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急诊快速微生物检测技术陈远卓上海市第十人民医院急诊ICU1急诊快速微生物检测技术5/8/2024什么是快速微生物检测技术为什么急诊要开展快速微生物检测关于微生物快速检测,急诊能做什么目录

2急诊快速微生物检测技术5/8/2024什么是快速微生物检测技术为什么急诊要开展快速微生物检测关于微生物快速检测,急诊能做什么内容一3急诊快速微生物检测技术5/8/2024微生物简单分类原核生物:细菌,支原体,衣原体,螺旋体真核生物:真菌,原生动物非细胞型:病毒4急诊快速微生物检测技术5/8/2024传统的微生物检测方法直接观察:细菌,真菌培养:细菌,真菌抗体检测:细菌,真菌,病毒5急诊快速微生物检测技术5/8/2024快速的定义什么是快速检测?几分钟,几十分钟,还是几小时,无定论。共识是相对于传统的检测方法,检测时间有明显的缩短和优化。时间上的快速:

现有基本检测技术的不断进步:显色培养、抗体检测仪器升级。。。时间和空间上的快速POCT(point-of-caretesting),即时检验。6急诊快速微生物检测技术5/8/2024快速微生物检测技术列举显色培养技术-快速纸片法PCR

PCR-DGGE变性梯度凝胶电泳,PCR–HRM高分辨率溶解曲线环介导恒温核酸扩增技术(LAMP):较传统PCR快速,简单基因探针技术:依赖已经有的探针细菌直接计数技术:流式计数表面增强拉曼光谱(SERS)技术:金属吸附微生物光谱变化电阻抗法ATP生物荧光技术:无法区分种属微生物挥发性有机化合物检测技术Gene,2013,515(2):421-425EurJClinMicrobiolInfectDis,2014,33(8):1345-13537急诊快速微生物检测技术5/8/2024聚合酶链式反应(PCR)聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。8急诊快速微生物检测技术5/8/2024POCT的定义--

一种检测形式POCT,即时检验(point-of-caretesting),在采样现场进行的、利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式。空间上,在患者身边进行的检验,即“床旁检验”;时间上,可进行“即时检验”。POCT的主要优势在于缩短样本周转时间(TAT),达到快速诊治的目的。9急诊快速微生物检测技术5/8/2024SciTranslMed.2017Oct4;9(410)每例样品的细菌裂解而释放出它们的细胞内含物。使用数字实时环介导等温扩增(digitalreal-timeloop-mediatedisothermalamplification,dLAMP)Science子刊:新方法在30分钟内检测出抗生素耐药性细菌10急诊快速微生物检测技术5/8/2024LancetRespirMed.2017May;5(5):401-411英国科学家开发出一种呼吸道病毒POCT(即时检验)测试方法,能够在医院急诊室和急症医学中心采用。在便携式设备上立即处理拭子样品,然后进行快速分子测试。由于无需将样品送到医院,测试结果能够在一小时内而不是在几天内给出。Lancet子刊:开发出新的呼吸道病毒测试方法11急诊快速微生物检测技术5/8/2024Chem

Sci:利用血糖仪15分钟内检测流感病毒利用特殊偶联物处理鼻拭子样品,流感病毒表面上的神经氨酸苷酶切割这种偶联物,从而释放出半乳糖。然后将这种经过处理的样品加入到葡萄糖试纸条上进行测试。这种测试方法能够在15分钟内检测出流感病毒感染是否存在。能够特异性地检测多种流感病毒毒株。能够区分细菌感染和流感病毒感染。ChemSci.2017May1;8(5):3628-3634.12急诊快速微生物检测技术5/8/2024SciRep.

2017Sep20;7(1):11971.来自英国萨里大学、伦敦大学学院、OJ-Bio公司;南非非洲卫生研究所;荷兰QV公司;日本广播有限快速检测HIV的方法。一滴血10秒内产生阳性测试结果。这种测试方法使用了表面声波(surfaceacousticwave,SAW)生物芯片,检测HIV抗体和重组抗原(分别是抗p24抗体和p24)Sci

Rep:新方法10秒内就可检测出HIV13急诊快速微生物检测技术5/8/2024这项研究中,描述了这种靶向RNA的CRISPR相关酶如何被用作一种高度灵敏的检测器---能够指示最少至一个靶RNA或DNA分子的存在。论文第一作者将这种新的工具称为SHERLOCK(SpecificHigh-sensitivityEnzymaticReporterunLOCKing)Science.2017Apr28;356(6336):438-442.Science:基于CRISPR/Cas13a的诊断平台可检测任何RNA分子,灵敏度增加一百万倍这种技术可能有朝一日被用来应对病毒性和细菌性流行病爆发、监控抗生素耐药性和检测癌症14急诊快速微生物检测技术5/8/2024美国科学家研发首例快速血液检测来诊断和定量活动性结核病例的严重程度。通过准确检测两种蛋白质(CFP-10和ESAT-6)的微小血液水平,TB细菌只能在活动性感染期间释放。该团队新开发的基于血液的TB测试不仅胜过目前市场上的所有其他测试,而且仅需要几个小时就能完成。ProcNatlAcadSciUSA.2017Apr11;114(15):3969-3974.PNAS:新突破!几滴血液就可以快速测试“结核病感染”15急诊快速微生物检测技术5/8/2024JClinMicrobiol:新的基因测试方法一天内检测出肺结核JClinMicrobiol.2017May;55(5):1249-1254.研究人员首次证实一种用于检测病人痰液中肺结核细菌的不到24小时基因测试方法(sub-24hourgenetictest)能够替换标准的肺结核(TB)诊断方法。提取痰液样本中结核病菌DNA,然后对它进行全基因组测序。实验证明,用这种测序方法获得的结果与细菌培养方法获得的检测结果达到100%的吻合。16急诊快速微生物检测技术5/8/2024LancetRespirMed:简单的血液测试准确诊断活动性肺结核LancetRespirMed.2016Mar;4(3):213-24.当这种病原菌感染人体细胞时,这种感染引发改变上百个基因表达的链式反应。研究团队鉴定出三个人基因:GBP5、DUSP3和KLF2,这三个基因的表达以一种一致性的方式发生变化,从而揭示出活动性肺结核感染的存在。17急诊快速微生物检测技术5/8/2024Cell:开发出低成本的基于CRISPR/Cas9的纸片诊断系统快速检测寨卡病毒一种低成本的基于试纸的快速诊断系统(纸盘),该系统能够毒株特异性地检测寨卡病毒(Zikavirus,ZIKV),而且它可能很快被用来在现场筛查血液、尿液或唾液样品。Cell.2016May19;165(5):1255-1266.18急诊快速微生物检测技术5/8/2024IntegrBiol(Camb).2017Jun19;9(6):519-528疟疾侵染机体分泌过量的、有毒的血红素,血红细胞能够随着氧化血红素的积累变得更加脆弱。利用“多通路液相活塞”技术检测出不同患者血红细胞的柔韧性以及形变能力,评估疟疾患者病情。新型疟疾检测技术能够几分钟内检测出疾病的严重程度19急诊快速微生物检测技术5/8/2024什么是快速微生物检测技术为什么急诊要开展快速微生物检测关于微生物快速检测,急诊能做什么内容二20急诊快速微生物检测技术5/8/2024时间就是生命,早诊断比如心肌标志物快速检测,从1小时到15分钟,至关重要。类似的,急诊感染患者最为常见,及早明确感染源,针对性使用抗感染药物可以提高救治率。21急诊快速微生物检测技术5/8/2024及早隔离转移,保护医护人员和周围患者,比如甲流,禽流感,结核等及早上报,有利于疾病管控及早排除传染性疾病,给救治患者创造安心环境及早发现传染高风险的感染性疾病22急诊快速微生物检测技术5/8/2024及早指导正确使用抗生素,减少耐药菌23急诊快速微生物检测技术5/8/2024POCT在三级医院的发展机遇24急诊快速微生物检测技术5/8/2024POCT在灾难处置中的作用POCT检测是在灾难处置中先遣急救者的首选。在传染病突发疫情处置、灾害医学救援等应急条件下,POCT为相关管理部门应急处置、急救实施、环境检测等决策提供科学依据。25急诊快速微生物检测技术5/8/2024什么是快速微生物检测技术为什么急诊要开展快速微生物检测关于微生物快速检测,急诊能做什么内容三26急诊快速微生物检测技术5/8/2024POCT

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