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文档简介
琼脂糖凝胶电泳甘肃中医药大学2电泳技术带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis,EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1809年俄国物理学家Peнce首先发现了电泳现象,但直到1937年瑞典学者A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪,分离了马血清白蛋白的3种球蛋白,创建了电泳技术。一、实验目的1.掌握电泳的基本原理;2.熟悉琼脂糖凝胶电泳技术;
3.了解凝胶成像电泳图谱。二、实验原理
琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,可以形成具有刚性的滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。M1234PCR产物的琼脂糖凝胶电泳核酸电泳仪,电泳槽,电子天平,移液器,枪头,微波炉,紫外透射检测仪等。琼脂糖,溴化乙锭(EB),6×加样缓冲液三、实验材料、器具及药品四、实验步骤1
制胶:
60ml(0.5×TBE)+0.72g琼脂糖三角瓶(1/3)煮胶溶解,冷却至60℃(不烫手),加EB,倒板(4-6mm),室温下充分凝固,竖直拔下梳子
2
点样:3电泳:电压3-5V/cm,约80-90V,注意电极方向4观察:紫外透射分析仪下观察,时间不要太久
图1基因组DNA1%琼脂凝胶电泳图
图2
PCR产物琼脂凝胶电泳图
(1、2、3、4为PCR产物,M为DL2000Marker)Thankyou!人有了知识,就会具备各种分析能力,明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书,广泛阅读,古人说“书中自有黄金屋。”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识,培养逻辑思维能力;通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平,培养文学情趣;通过阅读报刊,我们
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