：1.砷盐检验方法原理2．各类热分析法原理1药物的杂质检查专题知识讲座第1页第三章药品杂质检查法第一节概述第二节普通杂质检验方法第三节特殊杂质检验方法第三章2药物的杂质检查专题知识讲座第2页第一节概述基本要求掌握药品中杂质起源和分类，杂质限量定义和计算了解药品纯度和化学试剂纯度区分3药物的杂质检查专题知识讲座第3页第一节概述一、药品纯度概念与要求第三章三、杂质限量检验二、杂质起源与种类4药物的杂质检查专题知识讲座第4页第三章一药品纯度要求第一节概述—药品纯度要求

——指药品纯净程度.是反应药品质量一项主要指标.1）评价：综合考虑药品外观性状、理化常数、杂质检验和含量测定.——综合评定药品纯度.杂质检验是药品纯度评价一项主要内容.1.药品纯度puritiesofdrugs5药物的杂质检查专题知识讲座第5页第三章第一节概述—药品纯度要求2）药品纯度与试剂纯度共同点：均要求所含杂质种类和限量.

不一样点：a.药品纯度—又称为药用规格,主要从用药安全、有效和对药品稳定性等方面考虑,只有合格品和不合格品.

6药物的杂质检查专题知识讲座第6页第三章第一节概述—药品纯度要求b.化学试剂纯度——是从杂质可能引发化学改变对使用影响以及试剂使用范围和使用目标加以要求,它不考虑杂质对生物体生理作用及毒副作用.化学试剂——普通分为4个等级〔基准试剂GR、优级纯或特种试剂(光谱纯、色谱纯、农药残留检测级)、分析纯AR、化学纯CP和试验室试剂LR〕7药物的杂质检查专题知识讲座第7页第三章第一节概述—药品纯度要求比如：硫酸钡（BaSO4）试剂规格

对可溶性钡盐不做检验.检验：氯化物、铁、灼烧失重等药用规格如存在可溶性钡盐则造成医疗事故.检验：酸溶性钡盐、重金属、砷盐等

化学试剂不能代替药品使用8药物的杂质检查专题知识讲座第8页第三章一药品纯度要求第一节概述—药品纯度要求

是指药品中存在①无治疗作用或②影响药品稳定性和疗效,甚至③对人体健康有害微量物质.2.药品杂质为确保药品质量,确保用药安全、有效,必须检验杂质,控制药品纯度.9药物的杂质检查专题知识讲座第9页第三章1）对人体有害如：砷盐和重金属2）影响药品稳定性如：水分（青霉素钾盐）3）虽对人体无害也不影响药品稳定性，但可用于考评生产工艺和生产控制是否正常——指示性杂质（信号杂质）如：Cl-SO42-一药品纯度要求第一节概述—杂质种类与起源10药物的杂质检查专题知识讲座第10页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类按起源可分为2类普通杂质

——指在自然界中分布广泛,在各种药品生产或贮存过程中轻易引入杂质.特殊杂质

——指在该药品生产或贮存过程中,依据药品性质、生产方法和工艺条件,有可能引入杂质.11药物的杂质检查专题知识讲座第11页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类按结构可分为2类无机杂质

——Cl-、S2-、CN-、As、重金属.有机杂质

——中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂.12药物的杂质检查专题知识讲座第12页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类按性质可分为3类信号杂质

——指本身普通无害,但其含量多少可反应药品纯度水平,指示生产工艺是否合理.如：氯化物、硫酸盐等.有害杂质

——对人体有毒害杂质.在质量标准中严加控制,以确保用药安全.如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等.13药物的杂质检查专题知识讲座第13页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类a含有立体异构体药品,其生物活性有很大差异;如：肾上腺素为左旋体,其升压作用是右旋体12倍.b异构体中,其顺式体与反式体生物活性也不相同;如：VA以全反式生物活性为最高.无效或低效杂质14药物的杂质检查专题知识讲座第14页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类

c药品晶型不一样,其理化常数,溶解性稳定性、体内吸收和疗效也有差异.

如：驱虫药甲苯咪唑,有A、B、C三种晶型.其中C晶型驱虫率90%,B晶型驱虫率40~60%,A晶型驱虫率小于20%.15药物的杂质检查专题知识讲座第15页第三章二杂质种类第一节概述—杂质起源与种类

必须重视异构体和多晶型对药品有效性和安全性影响.控制药品中低效、无效以及含有毒性异构体和多晶型,在药品纯度研究中日益受到重视.16药物的杂质检查专题知识讲座第16页第三章第一节概述—杂质起源与种类药品中杂质起源与种类——有针对性地制订杂质检验项目标方法和程度二杂质起源药品中可能存在杂质——决定杂质检验项目17药物的杂质检查专题知识讲座第17页第三章第一节概述—杂质起源与种类二杂质起源

药品生产过程引入

药品贮存期间引入18药物的杂质检查专题知识讲座第18页第三章二杂质起源第一节概述—杂质起源与种类(4)合成工艺中使用设备、器皿可能引入重金属、以及使用溶剂,有机溶剂.1生产过程中引入(1)所用原料不纯(2)合成工艺中未反应完全原料、合成中间体、副产物等.（3）从药用植物中提取分离过程中引入19药物的杂质检查专题知识讲座第19页第三章二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得++乙酰化不完全水杨酸(杂质)20药物的杂质检查专题知识讲座第20页第三章制剂过程中可能产生新物质如：

制备过程中加热灭菌盐酸普鲁卡因注射剂

深入脱羧转化对氨基苯甲酸苯胺引发毒性反应第一节概述--杂质起源与种类21药物的杂质检查专题知识讲座第21页第三章二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类

(1)保管不善或贮存时间过长(2)包装不妥2贮藏过程中引入22药物的杂质检查专题知识讲座第22页第三章二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类23药物的杂质检查专题知识讲座第23页第三章二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类例1:麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下,易氧化分解为醛及有毒过氧化物.CH3CH2OCH2CH3CH3CHO+

CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙基过氧化物）药典要求:起封后24小时内使用24药物的杂质检查专题知识讲座第24页第三章二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类例2：四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应,生成差向四环素(毒性高、活性低)25药物的杂质检查专题知识讲座第25页易发生水解反应结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等二杂质起源与种类第一节概述—杂质起源与种类第三章26药物的杂质检查专题知识讲座第26页第三章第一节概述—杂质限量检验1杂质限量

——在不影响药品疗效、稳定性及不发生毒性前提下,药品中所含杂质最大允许量.

三杂质限量检查百分表示(%)百万分表示(ppm)限量表示方法27药物的杂质检查专题知识讲座第27页第三章第一节概述—杂质限量检验2杂质检验要求

三杂质限量检查因为杂质不可能完全除尽，也没有必要除尽。所以在不影响疗效和不发生毒性标准下，既确保药品质量，又便于制造、贮藏和制剂生产，对于药品中可能存在杂质，允许有一定限量，这一允许量被称为杂质限量。通常不要求测定其准确含量。《药典》中要求杂质检验均为限量（或程度）检验（Limittest）。28药物的杂质检查专题知识讲座第28页第三章第一节概述—杂质限量检验

三杂质限量检查

三种检验方法比较法灵敏度法标准对照法3杂质检验方法(限量检验法)29药物的杂质检查专题知识讲座第29页操作:平行试验比较两比色管颜色或浊度,判断杂质限量是否符合要求.管2（对照管）管1（样品管）第一节概述—杂质限量检验第三章

取程度量待检杂质对照品配成对照溶液,与一定量供试品配成供试品容液在相同条件下处理,比较反应结果,判断供试液中所含杂质程度是否符合要求.标准对照法30药物的杂质检查专题知识讲座第30页

在供试品溶液中加入试剂,在试验条件下反应,不得出现正反应.既以检测条件下反应灵敏度控制杂质限量.第一节概述—杂质限量检验第三章如：蒸馏水中氯化物检验5滴1mL0.2mg/50mL4µg/mL灵敏度法31药物的杂质检查专题知识讲座第31页

取一定量供试品,在要求条件下测定待检杂质吸光度,与要求限量比较,判断供试品中杂质限量.第一节概述—杂质限量检验第三章比较法32药物的杂质检查专题知识讲座第32页

例：肾上腺素中肾上腺酮检验

第一节概述—杂质限量检验第三章比较法供试品液(2.0mg/ml)盐酸溶液样品

(0.05mol/L)A310nm要求：A310nm≯0.0533药物的杂质检查专题知识讲座第33页写成：4限量计算公式

三杂质限量检查第一节概述—杂质限量检验第三章34药物的杂质检查专题知识讲座第34页

若用ppm表示杂质限量则：注意:①单位是否统一②供试品是否有稀释③表示方法%或ppm第一节概述—杂质限量检验第三章35药物的杂质检查专题知识讲座第35页例1.

对乙酰氨基酚中氯化钠检验对照品溶液:标准NaCl溶液(10gCl-/ml)方法：取5.0ml同法操作比较,浊度不得更大.计算：氯化物限量是多少(%)？第一节概述—杂质限量检验第三章36药物的杂质检查专题知识讲座第36页要求：含重金属≯百万分之五(5ppm)计算：应取标准铅溶液(10gPb/ml)多少ml？例2.

葡萄糖中重金属检验方法：第一节概述—杂质限量检验第三章37药物的杂质检查专题知识讲座第37页例3.溴化钠中砷盐检验第一节概述—杂质限量检验第三章S==x106=0.5gC.VL2.0X1/1064方法：中国药典要求：取标准砷溶液2.0ml(每1ml相当于1µg砷)制备砷斑要求：含砷量不得超出4ppm计算：应取供试品量(g)？38药物的杂质检查专题知识讲座第38页小结1，药品纯度：药品纯净程度。2，杂质起源与种类起源：生产和贮存种类：普通杂质和特殊杂质3，杂质限量检验杂质限量：药品中允许含杂质最大量;计算：识记：杂质、普通杂质、特殊杂质、杂质起源、药用纯度与化学纯度区分39药物的杂质检查专题知识讲座第39页思索题1,什么是普通杂质和特殊杂质。2,请解释信号杂质和有害杂质。3,请说明杂质限量和药品纯度含义。4,试说明信号杂质存在对药品有何影响。40药物的杂质检查专题知识讲座第40页1.临床所用药品纯度与化学品及试剂纯度主要区分是（A）A.所含杂质生理效应不一样B.所含有效成份量不一样C.所含杂质绝对量不一样D.化学性质及化学反应速度不一样E.所含有效成份生理效应不一样练习题与答案41药物的杂质检查专题知识讲座第41页2．在药品生产过程中引入杂质路径为(A,B,C,D)A.原料不纯或部分未反应完全原料造成B.合成过程中产生中间体或副产物分离不净造成C.需加入各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.因为操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入杂质42药物的杂质检查专题知识讲座第42页3．检验某药品中砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1μgAs）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品量为A.0.20g√B.2.0gC.0.020gD.1.0gE.0.10g

已知：C＝1μg/ml＝1×10-6g/ml;V＝2ml;L＝0.0001%43药物的杂质检查专题知识讲座第43页4．检验维生素C中重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸收标准铅溶液（每1ml＝0.01mgPb）多少ml？

A.0.2mlB.0.4mlC.2ml√D.1mlE.20ml44药物的杂质检查专题知识讲座第44页基本要求第二节普通杂质检验掌握普通杂质检验项目标原理和方法重点：氯化物、重金属、砷盐、铁盐和干燥失重第三章45药物的杂质检查专题知识讲座第45页普通杂质检验规则《药品检验操作标准》要求

1.遵照平行操作标准（1）仪器配对性如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超出2mm，砷盐检验时导气管长度及孔大小要一致（2）对照品与供试品同时操作2.正确取样及供试品称量范围≤1g不超出±2%，＞1g不超出±1%3.正确比色、比浊方法4.检验结果不符合要求或在程度边缘时应对供试管和对照管各复查二份46药物的杂质检查专题知识讲座第46页一氯化物检查法第二节普通杂质检验

1.原理

利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应,生成氯化银白色浑浊液,与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生氯化银浑浊程度比较,浊度不得更大.Cl-+Ag+

H+AgCl第三章47药物的杂质检查专题知识讲座第47页2．操作方法(对照法)样品管对照管第二节普通杂质检验第三章葡萄糖中氯化物检验1.0ml用水稀释至50ml6.0mL0.60g0.010%(浓度：10gCl－/ml)一氯化物检查法48药物的杂质检查专题知识讲座第48页一氯化物检查法第二节普通杂质检验3.结果观察方法

暗处放置5min(防止AgCl分解)第三章黑色背景上自上而下观察49药物的杂质检查专题知识讲座第49页

4．注意事项及讨论一氯化物检查法①

平行试验②

加稀硝酸目标③氯化物最适检测浓度范围④稀释到40ml后加硝酸银试液目标⑤

供试品溶液不澄清处理方法⑥

供试品溶液有色时处理方法⑦

供试品溶液显碱性处理方法⑧

干扰物排除⑨

有机药品中氯化物检验第二节普通杂质检验第三章50药物的杂质检查专题知识讲座第50页

一氯化物检查法为了确保样品管与对照管反应条件一致,要求样品管与对照管要平行操作——平行试验.第二节普通杂质检验第三章①

平行试验51药物的杂质检查专题知识讲座第51页

②

加稀硝酸目标一氯化物检查法

加速氯化银混浊生成,产生很好乳浊,防止产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀.50ml供试液含稀硝酸10ml为宜.过多会增大氯化银溶解度,使浊度降低.第二节普通杂质检验第三章52药物的杂质检查专题知识讲座第52页一氯化物检查法

③氯化物最适检测浓度范围50ml供试液中含0.05~0.08mgCl-,相当于标准氯化钠溶液(10gCl-/ml)5.0~8.0ml时,所显浑浊梯度显著.依据限量取用适宜供试品量,使氯化物浓度在适宜范围内.第二节普通杂质检验第三章53药物的杂质检查专题知识讲座第53页

④稀释到40ml后加硝酸银试液目标一氯化物检查法

使产生AgCl浑浊均匀.硝酸银加得过早,因为氯化物浓度过大而产生AgCl沉淀而影响比浊.第二节普通杂质检验第三章54药物的杂质检查专题知识讲座第54页

⑤

供试品溶液不澄清处理方法一氯化物检查法供试品溶解后溶液不澄清,应过滤,过滤时滤纸要先用含硝酸水溶液(1→100)洗涤,除去滤纸中含有氯化物.第二节普通杂质检验第三章55药物的杂质检查专题知识讲座第55页

⑥

供试品溶液有色时处理方法a.内消色法如枸橼酸铁铵中氯化物检验.

第二节普通杂质检验第三章

56药物的杂质检查专题知识讲座第56页

向供试品溶液中加入某种试剂,使溶液颜色褪去后再依法检验.一氯化物检查法例：高锰酸钾中氯化物检验因溶液呈紫色,加入适量乙醇,使颜色消失后再检验.第二节普通杂质检验第三章b.外消色法57药物的杂质检查专题知识讲座第57页

⑦

供试品溶液显碱性处理方法一氯化物检查法先中和为中性后再检验.——防止硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银.第二节普通杂质检验第三章58药物的杂质检查专题知识讲座第58页

a.碘化物中氯化物检验

第二节普通杂质检验第三章Cl－氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2I-氧化电位低(0.53)

⑧

干扰物排除59药物的杂质检查专题知识讲座第59页b.碘中氯化物检验反应原理:依据氨中溶解度不一样

AgCl(溶解)＞AgBr(微溶)＞AgI(不溶)第二节普通杂质检验第三章60药物的杂质检查专题知识讲座第60页Cl－氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2Br-氧化电位低(1.08)

第二节普通杂质检验c.

溴化物中氯化物检验第三章61药物的杂质检查专题知识讲座第61页一氯化物检查法

⑨

有机药品中氯化物检验第二节普通杂质检验第三章a溶于水有机药品——直接检验.c溶于稀乙醇或丙酮有机药品——用该溶剂溶解后依法检验.例：三氯叔丁醇CCl3—C(CH3)2—OH

b不溶于水有机药品——62药物的杂质检查专题知识讲座第62页

d杂质中卤素原子连接于苯环上——先进行有机破坏,使分解后再检验.第二节普通杂质检验第三章氧瓶燃烧进行样品处理.63药物的杂质检查专题知识讲座第63页第二节普通杂质检验二硫酸盐检查法

硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡白色浑浊液,与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成浑浊比较.

第三章1.原理64药物的杂质检查专题知识讲座第64页第二节普通杂质检验二硫酸盐检查法

第三章2.操作法2ml40mld.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O

样品标准溶液浓度范围

0.1mg~0.5mgSO42-/50ml65药物的杂质检查专题知识讲座第65页1.标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg所显浑浊梯度显著，相当于标准K2SO4溶液1～5ml。2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。(盐酸酸性条件预防BaCO3，BaPO4沉淀生成，pH约=1)3.试剂：氯化钡4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。二硫酸盐检查法第二节普通杂质检验2.测定条件第三章66药物的杂质检查专题知识讲座第66页第二节普通杂质检验三铁盐检查法

第一法硫氰酸盐法ChPUSP1.原理铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈颜色进行比较.

第三章67药物的杂质检查专题知识讲座第67页第二节普通杂质检验三铁盐检查法

第三章2.操作4ml25mld.HCl30%硫氰酸铵过硫酸铵50mgH2O50mlH2O

样品标准溶液68药物的杂质检查专题知识讲座第68页第二节普通杂质检验三铁盐检查法

第三章2)最正确比色浓度a.仪器分析线性范围5~90gFe3+/50mlb.目视比色浓度范围10~50gFe3+/50ml3.讨论标准铁溶液——硫酸铁铵(含硫酸)浓度10gFe3+/ml69药物的杂质检查专题知识讲座第69页3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行4）检验Fe2+和Fe3+

5）铁盐检验时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可预防光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。

第二节普通杂质检验第三章70药物的杂质检查专题知识讲座第70页第二节普通杂质检验三铁盐检查法

第二法巯基醋酸法BP

第三章71药物的杂质检查专题知识讲座第71页枸橼酸作用：使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀。巯基醋酸：还原剂本法灵敏度较高，但试剂较贵

第二节普通杂质检验第三章72药物的杂质检查专题知识讲座第72页第二节普通杂质检验四重金属检查法

重金属是指在试验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色金属.如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.重金属存在影响药品稳定性及安全性.铅易在体内积蓄中毒,以Pb为代表.

第三章1.重金属概念73药物的杂质检查专题知识讲座第73页第二节普通杂质检验四重金属检查法

第二法:炽灼后检验法适合用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇有机药品.第一法:硫代乙酰胺法适合用于溶于水、稀酸、乙醇药品,是最惯用方法.第三章74药物的杂质检查专题知识讲座第74页第二节普通杂质检验四重金属检查法第三法:硫化钠法适合用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药品(巴比妥类、磺胺类)

第四法:微孔滤膜法.适合用于重金属限量低(2-5g)药品.第三章75药物的杂质检查专题知识讲座第75页第二节普通杂质检验四重金属检查法

适合用于溶于水、稀酸和乙醇药品.第三章第一法硫代乙酰胺法76药物的杂质检查专题知识讲座第76页第二节普通杂质检验四重金属检查法

硫代乙酰胺在弱酸性(pH3.5醋酸盐缓冲液)条件下水解,产生H2S,与微量重金属离子(以Pb2+为代表)生成黄色到棕黑色硫化物混悬液,与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较,不得更深.第三章1原理

77药物的杂质检查专题知识讲座第77页第二节普通杂质检验2操作方法样品管对照管78药物的杂质检查专题知识讲座第78页第二节普通杂质检验第三章结果观察79药物的杂质检查专题知识讲座第79页第二节普通杂质检验四重金属检查法

①

标准铅溶液浓度②

硫代乙酰胺试液③

溶液pH④

供试品溶液有颜色时处理⑤

干扰物排除方法第三章3．讨论80药物的杂质检查专题知识讲座第80页第二节普通杂质检验四重金属检查法

①

标准铅溶液浓度适宜目视比色浓度范围

Pb2+标准溶液10g/ml

1~2ml第三章81药物的杂质检查专题知识讲座第81页第二节普通杂质检验四重金属检查法

②

硫代乙酰胺试液H2S试液：恶臭和毒性；不稳定；易被空气氧化而析出硫；浓度难以控制.第三章改用硫代乙酰胺为显色剂（95版药典）硫代乙酰胺在试验条件下水解产生H2S,与重金属离子反应.82药物的杂质检查专题知识讲座第82页第二节普通杂质检验四重金属检查法

pH在3.0~3.5时,呈色较完全.酸度增大,呈色变浅甚至不呈色.第三章

溶液pH对于金属离子与硫化氢呈色影响较大.③

溶液pH83药物的杂质检查专题知识讲座第83页第二节普通杂质检验四重金属检查法

④

供试品溶液有颜色时处理第三章a.外消色法b.内消色法84药物的杂质检查专题知识讲座第84页第二节普通杂质检验四重金属检查法

a.

外消色法Ⅰ.稀焦糖溶液调整Ⅱ.指示剂调整第三章85药物的杂质检查专题知识讲座第85页第二节普通杂质检验

b.内消色法

——与氯化物检验时处理方法类似

第三章86药物的杂质检查专题知识讲座第86页第二节普通杂质检验四重金属检查法

⑤

干扰物排除方法干扰：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,产生混浊影响检验.a.供试品中微量高价Fe3+存在第三章如：葡萄糖酸亚铁中重金属检验.排除：加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+.87药物的杂质检查专题知识讲座第87页第二节普通杂质检验

b.供试品为铁盐（大量Fe3+）Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醚提取Fe3++HCl→[HFeCl6]2-（黄色）水层加氨试液调至碱性,残余Fe3+可用KCN掩蔽,按第三法检验.

如：枸橼酸铁铵重金属检验第三章四重金属检查法88药物的杂质检查专题知识讲座第88页第二节普通杂质检验四重金属检查法

c.药品本身能生成不溶性硫化物加入掩蔽剂消除干扰——加掩蔽剂KCN,使锑、锌形成稳定配合物后,用第三法检验.第三章如：葡萄酸锑钠中重金属检验89药物的杂质检查专题知识讲座第89页第二节普通杂质检验四重金属检查法

1.原理

供试品先炽灼破坏后,使有机结合重金属游离,再按第一法检验.第三章第二法灼烧后检验适合用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇有机药品.90药物的杂质检查专题知识讲座第90页第二节普通杂质检验四重金属检查法

2.操作第三章

缓缓炽灼放冷H2SO40.5-1.0ml供试品炭化

加热

HNO3500-600℃H2SO4除尽放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法检验蒸干氨试液注意：做空白试验

91药物的杂质检查专题知识讲座第91页第二节普通杂质检验四重金属检查法

a.HNO3处理后,必须蒸干除尽NO.第三章3.讨论b.炽灼温度严格控制：500-600℃c.含钠盐或氟有机药品在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃(玛瑙)蒸发皿.如：盐酸氟奋乃静中重金属检验92药物的杂质检查专题知识讲座第92页第二节普通杂质检验四重金属检查法

1.原理

在碱性介质中,以Na2S为显色剂,使Pb2+与S2-作用生成PbS混悬液,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较,不得更深.第三章第三法硫化钠法93药物的杂质检查专题知识讲座第93页第二节普通杂质检验四重金属检查法

适合用于难溶于稀酸但能溶解于碱性溶液药品中重金属检验.如：磺胺类与巴比妥类药品第三章94药物的杂质检查专题知识讲座第94页第二节普通杂质检验四重金属检查法

2.方法取供试品适量,加NaOH试液5ml和水20ml使溶解后,置纳氏比色管中,加Na2S试液5滴,摇匀,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较.第三章95药物的杂质检查专题知识讲座第95页第二节普通杂质检验四重金属检查法

3.讨论

Na2S对玻璃有腐蚀性,久置产生絮状物,应临用新配.第三章96药物的杂质检查专题知识讲座第96页第二节普通杂质检验四重金属检查法

第四法微孔滤膜法当重金属含量低(2-5g)时,在比色管中难于目视观察,采取本法.第三章97药物的杂质检查专题知识讲座第97页第二节普通杂质检验四重金属检查法

1.原理第三章同第一法使重金属生成硫化物富集于微孔滤膜上(铅斑)提升检验灵敏度.98药物的杂质检查专题知识讲座第98页第二节普通杂质检验(二)白田道夫法(一)古蔡氏法(三)Ag-DDC法(四)奇列氏法(次磷酸法)第三章五砷盐检查法99药物的杂质检查专题知识讲座第99页第二节普通杂质检验

第三章五砷盐检查法(一)古蔡氏法（Gutzeit）1.原理金属锌与酸作用产生新生态氢与药品中微量砷盐反应生成具挥发性砷化氢,遇溴化汞试纸产生黄色至棕色砷斑,与同条件下一定量标准砷溶液所生成砷斑比较,判断砷盐含量.100药物的杂质检查专题知识讲座第100页第二节普通杂质检验反应式以下：第三章黄色棕色101药物的杂质检查专题知识讲座第101页第二节普通杂质检验第三章2.装置

检砷瓶A导气管B

具孔塞CABC五砷盐检查法102药物的杂质检查专题知识讲座第102页第二节普通杂质检验2操作④加锌粒2g,马上将装妥导气管B密塞与A瓶,置25-40℃水浴中,反应45分钟,取出溴化汞试纸,比较砷斑.第三章①导气管B中装入醋酸铅棉球60-80mm;②再于旋塞C平面上放一片溴化汞试纸③样品、对照品分别置于检砷瓶中,加盐酸5ml与水21ml,再加2.5%碘化钾试液5ml与0.3%酸性氯化亚锡试液5滴,在室温放置10分钟103药物的杂质检查专题知识讲座第103页第二节普通杂质检验

3.讨论1)试剂作用a.KI作用——还原剂：As5+→As3+

五价砷生成AsH3反应速度比三价砷速度慢,加入KI使五价砷还原为三价砷后再与活泼氢反应,以增大AsH3生成速度.第三章五砷盐检查法104药物的杂质检查专题知识讲座第104页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法

①还原剂(表现在3方面)Ⅰ.将五价砷还原为三价砷(As5+→As3+)b.酸性SnCl2作用105药物的杂质检查专题知识讲座第105页第三章第二节普通杂质检验五砷盐检查法

进而促进AsH3不停生成稳定络离子Ⅱ.将KI被氧化生成I2再还原为I-106药物的杂质检查专题知识讲座第106页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法

H2妨碍酸与锌粒反应Zn超电压0.70Sn超电压0.50SnCl2Ⅲ.SnCl2与Zn粒表面形成Zn-Sn齐

——起去极化作用,使氢气均匀而连续地发生.107药物的杂质检查专题知识讲座第107页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法

c.PbAc2棉花作用

——排除硫化物干扰(1mgS2-)

108药物的杂质检查专题知识讲座第108页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法

d.HgBr2试纸作用

HgBr2试纸与AsH3作用生成砷斑.

109药物的杂质检查专题知识讲座第109页第二节普通杂质检验

2)

反应最正确条件a.Zn粒大小及用量

大小：能经过1号筛（850~m）用量：约2g.b.标准砷溶液2ml(1g/ml)

第三章五砷盐检查法110药物的杂质检查专题知识讲座第110页第二节普通杂质检验a.供试品是硫化物,亚硫酸盐,硫代硫酸盐排除方法：加入浓硝酸处理第三章3)

干扰物排除五砷盐检查法111药物的杂质检查专题知识讲座第111页第二节普通杂质检验Fe3+能消耗还原剂(KI、SnCl2),并能氧化砷化氢.排除方法：先加酸性SnCl2试液使

Fe3+→Fe2+第三章五砷盐检查法b.供试品是铁盐(Fe3+)112药物的杂质检查专题知识讲座第112页第二节普通杂质检验c.共价键结合砷化物排除方法：进行有机破坏——酸破坏法或碱破坏法第三章五砷盐检查法113药物的杂质检查专题知识讲座第113页第二节普通杂质检验

碱破坏法a加入氢氧化钙500-600C灼烧

例：酚磺酞b加入无水碳酸钠碱融例：苯甲酸钠第三章五砷盐检查法酸破坏法加稀硫酸与溴化钾例：葡萄糖中砷盐检验114药物的杂质检查专题知识讲座第114页第二节普通杂质检验

4)古蔡氏法特点优点：灵敏度高(1gAs)缺点：Sb干扰(100μg)第三章五砷盐检查法115药物的杂质检查专题知识讲座第115页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法(二)白田道夫法

对含锑药品中砷盐检验不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.116药物的杂质检查专题知识讲座第116页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法1.原理

2As3++3SnCl2+6HCl2As+3SnCl4+6H+棕褐色

SnCl2在HCl中能将砷盐还原为棕褐色胶态砷,与一定量标准砷溶液按同法处理后进行比较,判断供试品中砷盐限量.117药物的杂质检查专题知识讲座第117页第二节普通杂质检验

2.白田道夫法特点优点：不受Sb干扰缺点：灵敏度低——20gAs2O3/10ml加入少许HgCl2,灵敏度提升至2gAs2O3（1.5gAs）/10ml.第三章五砷盐检查法118药物的杂质检查专题知识讲座第118页第二节普通杂质检验

(三)二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)USP

silver

diethyldithiocarbamate第三章本法不但用于砷盐限量检验,而且可用作微量砷盐含量测定.119药物的杂质检查专题知识讲座第119页第二节普通杂质检验

第三章1.原理第一步：同古蔡氏法生成砷化氢第二步：砷化氢还原Ag-DDC溶液,产生红色胶态银.目视比色法仪器分析510nm处测吸收度。120药物的杂质检查专题知识讲座第120页AsH3+6Ag(DDC)→As(DDC)3+6Ag(红色)+3HDDC砷化氢与Ag-DDC溶液作用，还原Ag—DDC为红色胶态银，直接比色或于510nm波优点测定吸收度，进行比较。用有机碱吸收反应产生HDDC有利于反应进行。USP（24）用吡啶，灵敏但试剂恶臭ChP（）用三乙胺。灵敏度低本法适合用于含Sb量小于500μg供试品。121药物的杂质检查专题知识讲座第121页第二节普通杂质检验

2.Ag-DDC法特点a灵敏度高0.5gAs/30mlb可仪器测定,还可定量cSb干扰小（500μg

）第三章五砷盐检查法122药物的杂质检查专题知识讲座第122页第二节普通杂质检验第三章五砷盐检查法(四)奇列氏法（次磷酸法）BP1.原理在盐酸酸性溶液中,次磷酸还原砷盐为棕色游离砷,与标准砷溶液同法处理后比较颜色.NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2AS↓棕色123药物的杂质检查专题知识讲座第123页第二节普通杂质检验

2.特点不受S2-,SO32-,Sb干扰灵敏度较古蔡氏法低第三章五砷盐检查法124药物的杂质检查专题知识讲座第124页

第二节普通杂质检验第三章六溶液颜色检查法

控制药品中有色杂质限量方法。生产、贮藏中产生ChP()采取三种方法检验。第一法目视比色法即与标准比色液比较方法，全波长范围定性观察观察方法125药物的杂质检查专题知识讲座第125页

第二节普通杂质检验第三章六溶液颜色检查法

标准比色液配制黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红126药物的杂质检查专题知识讲座第126页第二法分光光度法单一波长定量，吸收度不得超出要求值。第三法色差计法全波长范围定量本法是经过色差计直接测定溶液透视三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析方法。测色仪器普通为光电积分型色差计科学客观三刺激值即是在给定三色系统中与待测色到达色匹配所需三个原刺激量。自然界每种颜色都能够用红、绿、蓝三原色按适当百分比混合而成。当目视法难判断色差时，应考虑本法。

第二节普通杂质检验第三章127药物的杂质检查专题知识讲座第127页第二节普通杂质检验第三章七易碳化物检查法检验药品中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色微量有机杂质。

方法：H2SO4炭化后与对照液比较。对照液：有三类（1）“溶液颜色检验”项下标准比色液；（2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按要求方法配成对照液；（3）高锰酸钾液比色：同置白色背景前，平视观察比较。不得更深128药物的杂质检查专题知识讲座第128页第二节普通杂质检验第三章八澄清度检查法检验药品中微量不溶性杂质，用作注射剂原料药普通应作此项检验。

1．检验方法对照法

129药物的杂质检查专题知识讲座第129页

第二节普通杂质检验第三章八澄清度检查法2.浊度标准液配制中国药典要求用浊度标准液作为澄清度检验标准。反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。1.00％硫酸肼溶液与10％乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液（15→1000）浊度标准原液550nm处吸收度0.12-0.15浊度标准液（5个级号）0.5,1,2,3,4130药物的杂质检查专题知识讲座第130页第二节普通杂质检验第三章八澄清度检查法3.判断药典中要求“澄清”，系指供试品溶液澄清度相同于所用溶剂，或未超出0.5号浊度标准液。4.溶剂：水、酸、碱、有机溶剂(乙醇、甲醇、丙酮)有机酸碱金属盐类药品强调用“新沸过冷水”131药物的杂质检查专题知识讲座第131页检验不含金属有机药品或挥发性无机药品中混入非挥发性无机杂质(金属氧化物或无机盐类)。

第二节普通杂质检验第三章九炽灼残渣检查法132药物的杂质检查专题知识讲座第132页1.原理样品炭化后+H2SO4湿润→700～800℃炽灼至恒重→炽灼残渣(residueonignition)（硫酸灰分）（sulphatedash）限量普通为0.1%～0.2%无机杂质硫酸盐。H2SO4湿润（低温加热至硫酸蒸汽除尽）炽灼残渣（USP）,硫酸灰分（BP）

第二节普通杂质检验第三章九炽灼残渣检查法133药物的杂质检查专题知识讲座第133页第二节普通杂质检验第三章九炽灼残渣检查法

2.操作方法134药物的杂质检查专题知识讲座第134页

第二节普通杂质检验第三章九炽灼残渣检查法

注意事项（1）供试品取样量应依据炽灼残渣限量和称量误差决定。（2）含氟药品对瓷坩埚有腐蚀，应采取铂坩埚。（3）若残渣需留作重金属检验，则500～600℃炽灼至恒重。（重金属（铅）在高温下易挥发）检验结果偏低（4）加硫酸处理是使杂质转化为稳定硫酸盐，并帮助有机物炭化。135药物的杂质检查专题知识讲座第135页第二节普通杂质检验十干燥失重

指药品在要求条件下,经干燥后所减失量,以百分率表示.干燥失重内容物主要指水分,也包含其它挥发性物质.第三章136药物的杂质检查专题知识讲座第136页第二节普通杂质检验十干燥失重

中国药典采取测定法常压干燥法干燥剂干燥法减压干燥法

热分析法第三章137药物的杂质检查专题知识讲座第137页第二节普通杂质检验

适合用于受热较稳定药品。干燥温度普通为105℃。干燥失重：第二次及以后各次称重均应在要求条件下继续干燥1h后进行。炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在要求条件下继续炽灼0.5h后进行。注意：供试品应平铺，厚度＜5mm，疏松物10mm结晶药品应该研细瓶盖半开，或者放置旁边取时，先盖瓶盖第三章十干燥失重常压干燥法138药物的杂质检查专题知识讲座第138页第二节普通杂质检验

适合用于受热易分解或挥发供试品。干燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5。1，硅胶：吸水率居中，变色硅胶，加有氯化钴（CoCl2），无水氯化钴蓝色，吸水后含二分子结晶水呈淡红色。105℃干燥后可恢复使用。价廉、方便、无腐蚀性、可重复，最惯用干燥剂。2，浓硫酸：吸水率低，有腐蚀性。3，P2O5：吸水性好，不能重复使用。第三章十干燥失重干燥剂干燥法139药物的杂质检查专题知识讲座第139页第二节普通杂质检验

适合用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除药品。除另有要求外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。第三章十干燥失重减压干燥法140药物的杂质检查专题知识讲座第140页第二节普通杂质检验

在程序控制温度情况下,测定物质物理、化学改变与温度关系一类仪器分析方法.(一)热重分析法(二)差示热分析法(三)差示扫描量热法第三章十干燥失重热分析法141药物的杂质检查专题知识讲座第141页第二节普通杂质检验

测量物质质量随温度改变热分析技术,可计算出样品在对应温度范围内减失质量百分率.第三章(一)热重分析法

(thermogravimetric,TGA)142药物的杂质检查专题知识讲座第142页第二节普通杂质检验

c.测定速度快第三章TGA特点分析样品少,适合用于珍贵药材或在空气中轻易氧化药品干燥失重测定.d.可用于判断结晶水或吸附水,并推断结晶水含量.b.灵敏度高,可达1g以下143药物的杂质检查专题知识讲座第143页

第三章供试品TGA热重曲线WW1测定曲线上平台之间质量差值计算出样品对应温度范围内减失质量百分率

第二节普通杂质检验结晶水失重台阶2可用于药品结晶水与吸附水区分144药物的杂质检查专题知识讲座第144页第二节普通杂质检验

测量供试品和惰性参比物(惯用石英砂、煅制MgO)之间温度差与温度(或时间)关系热分析技术.第三章(二)差示热分析法(differentialthermalanalysis,DTA)145药物的杂质检查专题知识讲座第145页

第三章第二节普通杂质检验供试品发生放热反应温度高于参比物质从而产生吸热峰供试品发生吸热反应温度低于参比物质从而产生放热峰差示热分析法(DTA)曲线146药物的杂质检查专题知识讲座第146页

DTA用途(1)熔点测定第二节普通杂质检验熔程T△T=0第三章147药物的杂质检查专题知识讲座第147页

DTA用途(2)定性和纯度检定——依据峰数目、形状、位置对供试品进行纯度判别第二节普通杂质检验△T=0T第三章供试品对照品148药物的杂质检查专题知识讲座第148页第二节普通杂质检验

测量保持供试品和惰性参比物温度相同,系统所需输给供试品或参比物能量差随温度(或时间)改变热分析技术.第三章(三)差示扫描量热法(differentialscanningcalorimetry,DSC)149药物的杂质检查专题知识讲座第149页第二节普通杂质检验

97.2%98.6%标准品不一样纯度苯甲酸DSC曲线第三章DSC用途：熔点测定、晶型判别和纯度测定——峰在横轴上位置、形状、数目与物质性质相关150药物的杂质检查专题知识讲座第150页药品中水分包含结晶水和吸附水。中国、美国和英国药典收载了费休氏法和甲苯法。费休氏法（卡尔·费休法）（karlfischer）:能够测定结晶水、吸附水和游离水。原理：I2+SO2+H2O→2HI+SO3十一水分测定法

第二节普通杂质检验第三章依据消耗碘量来测定水分含量。151药物的杂质检查专题知识讲座第151页第二节普通杂质检验

第三章1.有机溶剂残留量测定法是用以检验药品在生产过程中引入有害有机溶剂，版药典包含苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷。版有较大修订。2.检验方法中国药典采取气相色谱法检验残留有机溶剂色谱条件：固定相：直径为0.25-0.18mm二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球载气：氮气检测器：氢火焰离子化检测器检测（FID）柱温：80-170℃十二有机溶剂残留152药物的杂质检查专题知识讲座第152页色谱系统适用性试验：中国药典要求，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性试验。（1）用待测物色谱峰计算理论塔板数填充柱应大于1000，毛细管柱应大于5000；（2）用内标法测定时，内标物与待测物色谱峰分离度应大于1.5；（3）用内标法测定时，每个标准溶液（限量待测溶剂与内标液）进样5次，待测物与内标物峰面积之比相对标准偏差应小于5％；若用外标法测定，待测物峰面积相对标准偏差应小于10％第二节普通杂质检验第三章153药物的杂质检查专题知识讲座第153页3.测定法残留溶剂测定有直接进样法（第一法）和顶空进样法（第二法）两种。第一法溶液直接进样法第二法顶空进样法适合用于挥发性大组分，能够防止污染柱子（非挥发性组分）从方法精密度考虑，二氧六环、吡啶宜用第一法；苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，环氧乙烷直接用第二法。

第二节普通杂质检验第三章154药物的杂质检查专题知识讲座第154页色谱条件与系统适用性试验包含以下四项内容。

色谱柱理论塔板数分离度,，要求R＞1.5%③重复性,进样5次，要求RSD＜2%④拖尾因子，其中d1为峰极大至峰前沿之间距离，T应在0.95～1.05

第二节普通杂质检验第三章155药物的杂质检查专题知识讲座第155页小结1、掌握药品中普通杂质检验原理和方法：（1）氯化物检验法：原理及干扰色消除（2）重金属检验法：（a）重金属：指试验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色金属杂质；（b）四种方法之原理及注意事项（3）砷盐检验法（a）古蔡氏法：包含原理及试剂作用（b）Ag-DDC法：原理4、熟悉特殊杂质检验方法识记：杂质限量、干燥失重、炽灼残渣、易炭化物、指示性杂质、重金属。

第二节普通杂质检验第三章156药物的杂质检查专题知识讲座第156页思索题1，药品重金属检验法中，重金属以什么代表？有那几个显色剂？检验方法共有哪几个？（05年版药典一共收载几法）2，简述中国药典对药品中氯化物检验法原理，方法及限量设计公式？3，简述硫代乙酰胺法检验重金属原理和方法

第二节普通杂质检验第三章157药物的杂质检查专题知识讲座第157页第三节特殊杂质检验第三章特殊杂质

是指在该药品生产和储备过程中,依据其生产方法、工艺条件及药品本身结构性质可能引入特有杂质.阿司匹林——水杨酸盐酸普鲁卡因——对氨基苯甲酸158药物的杂质检查专题知识讲座第158页特殊杂质检验法二、化学性质差异一、物理性质差异第三节特殊杂质检验第三章三、光学性质差异四、色谱性质差异159药物的杂质检查专题知识讲座第159页

臭味及挥发性差异颜色差异溶解行为差异旋光性质差异吸附或分配性质差异对光吸收性质差异一物理性质差异第三节特殊杂质检验第三章160药物的杂质检查专题知识讲座第160页第三节特殊杂质检验

2.杂质无挥发性利用药品在室温或加热挥发后,遗留残渣于一定温度加热至恒重,其重量不得超出要求.例：乙醇中不挥发物检验.一物理性质差异第三章(一)嗅味及挥发性差异1.杂质有特殊气味：乙醇中杂醇油（异臭）161药物的杂质检查专题知识讲座第161页第三节特殊杂质检验

药品本身无色生产中引入有色相关物质或分解产物.一物理性质差异第三章例：磺胺嘧啶原料药颜色检验——磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物.(二)颜色差异162药物的杂质检查专题知识讲座第162页第三节特殊杂质检验

依据药品与杂质溶解度差异例：葡萄糖中糊精检验

一物理性质差异第三章(三)溶解行为差异163药物的杂质检查专题知识讲座第163页第三节特殊杂质检验

1.药品有旋光度而杂质没有.例:黄体酮在乙醇中比旋度+186---+198一物理性质差异第三章(四)旋光性质差异2.杂质有旋光度而药品没有.例:硫酸阿托品中莨菪碱检验,供试品水溶液50mg/mL不得过-0.4°164药物的杂质检查专题知识讲座第164页

1酸碱性差异例：苯巴比妥中苯基丙二酰脲检验

甲基橙不得显红色2氧化还原性差异例：氯化物中碘化物检验供试品与含亚硝酸钠淀粉指示剂不得显蓝Cl－氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2.I-氧化电位低(0.53)能被氧化为I2

第三节特殊杂质检验第三章二化学性质差异165药物的杂质检查专题知识讲座第165页

3杂质与一定试剂反应产生沉淀

间苯二酚中邻苯二酚检验.4杂质与一定试剂反应产生颜色

阿司匹林中游离水杨酸测定5杂质与一定试剂反应产生气体

盐酸乙基吗啡中胺盐检验.第三节特殊杂质检验第三章二化学性质差异166药物的杂质检查专题知识讲座第166页第三节特殊杂质检验二化学性质差异例1．阿司匹林中游离水杨酸检验①杂质起源a.生产过程中反应不完全b.贮存过程中阿司匹林水解第三章167