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第十单元生物技术与工程第34讲

细胞工程植物细胞工程01动物细胞培养02动物细胞融合技术与单克隆抗体03动物体细胞核移植技术和克隆动物04目录考点三动物细胞融合技术与单克隆抗体03指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。(4)结果:形成杂交细胞。即融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。(2)原理:细胞膜具有一定的流动性细胞增殖(3)诱导方式物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)生物法:灭活的病毒诱导法与植物原生质体融合的方法相同——动物细胞融合特有(1)概念:1、动物细胞融合技术①突破有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功;③利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞(5)意义:1、动物细胞融合技术②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段;2、单克隆抗体及其应用(1)制备原理:①B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。②骨髓瘤细胞特点:能在体外大量增殖。③杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。用抗原注射小鼠从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养已免疫B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合多种杂交细胞小鼠的脾脏中获取2、单克隆抗体及其应用(2)制备过程:克隆化培养抗体检测第二次筛选(抗原-抗体杂交技术)多种杂交瘤细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性细胞多孔细胞培养板每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞抗体检测板阳性孔2、单克隆抗体及其应用(2)制备过程:注射到小鼠体内体外培养分离、提纯单克隆抗体能分泌所需抗体的杂交瘤细胞细胞培养工程师在工作体内或体外培养2、单克隆抗体及其应用(2)制备过程:2、单克隆抗体及其应用(3)单克隆抗体的特点和应用①特点:准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特性结合,并且可以大量制备②应用:作为诊断试剂,用于疾病诊断和病原体鉴定作为运载药物的载体用于治疗疾病【概念辨析】1.植物原生质体融合与动物细胞融合的原理是相同的。(

)2.杂交瘤细胞进行体内培养,更容易控制培养条件。(

)3.制备单克隆抗体时,要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞。(

)4.灭活的病毒能促进动物细胞融合,但不能促进植物细胞融合。(

)5.杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。(

)√√×√√植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜的流动性植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁分散成单个细胞后诱导细胞融合电融合法、离心法;聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能1、比较植物体细胞杂交和动物细胞融合2、单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因筛选方法筛选目的诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“B—B”细胞、“瘤—瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B—瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞考法1围绕动物细胞融合,考查生命观念和科学思维能力1.下列关于动物细胞融合的说法,不正确的是()A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程B.细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能D.常用的诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法、灭活的病毒诱导法和紫外线照射等D考法1围绕动物细胞融合,考查生命观念和科学思维能力2.(2022·广东云浮期末)下列关于动物细胞融合技术及其意义的叙述,错误的是()A.融合后的动物细胞具有原来两个或多个动物细胞的细胞核B.灭活病毒可以诱导动物细胞融合与病毒表面的糖蛋白有关C.动物细胞融合后的杂交细胞在体外培养时可加入CO2以维持培养液pH的稳定D.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,动、植物细胞也可以融合AA.免疫的B淋巴细胞虽然可进行补救合成途径,但由于高度分化,不能在HAT培养基上增殖B.骨髓瘤细胞及其相互融合细胞在HAT培养基上无法进行上述途径,因而不能增殖C.杂交瘤细胞在HAT培养基上可同时进行上述两个途径,因此能大量增殖D.HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞,不一定都能产生所需的抗体考法2结合单克隆抗体及其应用,考查科学探究能力和社会责任3.(2022·河北廊坊期末)如图,核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T3种物质的“HAT培养基”筛选出杂交瘤细胞。下列有关叙述错误的是()CA.注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞B.经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞C.可将细胞毒素与单克隆抗体结合实现对肿瘤细胞的特异性杀伤D.该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体能与多种抗原结合考法2结合单克隆抗体及其应用,考查科学探究能力和社会责任4.(不定项)(2022·河北承德期末)类风湿性关节炎是一种病因未明的以炎性滑膜炎为主的慢性系统性疾病。经研究发现,该病与TNF­α(肿瘤坏死因子­α)密切相关,有效治疗类风湿性关节炎可以使用注射抗TNF­α单克隆抗体的办法,该单克隆抗体制备的过程如图所示。下列说法正确的是(

)ABC考法3围绕单克隆抗体制备的应用,考查社会责任5.(2022·山东卷)如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是()A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞D考法3围绕单克隆抗体制备的应用,考查社会责任6.(2022·辽宁实验中学期末)抗体—药物偶联物(ADC)是将高特异性的单克隆抗体和小分子药物,通过接头进行高活性结合而成,用以提高肿瘤药物的靶向性,减少毒副作用。下图是ADC作用原理,下列叙述正确的是()CA.ADC中的单克隆抗体是杀死肿瘤细胞的有效成分B.ADC与肿瘤细胞识别后,被肿瘤细胞以协助扩散的方式吸收进入细胞C.接头既要在内环境中保持稳定,又能在细胞内被断开D.ADC进入肿瘤细胞后会被溶酶体分解,从而丧失药物活性1、有关动物细胞融合的叙述不正确的是()A.使远缘杂交成为可能B.杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息C.其基本原理是细胞膜的选择透过性D.为制造单克隆抗体开辟了新途C2、用动物细胞工程技术制备单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用氯化钙作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体D.该杂交瘤细胞的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体B作业3、下列不属于单克隆抗体在实践上应用的实例是()A.制成“生物导弹”,将药物定向地带到癌细胞所在部位B.利用同位素标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病C.利

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