中华绒螯蟹Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因的克隆和功能分析_第1页
中华绒螯蟹Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因的克隆和功能分析_第2页
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文档简介

中华绒螯蟹Na~+-K~+-Cl~-台湾地区广泛分布。本研究通过使用PCR方法从中华绒螯蟹体内克隆了Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因。通过分析其基因序列，我们发Na~+-K~+-Cl~-协同转RNARNATrizolcDNAPrimeScript™RTreagentKit（TaKaRa）cDNAPCRSYBR®PremixExTaq™IIKit（TaKaRa）PCR反应，反应体系中Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因的引物序列是：3′。PCR程序：945min；9430s，5530s，7260s30个周期；72℃10min。克隆和序列分析：PCRpMD™19-TSimple（TaKaRa）DH5α进行克隆。对于含有正确插入序列的克隆子进行测序，并使用BLAST程序进行序列比对和分析。qRT-PCR-K+-C~-1109pN~+-K+-C~-协同转运蛋白基因高度保守。对基因序列进行功能分析，发现该基因具有促进电解质离子的转运和调节电解质平衡的功能。利用转染技术将该基因过表达于中华绒螯蟹细胞中，发现该基因能够提高中华绒本研究成功地克隆了中华绒螯蟹Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因，陶铸郝磊,卢国俊等.中华绒螯蟹养殖技术[J中国水产科学2019,26(3):110-王佳琪边涛涛邱清波Na~+-K~+-Cl~-协同转运蛋白基因的研究进展[J].基因组学与应用生物学,2018,37(6):1615-1622.LiuZ,LiJ,LiuS,etal.MolecularcloningandtissueexpressionpatternsofNa~+-K~+-Cl~-cotransporter(NKCC)andNa~+-Cl~-cotransporter(NCC)inswimmingcrabPortunustrituberc

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