肝功能检验课件

肝功能检验肝脏疾病的检查手段B超、CT、MRI、血管造影、核素扫描、腹腔镜肝功能试验肝功能试验（为了解肝脏功能状态而设计的实验室检查方法）肝脏结构肝脏的生化功能及其检测肝功能试验选择原则和评价本章内容肝脏结构肝脏的生化功能及其检测肝功能试验选择原则和评价肝脏结构（一）解剖学特点（提供氧）

（提供营养）

（代谢降解物经此注入下腔静脉）

（脂溶性物质及其代谢产物由此排至肠道）双重输出渠道肝静脉胆道系统肝动脉肝总管门静脉（双重血液供应）肝动脉门静脉双重输入渠道（二）肝脏的显微结构特点1、组织结构50~100万个肝小叶丰富的肝血窦肝细胞表面有大量微绒毛肝细胞膜通透性大2、亚细胞结构丰富的线粒体：是物质氧化供能的场所大量的内质网和核糖体：脂类代谢和蛋白质合成的场所大量的微粒体：是许多与生物转化的场所大量的高尔基复合体和溶酶体：与物质的转运和排泄及细胞的溶解和坏死有关。（三

）细胞的再生肝脏具有很强的再生、代偿能力当部分肝细胞被破坏的同时，剩余的正常细胞能通过代偿性增生、替代和补偿作用，以维持肝脏的正常活动及功能。当肝细胞的损害比较严重而且广泛，才会引起明显的肝功能异常（失代偿）肝脏结构肝脏的生化功能及其检测肝功能试验选择原则和评价肝脏的生化功能及其检测在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能肝细胞能合成种类丰富的酶类肝脏合成的酶类，除少部分分泌到血浆外,大部分存在于细胞内,进行各种物质代谢,这是肝脏具有“物质代谢中枢”之称的物质基础。反映肝脏功能的血清酶学指标反映肝细胞合成功能：ChE、LCAT反映肝细胞实质病变：ALT、AST反映胆道阻塞病变：ALP、GGT反映肝纤维化病变：MAO（活性↓）（活性↑）（活性↑）（活性↑）在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能肝脏在糖代谢中的作用维持血糖浓度的恒定糖原合成糖异生糖原分解肝功能障碍：调控血糖能力降低：空腹低血糖、饭后高血糖糖有氧氧化及三羧酸循环运转失常→血中丙酮酸↑

糖耐量降低、肝源性糖尿病反映肝脏糖代谢功能的常用指标：血糖测定和糖耐量试验等在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能肝脏在脂代谢中的作用（肝功能受损：厌油腻、脂肪泻）分泌胆汁，其中胆汁酸为脂类消化吸收所必需甘油三酯、脂肪酸、酮体、胆固醇、磷脂脂肪酸的β氧化、胆固醇的降解与排泄消化吸收：脂类合成：脂类分解：脂类运输：合成VLDL、HDL（肝功能受损：脂肪肝）类别检测指标临床意义脂类代谢血清总胆固醇（TC）肝细胞受损↓；胆道梗阻↑；脂肪肝↑血清甘油三酯（TG）肝细胞受损↓；胆道梗阻↑；脂肪肝↑血清HDL-C肝细胞受损↓；胆道梗阻↓；脂肪肝↓血清LDL-C肝细胞受损↓；胆道梗阻↑；脂肪肝↑载脂蛋白AI肝细胞受损↓；胆道梗阻↓；脂肪肝↓载脂蛋白B肝细胞受损↓；胆道梗阻↑；脂肪肝↑脂蛋白－X胆道梗阻时出现（正常为阴性）反映肝脏的脂类代谢功能的检测指标脂蛋白-X（LP-X）测定

[概述]Lp-X为胆汁淤积时出现的异常脂蛋白，脂蛋白电泳时向阴极泳动为其特性，是胆汁淤积诊断的重要生化指标。Lp-X测定的方法有电泳法，沉淀分离化学测定法和超速离心法。

[参考值范围]定性为阴性；定量<140mg/L[临床意义]

1．阻塞性黄疸的诊断血清LP-X阳性有助于阻塞性黄疸的诊断。2．肝内、外阻塞的鉴别诊断

LP-X的定量与胆汁淤积程度相关，肝外阻塞比肝内阻塞引起胆汁淤积程度严重，一般认为其定量>2000mg／L，提示肝外胆道阻塞。在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能（一）肝脏在蛋白质合成代谢中的作用：肝脏可合成多种血浆蛋白质肝脏在蛋白质代谢中的作用反映肝脏蛋白质合成代谢功能的常用指标TP

Alb

G

A/GPA血清蛋白电泳凝血酶原纤维蛋白原肝功能受损：血浆蛋白质的含量及种类发生改变（早期及轻度受损其变化不明显）RBP（比Alb更敏感）（比PA更敏感）氨基酸的各种代谢（脱氨基作用、脱羧基作用等）清除血氨（合成尿素）及胺类（二）肝脏在蛋白质分解代谢中的作用：血氨0.06mmol/l氨基酸脱氨基肾脏产氨在肝脏合成尿素合成谷氨酰胺合成非必需氨基酸及其他含氮化合物肠道产氨肝功能受损：高血氨、氨中毒（肝性脑病）昏迷肝功能严重受损干扰脑组织的能量代谢尿素合成障碍血氨浓度升高进入脑组织大脑功能障碍反映肝脏蛋白质分解代谢功能的常用指标：血氨、尿素血氨测定血氨NH3NH4＋【标本采集】1、防止吸烟对血氨测定的干扰2、防止标本和器材受实验室空气氨的污染采血前一天晚上应禁止吸烟；严重吸烟患者，采血前必须淋浴，穿上干净睡衣裤。采血医务人员也必须为非抽烟人员。最好在特设实验室内采集标本和样品测定，器皿最好经过去氨处理。采血后立即置冰水浴，尽快离心分离出血浆，并及时测定。

3、防止标本中含氮化合物分解（久置的血液会使血氨急剧升高）4、红细胞氨浓度是血浆的2.8倍，故标本应禁止溶血。血氨测定标本不能用血清标本，而要用血浆标本，可用EDTA、草酸钾或肝素抗凝剂，不能用肝素铵和氟化物抗凝剂，后者可使测定值升高。

【测定方法】扩散法酶法(谷氨酸脱氢酶法)氨离子选择性电极法离子交换法GLDHNH4++α-酮戊二酸+NADPH谷氨酸+NADP++H20谷氨酸脱氢酶法用紫外分光光度计340nm波长监测NADPH吸光度下降速率（△A)，即NADPH消耗速率，与标准管比较，可计算出血浆氨含量。原理：参考范围血浆氨：18-72μmol/L成人血浆氨测定主要用于肝昏迷的监测和观察。对有严重肝功能障碍的患者是否能进食高蛋白饮食,以补充营养,也需测定血氨来加以判断。因此,临床上也常用血氨测定作为严重肝功能障碍患者肠道补充高蛋白饮食的控制和观察指标。临床意义在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能肝在维生素代谢中的作用吸收：储存：运输：转化：肝分泌胆汁酸，可促进脂溶性VitA、D、E、K

的吸收肝是VitA、E、K和B12的主要储存场所合成视黄醇结合蛋白及VitD结合蛋白VitD3→25-(OH)-VitD3水溶性维生素→辅酶或辅基的组成成分胡萝卜素→VitA（肝功能受损：维生素代谢障碍）在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能肝在激素代谢中的作用激素的灭活：激素主要在肝中转化、降解或失去活性的过程主要方式---生物转化

（肝功能受损：雌激素↓肝掌、蜘蛛痣）在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能能够合成多种酶在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的排泄功能生物转化(biotransformation)----机体对内、外源性的非营养物质进行代谢转变，使其极性增强或活性改变，而易于通过胆汁或尿液排出体外的过程。（一）部位：肝（二）对象：内源性非营养物质：氨、胆红素、激素、神经递质外源性非营养物质：药物、毒物、食品添加剂、环境污染物（三）反应类型两相反应第一相反应：第二相反应：氧化、还原、水解结合（主要方式）非营养物质（五）生物转化的特点1、多样性2、连续性3、解毒和致毒的双重性（四）影响因素年龄、性别、肝疾病、药物等（六）生物转化的生理意义主要是使非营养物质的极性（水溶性）增高，易于从胆汁或尿液中排除体外；使一些非营养物质的生物学活性降低或消除（灭活作用，如激素）或使有毒物质的毒性减低或消除（解毒作用）生物转化作用≠解毒作用。在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能肝脏的排泄功能能够合成多种酶肝胆汁胆囊胆汁胆汁酸(含量最高)胆色素胆固醇磷脂蛋白质胆汁的主要有机成分：肝脏在胆汁酸代谢中的作用（一）胆汁经胆管系统排入肠道进入胆囊初级胆汁酸胆汁酸的分类次级胆汁酸游离结合游离结合（二）胆汁酸胆固醇7α-羟胆固醇7α-羟化酶游离型甘氨酸、牛磺酸甘氨胆酸牛磺胆酸甘氨鹅脱氧胆酸牛磺鹅脱氧胆酸结合型初级胆汁酸胆酸鹅脱氧胆酸初级胆汁酸的生成（肝）胆汁酸的代谢初级胆汁酸：在肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸，包括胆酸、鹅脱氧胆酸及其与甘氨酸或牛磺酸的结合产物。游离型初级胆汁酸（游离、结合）肠道细菌次级胆汁酸脱氧胆酸石胆酸甘氨酸、牛磺酸甘氨脱氧胆酸牛磺脱氧胆酸甘氨石胆酸牛磺石胆酸结合型次级胆汁酸的生成次级胆汁酸：在肠道受细菌作用，第7位α羟基脱氧生成的胆汁酸称为次级胆汁酸，主要包括脱氧胆酸和石胆酸及其分别与甘氨酸或牛磺酸的结合产物。肝胆汁酸胆固醇肠道胆道系统胆汁酸初级游离胆汁酸初级结合胆汁酸次级游离胆汁酸门静脉95%肠粘膜重吸收游离结合意义：使有限的胆汁酸反复利用，补充肝合成的胆汁酸能力的不足和人体对胆汁酸的生理需要胆汁酸的肠肝循环胆汁酸的生理功用（1）促进脂类的消化吸收。（2）抑制胆汁中胆固醇的析出。立体构型——亲水与疏水两个侧面（较强的乳化剂）疏水侧亲水侧甘氨胆酸的立体构型肝功受损：胆汁酸代谢障碍1、胆汁酸合成障碍2、胆汁酸向肠道排出障碍3．胆汁酸肠肝循环紊乱4．胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱血清胆汁酸测定高效液相色谱法放射免疫分析法酶免疫分析法比色分析测定法测定方法(1)酶比色法测定原理3α-HSD胆汁酸+NAD+3-氧-5β类固醇+NADH（1）

NADH+NBT蓝色化合物λ=540nm（2）

3-氧-5β类固醇+NAD+3-氧-5β类固醇+NADH（3）黄递酶△4-DH酶比色法由于胆汁酸在血中含量低，方法检测的灵敏度达不到要求，通过增加3-氧-5β-类固醇脱氢酶(△4-DH)，胆汁酸经3α-HSD催化的产物3-氧代胆酸在△4-DH作用下再次脱氢，加大了NADH的生成量，提高了反应的检测能力（见反应式1、2、3）。但以上两种方法都存在一个缺点：生成的蓝色产物是一种染料，易于附着管壁，难于清洗或堵塞管道。酶循环法测定原理为：NAD+

Thio-NADThio-NADH胆汁酸3-氧代胆汁酸NADH3α-HSD(2)酶比色测定法评价：快速、简便、准确、可靠和适用的优点。它即可以手工操作、也可以在自动化仪器上进行。但试剂价贵、不易保持。对酶量的要求严格，以保证酶促反应在零级反应下进行，酶量不足易产生误差。此外，标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品。

【参考范围】1～7µmol/L

(成人空腹血清总胆汁酸)【临床意义】

任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高可见于各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也见于急慢性胆道阻塞。其中空腹胆汁酸测定是一种敏感、特异性强并相对简单的肝功能试验，是目前公认最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病但其它生化试验正常或轻度异常的病人诊断。在糖代谢中的作用在脂代谢中的作用在蛋白质及氨基酸代谢中的作用在维生素代谢中的作用在激素代谢中的作用在胆汁酸代谢中的作用在胆红素代谢中的作用肝脏的生物转化功能肝脏的物质代谢功能肝脏的排泄功能能够合成多种酶

胆色素是体内铁卟啉化合物的主要分解代谢产物。胆绿素胆红素胆素原胆素种类（一）胆红素的生成来源：80%来自于衰老RBC中血红蛋白的分解部位：单核-巨噬细胞系统过程：衰老红细胞被吞噬单核巨噬细胞血红蛋白珠蛋白血红素血红素加氧酶胆绿素CO、Fe3+NADPHO胆绿素还原酶胆红素NADPH（未结合胆红素）胆红素是疏水亲脂性物质（二）胆红素的运输增加了胆红素的水溶性有利于运输限制了胆红素自由通透生物膜，避免对细胞造成毒性分子量变大,不能从肾小球滤过随尿排出运输形式：胆红素-清蛋白复合体意义:胆红素+清蛋白胆红素-清蛋白血液（未结合胆红素）（δ胆红素）胆红素肝细胞（三）胆红素在肝内的代谢胆红素-清蛋白清蛋白Y蛋白Z蛋白胆红素-Y蛋白胆红素-Z蛋白UDPGAUDP胆红素-GA（结合胆红素）进入肠道排泄摄取结合（摄取、结合、排泄）肾脏肠道胆红素-GA（结合胆红素）（四）胆红素在肠道中的转化及肠肝循环（黄褐色)肝胆素原细菌水解GA胆红素（未结合胆红素）细菌还原胆素原20%肠粘膜重吸收粪胆素80%氧化排出体外肠肝循环尿胆素原尿胆素氧化(浅黄色)排出体外尿液进入胆道大部分体循环小部分同义名称与葡糖醛酸结合水溶性细胞膜通透性及毒性经肾随尿排出与重氮试剂反应两种胆红素的比较未结合胆红素（游离胆红素）结合胆红素血胆红素肝胆红素间接胆红素直接胆红素未结合结合小大大小不能能间接阳性直接阳性（五）血清胆红素及黄疸血清总胆红素=间接胆红素+直接胆红素（TB）（IB）（DB）正常人血清TB<17.1μmol/L，IB占4/5，其余为DB黄染的现象。黄疸：血清中胆红素增高所出现的皮肤、粘膜、巩膜等组织TB：17.1-34.2μmol/L（隐性黄疸）TB：>34.2μmol/L（显性黄疸）各种原因引起的红细胞大量破坏各种原因引起胆道阻塞各种原因引起肝细胞损伤黄疸分为三大类*溶血性黄疸*阻塞性黄疸*肝细胞性黄疸（肝前性）：（肝后性）：（肝性）：三种黄疸的鉴别溶血性黄疸阻塞性黄疸肝细胞性黄疸正常人血液尿液粪便颜色类型未结合胆红素结合胆红素胆红素胆素原有无或极微无少量棕黄色增加增加增加增加不变或微增不变或微增无有有显著增加减少或无不定加深变浅或陶土色变浅吞噬细胞衰老红细胞Hb珠蛋白血红素胆绿素血红素血红素加氧酶（O2，NADPH）CO、Fe2+胆红素胆绿素胆绿素还原酶NADPH未结合胆红素胆红素+清蛋白胆红素-清蛋白胆红素-GA葡萄糖醛酸胆素原门静脉80%胆素20%体循环胆道系统肠道胆红素-Y蛋白胆红素-Z蛋白UDPGA胆红素-GA（结合胆红素）血清胆红素测定重氮盐法胆红素氧化酶(bilirubinoxidase,BOD)法高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、导数分光光度法直接分光光度计法测定方法1．重氮盐改良J-G(JendrassikandGrofmethod,J-G)法(1)原理:(2)方法评价：推荐的常规方法，其方法的线性范围较宽，在342µmol/L(200mg/L)浓度下有较好的准确性和精确性，高浓度时准确性和精确性降低。因此，建议浓度过高时减少血样用量测定。【临床意义】【参考范围】

2.黄疸的鉴别诊断总胆红素:5.1～19.0μmo