发酵豆粕常见指标检测方法

本页仅作为文档封面，使用时可以删除本页仅作为文档封面，使用时可以删除Thisdocumentisforreferenceonly-rar21year.March发酵豆粕常见指标检测方法(GB/T6432)一、原理：化成硫酸铵。参加强碱进展蒸馏使氨逸出，用硼酸吸取后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。二、仪器设备：高速粉碎机，粉碎时间1分钟。40目分析天平；感量消化炉滴定管；酸式50mL三、试剂硫酸：含量98%40%水溶液〔m/V〕〔m/V〕混合催化剂：硫酸铜(5个结晶水)，6g硫酸钾或硫酸钠，磨碎混匀。混合指示剂：甲基红%乙醇溶液，溴甲酚绿%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。mL1000mL蒸馏水中。270-3002hNaCO350mL10滴混合2min，冷却(水中)后再滴至暗红色，同时作空白计算：m×1000C=(V1-V2)M1式中:C——硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度〔mol/L〕m——无水碳酸钠的质量，gV1——盐酸溶液的用量，mLV2——空白试验盐酸溶液的用量，mL〔g/mol〕〔M(1/2NaCO3)=〕蔗糖硫酸铵：分析纯，枯燥四、分析步骤：〔国标推举法〕试样的消煮12mL4203小时。冷却后，参加蒸馏水20ml，待用。氨的蒸馏；25mL硼酸为吸取液，2-3滴混合指示剂，蒸馏装置的冷凝管末端要浸入装有吸取液的锥形瓶内，然后向消化管中参加氢氧化钠溶液，以溶液变黑为宜，即当生成黑色的氢氧化铜时，加碱量已够。假设加碱量缺乏或过量，分解液呈蓝色而不显黑色，假设加碱不够，需再增加氢150mL以上时为宜，降下锥形瓶，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内。滴定：用L的标准盐酸溶液滴定吸取液，溶液由蓝绿色变淡紫色为终点。空白测定：L的标准盐酸溶液的体积L的标准盐酸溶液的体积不得超过。

V-V1 0

HCl

6.250.014

100m1式中：V——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mL1mLCHCL——盐酸标准溶液浓度，mol/L22m——试样质量，g——每毫克当量氮的克数——氮换算成蛋白质的平均系数水分检测(GB/T6435—2023)一、适用范围：奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。二、原理：三、试剂和仪器设备：高速粉碎机，粉碎时间1分钟。分析筛孔径〔60目〕。〔烘箱〕105±2℃40mm以上,25mm以下四、试样的选取和制备：1000g500g，风40200g，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。200～300g，10515min655～6h。取出后，在室内空气中冷却4h，称重，即得风干试样。分析步骤：1031h30min，称准至，30min，同样冷却，称重，直至两次重量之差小于为恒重。2～〔4mm以105℃烘箱内烘，取出，盖好称样皿盖，在枯燥器30min，称重。五、计算3〔%〕按下式计算：〔%〕＝

W1－W2W1－W0

×100%W1——105℃烘干前试样及称样皿重，gW2——105℃烘干后试样及称样皿重，gW0——已恒重的称样皿重，g粗灰分检测(GB/T6438)一、原理：类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。二、仪器设备：高速粉碎机：粉碎时间1分钟。分样筛：孔径〔60目〕分析天平：感量550±20℃坩埚：瓷质，容积50mL枯燥器：用氯化钙〔枯燥试剂〕或变色硅胶作枯燥剂三、试样的选取和制备：40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。四、分析步骤：550±230min。取出，在空气中冷却约30min，称其质量。再重复灼烧、冷却、称量，直至两次质量之差小于为恒质。2～试料〔灰分质量在以上〕，准确至，在电炉中碳化至无20min)550±20℃下灼烧至灰白色，冷却到2001min，放入枯燥器中冷却至室温，称取质量。五、计算：〔%〕按下式计算：55〔%〕＝ m2－m0 ×100m1－m0m2——为灰化后坩埚加灰分的的质量，gm1——为坩埚加试料的质量，gm0——为恒质空坩埚，g%酸溶蛋白〔肽〕含量的测定〔QB/T2653-2023制定〕一、原理大分子蛋白质和肽链较长的多肽用三氯醋酸溶液进展沉淀，并将其中的短链小肽用酸溶解出来，其中包括小肽和局部α-氨基酸。然后经离心、过滤、消化、蒸馏，测定其蛋白质含量即酸溶蛋白。二、试剂及仪器100ml烧杯、10ml25ml移液管、半微量粗蛋白质测定试剂和装置、40目标准筛、15％三氯醋酸溶液〔TCA溶液〕、4500转/分钟的离心机、定性滤纸等。三、试验方法15%TCA20ml5分钟。用定性滤纸过5ml，4500转/104ml注入枯燥的消化管中，参加硫酸3g10ml，消化方法及蒸馏方法与蛋白的测定方法一样。计算公式：肽确定含量〔X1〕

V V1

C

HCL

0.0140 6.255Nm

100%X1——样品中肽含量〔%〕/C /HCLV1——样品消耗盐酸体积V0——试剂空白消耗盐酸体积m——样品重量〔准确到〕N——为微量法测定粗蛋白时的稀释倍数，假设全量法测定则为16肽相对含量〔%〕

XX1100% X0——样品中的粗蛋白含量0不良寡糖定性检测〔薄层层析法〕一、原理层析方法。一般层析操作包括薄板活化、点样、展层、显色和结果分析等步骤。二、试剂配制〔留意：须在通风橱中进展〕1、展层剂正丁醇：异丙醇：乙酸：蒸馏水=14：10：4〔8〕：8(如有拖尾现象，可适当加大乙酸的量)展层剂混匀后倒入展层缸。2、显色剂1g5ml50ml显色剂避光保存，有毒，留神操作。三、操作步骤5g40mL70℃1h。4℃冰箱保存。110℃1h备用。4、点样，用水苏糖、棉籽糖和蔗糖做标准〔5mg/mL〕。5mg1mL蒸馏水。在硅胶板底部留两厘米，用铅笔划始终线，隔开间距画上点样孔，用毛细管点〔留意：点样时假设觉察上清已变浑浊，则必需重离心。〕776、展层：将点好样的薄层板放入预先饱和的展层装置内，让点样一端浸入展层〔切记：样品点不能浸入展层剂中〕。当展层剂上升到离硅胶板的顶端时，停顿展层，快速吹干。、显色：将显色剂喷雾，95℃6min。8、拍照：关闭闪光灯，微距拍摄。挥发性盐基氮检测一、原理：

(GB/T—2023)质。此类物质具有挥发性，在碱性溶液蒸出后，用标准酸溶液滴定计算含量。二、试剂和仪器设备：L1000mL溶量瓶中，加水定容至刻度。100mL水，振摇成混悬液。〔2g/L〕，次甲基蓝指示剂(1g/L)。〔20g/L〕，可用蛋白测定用的硼酸吸取液三、分析步骤：30分钟，再倒5-10分钟。取上清液倒入锥形瓶中。上清液置冰箱中备用。20mL5-6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端，并使10mL氧5分钟即停顿，吸取液用盐酸标液滴定，至终点蓝紫色，同时做试剂空白试验。四、计算：X〔mg/100g〕＝

〔V－V

〕×14×C×100m0

×100式中：10X—试样中挥发性盐基氮的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)V—测定用样液消耗盐酸溶液体积，单位为毫升〔mL〕：0V—试剂空白消耗盐酸溶液体积，单位为毫升〔mL〕：0C—盐酸标准溶液的实际浓度，单位为摩尔每升〔mol/L〕：﹛C(HCl)=L﹜相当的氮的质量，单位为毫克〔mg〕m—试样质量，单位为克〔g〕。计算结果保存三位有效数字。蛋白溶解度检测一、方法原理

(GB/T19541—2023)白质溶解度。二、试剂pH=1L)三、仪器高速粉碎机，粉碎时间1分钟。样品筛：孔径磁力搅拌器四、试样的选取和制备200gmm孔径的样品筛，充