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文档简介

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体学习目标:1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物|学等手段.使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。3.收集单克隆抗体在临床上实际应用的资料,并进行交流分享。学习内容:一、动物细胞融合技术1.定义:使个或个动物细胞结合形成个细胞的技术。2.结果:融合后形成的杂交细胞具有原来个或个细胞的遗传信息。3.原理:。4.诱导融合常用的方法:、、。(1)法是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。(2)不灭活的病毒会细胞,因而不能用于诱导细胞融合。(3)与植物原生质体融合方法对比,诱导动物细胞融合的特有方法是。5.特点:突破了的局限,使成为可能。6.动物细胞融合技术涉及的变异类型是。7.应用(1)间、属间、科间,甚至动物与植物之间的细胞融合都已获得了成功。(2)动物细胞融合技术已成为研究细胞、细胞、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(3)利用动物细胞融合技术发展起来的技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。二、单克隆抗体及其应用1.常规抗体与单克隆抗体(1)常规抗体①产生:抗体的传统生产方法是向动物体内反复注射,使动物产生抗体,然后从动物中分离所需抗体。②缺点:产量、纯度,制备的抗体特异性。(2)单克隆抗体①产生:由单一细胞增殖产生的单一。②优点:能准确地识别的细微差异,与发生特异性结合,并且可以。2.单克隆抗体的制备(1)技术手段:和。(2)原理:和。(3)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因①每一个B淋巴细胞只分泌抗体,但一个B淋巴细胞在体外培养条件下无限增殖。②骨髓瘤细胞能在体外,但。③将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,得到的融合细胞能,并产生足够。(4)制备过程①免疫处理提供B淋巴细胞的动物必须预先注射进行免疫处理,获得能产生的B淋巴细胞。②诱导融合将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞用、、。其中法是动物细胞融合特有的诱导方式。③通过筛选获得杂交瘤细胞用特定的培养基进行筛选:在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有的细胞才能生长。④通过筛选获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞对上述经选择培养的细胞进行和检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需的细胞(抗体检测呈性的杂交瘤细胞)。⑤获取单克隆抗体的场所若在细胞培养液中进行杂交瘤细胞培养,则从中提取;若在小鼠或其他动物腹腔中培养,则从中提取。(5)单克隆抗体的应用①被广泛用作,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。如:用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”.在妊娠第8天就可以做出诊断,且准确率高达90%以上。又如:利用或的单克隆抗体在特定组织中成像的技术,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。②可以运载抗体——药物偶联物(ADC)通过将与能特异性识别肿瘤抗原的结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。③自身也可用于治疗疾病。答案一、1.两多一2.两多3.细胞膜的流动性。4.PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法(1)灭活病毒诱导(2)感染(3)灭活病毒诱导法5.有性杂交使远缘杂交6.染色体数目变异7.(1)种(2)遗传免疫(3)杂交瘤二、1.(1)①某种抗原血清②低低差(2)①杂交瘤细胞特异性抗体②抗原特定抗原大量制备2.(1)动物细胞融合动物细胞培养(2)细胞膜的流动性细胞增殖(3)①一种特异性不能②大量增殖产生抗体③大量增殖数量的特定抗体(4)①特定的抗原特定抗体

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