乙肝病毒DNA概述

乙肝病毒DNA知识概述乙肝病毒DNA(HBV-DNA）是乙肝病毒的核心物质和病毒复制的基础（在医学上，病毒的繁殖被称之为“复制”）。病毒的复制是靠DNA的复制来完毕的（DNA指的是脱氧核糖核酸），DNA的浓度越高，病毒的复制越活跃。乙肝病毒DNA检测是判断乙肝病毒复制的惯用手段。普通把数值不不大于10的3次方为阳性，把3-5次方认为是低量复制，5-7为中档量，不不大于7次方为大量。乙肝两对半并不能精确的判断病毒复制状况，DNA弥补了两对半的局限性。但是由于DNA检测技术规定严格，容易受到干扰，因此，一次成果局限性以阐明问题，碰到阳性，能够换医院再次检查。HBV-DNA在病毒DNA携带的遗传基因发出的“批示”下，分别复制出新的病毒外壳和DNA核心，随即重新组装，形成大量的新病毒，释放出来继续感染其它肝细胞。乙肝病毒DNA是HBV感染最直接、特异性强和敏捷性高的指标，HBV-DNA阳性，提示HBV复制和有传染性。HBV-DNA越高表达病毒复制越厉害，传染性强。中国及亚太地区乙肝治疗指家均指出：乙肝病毒的持续复制是乙肝致病的根本因素，乙肝治疗的根本目的是克制病毒复制。复制过程不同于一种真正的生物体，病毒并不通过生长和分裂等方式繁殖本身，而是像锻造机器零件同样，按照一定的（乙肝病毒DNA复制过程）模具拷贝出来的。病毒DNA中包含有某些程序，指导病毒的遗传物质和其它某些构造蛋白组分增殖。另外，病毒DNA中还包含有某些信息，使得单一组分能够在细胞因子的协助下，自发组装成新的病毒颗粒。在复制的过程中，有两个很重要的因素：一种是催化剂，另一种是模板。没有这两个因素，乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒DNA（即HBV-DNA）聚合酶。没有这种聚合酶的作用，乙肝病毒的复制就会停止。乙肝病毒的基因组（HBV-DNA）是由两条螺旋的DNA链围成的一种环形构造。其中一条较长负链已经形成完整的环状；另一条长度较短的正链，呈半环状。在感染肝细胞之后，这条半环状的DNA链就会以负链为模板，在催化剂──HBV-DNA聚合酶的作用下延长，最后形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因组就形成了一种完全环状的双股DNA。把这种DNA称做共价闭合环状DNA（即cccDNA），能够把它看作是病毒复制的原始模板。模板形成后，病毒基因会以其中的一条cccDNA为模板，运用肝细胞基因中的酶和DNA聚合酶的“催化”，一段基因又一段基因地复制，形成负链和正链。最后再装配到一起形成新的HBV-DNA颗粒。具体复制过程复制的第一步：黏附HBV人侵人体后，依靠其外膜(表面抗原，HBsAg)能粘附在肝细胞膜上，固然，粘附的首要条件是HBsAg先要识别肝细胞膜。一旦粘附成功，HBv的外膜也就完毕了它的使命，甩掉了外膜，HBV钻进肝细胞内。复制的第二步：脱壳HBV核心部分来到肝细胞内，在肝细胞浆中还要脱掉它的“核壳”(核心抗原即HBcAG及E抗原即HbEAG)，这样，就暴露出了它最核心部分，即乙肝病毒核酸(HBvDNA)，HBV大有“赤膊上阵”之意。HBV-DNA包涵着乙肝病毒的全部基因，是它主宰着HBv的复制的。复制的第三步：入核HBV-DNA从肝细胞浆内进入肝细胞核，在这里它要进一步发育完善，形成了HBv的“共价闭合环状脱氧核塘核酸”(HBvcccDNA)。这个cccDNA十分了得，它深深藏匿在肝细胞核内，而肝细胞核外面有一层坚韧的核膜，现在全部药品都难以通过这坚韧的核膜，因而对cccDNA也无可奈何，但cccDNA却掌控着HBv全部的遗传信息，指令着HBv的复制。因此．现有的药品想彻底消亡人体内的HBv真比登天还难，这些药品只能克制HBv的繁殖或复制，“全部转阴”也只能是一种幻想。复制的第四步：转录HBV在这一阶段会以cccDNA为“模子”，像录音带似的把HBvcccDNA上的全部信息全都转录到“信息核糖核酸”(mRNA)上。这个转录过程需要人体内的酶类帮忙，由于全部的病毒都不能自己独立生活．必须有生物的机体帮忙，才干完毕这个转录过程。HBv也是这样。在人体酶类的协助下完毕它的复制环节。复制的第五步：翻译在mRNA上已录用了HBv的全部信息，然后就是“翻译”了，其实就是开始制造病毒蛋白。MRNA通过“翻译”过程，可将HBv的多个蛋白制造出来，如HBv的外膜蛋白(HBsAg)、核壳蛋白(HBeAg、HBcAg)、HBv-DNA多聚酶等；至此，HBv的外膜有了，HBv的核壳也有了，这些东西只是零件，飘浮游离着的，尚有重要的HBv最核心部分没有“制造”山来。复制的第六步：逆转录啥叫“逆转录””把HBv的遗传信息从DNA转录到RNA上叫做“转录”，是正常的“顺转录”；而将HBv的遗传信息从RNA上再转录到DNA上，就叫做“逆转录”了。那么，HBv的mRNA上的遗传信息最后就转录成了HBV的DNA，这时，HBv的最核心部分(即HBv-DNA)也算制造完毕。复制的第七步：组装从第五步和第六步的复制看来，HBv的全部零件均已制作完毕，到了第七步也就简朴了，把这些零件进行组装，装配妥了，HBv的复制也算大功告成了。HBv就是这样繁殖或复制的。看起来仿佛挺复杂，其实HBv复制过程是很快的．一种复制周期不到48小时。复制出的下一代HBv或侵入另外的健康的肝细胞，或被释放到血液中去，在人们抽血化验时也就被检测到了。临床意义测HBV-DNA能够决定抗病毒治疗的方案，具体而言，HBVDNA检查的意义在于：①进行慢性乙肝诊疗和分类，②判断与否需要治疗和什么时候开始治疗，③抗病毒治疗过程中的病情监测，④判断治疗后病情的进展，判断与否已经达成临床上的治疗目的。乙肝dna检测数量多普通代表病情发展快速、传染性强，此时需要主动的抗病毒治疗。由于HBV-DNA是乙肝病毒数量最敏捷的指标，是乙肝治疗是判断身体内乙肝病毒数目的一种重要并且关注的指标。因此当出现乙肝dna检测数量多的状况，采用快速有效杀灭乙肝病毒的疗法，能够最大化的实现病情发展减缓，最短时间内改善患者症状，从而实现乙肝的快速治愈。正常值乙肝病毒DNA正常值是多少的测定与检测仪器和试剂有关，现在国内国产试剂是<1000拷贝/ml，进口试剂是<300拷贝/ml。有的阴性检测成果报告为<参考值copies/ml，普通没有具体的数值。但因各家医院的仪器和试剂不同而有变化，应当视化验单上具体给出的参考值而定。但是“每毫升血液中有乙肝病毒多少千个”的成果理解是错误的，拷贝只是一种分子生物定量单位，并非是普通的简朴数量单位。乙肝病毒DNA正常值定量检测阳性（不不大于正常值），阐明乙肝病毒复制活跃，血液中乙肝病毒含量高，乙肝病毒DNA传染性强，且传染性与数值的大小成正比。乙肝病毒DNA正常值定量检测阴性（不大于正常值），阐明乙肝病毒复制得到克制，复制缓慢甚至停止复制，血液中乙肝病毒DNA含量低，乙肝病毒DNA传染性弱。但是应排除误差率，可对此定量检测复检。乙肝病毒DNA正常值是多少只能作为一种重要的参考，不能用乙肝病毒核酸含量简朴、轻率地来解释肝脏实际损害的程度，乙肝病毒DNA正常值是多少只能阐明游离在血液中病毒的含量、乙肝病毒DNA多少、含量高低与病情严重程度没有直接关系，乙肝病毒DNA对肝病专家的诊疗治疗有重要的参考价值，但判断肝脏与否有损伤或损伤的程度应结合临床症状、影像学检查、肝功系列指标和（或）肝活检的成果来综合判断。国际建议的HBV-DNA检测正常值以往乙肝患者抗病毒治疗的指征是：乙肝病毒e抗原阳性（大三阳）患者HBV-DNA数值规定达成10的5次方拷贝/毫升（0U/ml），乙肝病毒e抗原阴性（小三阳）患者HBV-DNA数值规定达成10的4次方拷贝/毫升（U/ml），但是10的4次方拷贝/毫升下列也不能认为就没有问题了，最新的国际研究资料表明：和肝脏疾病进展有关的病毒DNA水平域值尚不清晰，即使HBV-DNA水平持续低于0U/ml，也可能乙肝病毒仍在进一步发展，因此HBV-DNA数值应当越低越好，现在国际建议的HBV-DNA检测正常值应当是：<50U/ml。乙肝病毒DNA的国际单位以往使用的乙肝病毒DNA定量数值都是按照10的N次方拷贝/亳升表达，这给广大患者和医生带来理解理解和换算方面的麻烦，此后将统一HBV-DNA定量单位，应用国际单位/毫升报告成果。国际单位/毫升与过去的拷贝/毫升的换算办法是：1国际单位/毫升≈5.6拷贝/毫升。例如以往10的5次方拷贝/毫升≈现在的0国际单位/毫升，这样HBV-DNA定量数值也和转氨酶等项目采用同样的单位来表达，更易理解和掌握。乙肝病毒DNA阴性乙肝病毒DNA检查是判断乙肝病毒复制活跃程度的最可靠的办法，也是临床进行抗病毒治疗的根据。医生在衡量患者病情时，需要检测血液中与否含有乙肝病毒DNA，看乙肝病毒DNA阴性还是阳性，拟定与否有感染性;并且还要检测一下乙肝病毒的数量，就是鉴定感染性的高低。乙肝病毒DNA正常值是<10的3次方，如果乙肝病毒DNA检查成果低于10的3次方，就结论为乙肝病毒DNA阴性，化验单上写阴性，或“<10的3次方”。乙肝病毒DNA阴性，阐明血液里的乙肝病毒含量较低，体内病毒不活跃，处在低复制或不复制的状态。乙肝病毒DNA仅仅反映病毒的复制状况，与否需要治疗还需要根据肝功效、B超、肝穿刺检查成果综合判断。如果检查发现肝脏有炎症，存在肝纤维化，还是需要主动进行抗病毒和抗纤维化治疗。乙肝病毒DNA阳性乙肝HBV-DNA是乙肝病毒复制的指标，乙肝病毒HBV-DNA阳性提示有病毒复制。HBV-DNA的含量高低，提示病毒复制与否活跃。现在实验室检测下限是500/ml。此项指标与乙肝五项，肝功效，肝胆脾B超，血常规等，作为乙肝患者和乙肝病毒携带者病情的重要参考指标，对于拟定治疗计划以及评价疗效，特别是抗病毒治疗，有重要意义。乙肝病毒DNA阳性意味着什么乙肝病毒是一种部分双链DNA(核酸)病毒，也就是说它的遗传物质是DNA，它载有病毒全部遗传信息，乙肝病毒靠它才能够复制、增殖、繁衍后裔。研究证明，乙肝病毒的裸DNA(没有蛋白质包裹DNA)就有感染性，完毕对宿主的侵袭，造成宿主体内出现完整的乙肝病毒颗粒。也就是说乙肝病毒DNA相称于完整的乙肝病毒颗粒。因此，如果体内检测到乙肝病毒DNA，不管别的乙肝标志物如何(阳性或阴性)，此人就能够拟定为乙肝病毒感染者，其血液及体液含有较强的传染性。若转氨酶再升高就是乙肝患者，需要保肝、降酶、抗病毒治疗。其亲属最佳注射乙肝疫苗以产生保护性抗体以免被传染。乙肝病毒DNA与两对半的区别病毒病毒DNA病毒载量测定是对病毒直接的、定量的检查。“两对半”检查是乙肝病毒血清标记物检查的俗称，通过“两对半“的检测，能够间接理解乙肝病毒的存在和复制状况，是一种定性检查。如“两对半”中的HBeAg是间接反映病毒复制的指标，HBeAg转阴往往提示了病毒复制减少和病情的好转，但是也有相称一部分乙肝患者的HBeAg检查为阴性，但是病毒仍然复制活跃，病毒载量和肝脏的炎症活动度仍然很高，这就是HBeAg阴性慢性乙肝（也称为隐匿性乙肝），可能是由于病毒发生了变异造成的。这时，只有检测HBV-DNA病毒载量才干理解病毒的实际复制状况，进行对的的诊疗和治疗。乙肝病毒DNA检测有什么意义乙肝病毒DNA检测的意义重要有三：1.乙肝病毒DNA的定性和定量的检核对医生的诊疗和用药非常重要，现在医学界普遍认为抗病毒治疗来减少血清乙肝病毒DNA的含量是治疗乙肝的核心，乙肝病毒DNA检测可判断乙肝患者适合用哪类抗病毒药品;检测乙肝病毒DNA可观察抗病毒药品治疗的疗效及鉴定预后效果;可根据乙肝病毒DNA量的动态变化在临床上对用药的剂量、用药时间、与否需要联合用药以及用药的效果等提供重要的参考根据，是评价抗病毒或免疫增强药品疗效的最客观的指标。2.乙肝病毒DNA测定是直接反映HBV复制状态及传染性的最佳指标，在乙肝的病程治疗中起到了一种重要的作用，乙肝病毒DNA的含量能直接反映病毒在体内存在的数量、与否传染，传染性有多强。即乙肝病毒DNA含量越高，阐明体内病毒越多，病毒复制越活跃，显然其传染性也越强。但是需要阐明的一点是：乙肝病毒载量的多少并不代表肝脏的损伤程度，也不能因此判断病情的严重程度。3.乙肝病毒DNA反映着病毒复制的活跃程度，也在间接地反映机体的免疫应答水平，体内病毒含量越高，机体针对乙肝病毒的免疫反映就越弱。乙肝病毒DNA测定成果与血清免疫学成果的综合评价，对于机体乙肝病毒感染状态特别变异株发生和乙肝患者的预后的评定更为科学。如何看乙肝病毒DNA检测报告乙肝病毒DNA的检查重要是定性和定量的检查。1)定性，即拟定是阴性还是阳性。乙肝病毒DNA的正常值为阴性，即乙肝病毒DNA<1x10的3次方拷贝/ml。定性测得的阳性普通阐明病毒容易传染给别人，阴性阐明不容易传给别人。对于乙肝大三阳来说，由于乙肝病毒e抗原(HBeAg)是阳性，因此乙肝病毒-DNA也是阳性的，表达乙肝病毒-DNA>1x10的3次方拷贝/ml，这时体内的乙肝病毒复制活跃。2)定量，即检测乙肝病毒在血液中的含量。定量检测成果重要是对抗病毒治疗提供检测和疗效参考。由于成果是数字的，而不是“高/低”、“阴/阳”、“正常/不正常”，因此看起来比较麻烦。拟定正常值指标一定要懂得所做实验的参考范畴。参考范畴因检测仪器、办法、试剂的不同而有差别。荧光定量PCR法，是最惯用的检测乙肝病毒DNA的办法，能反映血液中乙肝病毒DNA存在的多少，乙肝病毒DNA检测报告单上的单位普通为“Ax10nCopies/ml(拷贝/毫升)”，表达每毫升的血清中病毒基因组的个数，该数据越大，表明病毒在人体内的复制越活跃。例如“乙肝病毒-DNA=5.1×103Copies/ml”代表每毫升血清中有5100个乙肝病毒。判断血清中病毒含量重要看上式中的“10n”，n越大，表达含量越高。在抗病毒治疗过程中，n变小阐明病毒的复制得到控制，治疗有效。普通，如果病毒含量下降至n<3，阐明病毒基本得到控制。治乙肝为什么检测病毒DNA由于乙肝两对半并非乙肝病毒的传染物质和致病物，换句话说不是活的乙肝病毒，因此检查乙肝两对半只反映了患者与否感染过乙肝，却不能直接地、动态地提示乙肝病毒在人体内的复制和致病状况，因此这种检查技术不能反映和量化乙肝病毒在体内复制，也不能对的指导临床用药和制订治疗方案。为寻找一种对的合理的病毒量化指标，经数年研究，终于找到了一种能够反映乙肝病人体内的HBV基因量化法——即HBV-DNA定量实验。所谓HBV-DNA(翻成中文即“乙肝病毒脱氧核糖核酸”)就是乙肝病毒的基因。乙肝病毒基因是含有遗传信息的物质，它是复制子代乙肝病毒的基础。因此，理解了HBV-DNA在患者体内的消长状况，就间接地搞清了乙肝病毒的复制状况。现在肝病医师为患者作HBVDNA定量实验，正是临床用药和制订治疗方案的需要。如果在治疗中发现乙肝病毒的量(即HBV-DNA定量值)在下降，阐明抗病毒治疗有效。反之，如果在治疗中发现乙肝病毒的量在上升，阐明抗病毒治疗无效，需要重新选药和调节治疗方案。对的理解乙肝病毒DNA数值乙肝病毒DNA定量为4×10的5次方copies/ml，不能解释为血液中每亳升含有乙肝病毒40万个，拷贝数是运用DNA信号扩增技术，由计算机算出血液中乙肝病毒核酸的含量，拷贝数是一种分子生物定量单位，不是简朴的数量单位。拷贝数高，阐明病毒核酸含量高。由于肝脏组织中的乙肝病毒每时每刻释放到血液中的数量都在变化之中，每天检测血液中的乙肝病毒核酸含量都不相似，不能简朴用乙肝病毒核酸含量解释乙肝治疗效果。另外乙肝病毒核酸的检测敏捷性高，特异性强