HIV感染和 AIDS的实验诊断ppt课件

1、.1，HIV感染和艾滋病的实验诊断，2，HIV感染和艾滋病的实验诊断，3，公开AIDS历史的第一页MMWR June 5，1981/Vol.30/NO。艾滋病是由病毒引起的全身性传染病，血液中发现了人类免疫缺陷病毒抗体或其他相关病毒学指标，机体抵抗感染和疾病的免疫功能被破坏，发生的一系列相关症状HIV感染者被定义为血液呈HIV阳性，没有症状的感染者。Acquired Immuno-deficiency Syndrome(AIDS)，5，1。发展药剂师1983年，法国巴斯德研究所被分离为一种称为LAV的新逆转录病毒。1984年，美国国家癌症研究所分离了一种名为HTLV的病毒。同年，美国加利福尼亚

2、大学分离了与AIDS相关的病毒(AIDS Related Virus，ARV)。据调查，1986年在非洲西部，另一种病毒国际微生物学会和病毒分类学会统一为HIV。a)生物学特征，6，2.HIV的结构和蛋白质功能HIV是球形或卵形，直径100-120nm，双层含水层结构。核心由相同副本的RNA和蛋白质、逆转录酶、核糖核酸酶和整合酶组成，核心外有病毒外壳、20面体立体对称、蛋白质(P17/P18，P24/P25)。最外层是膜蛋白。包膜中有棘突，糖蛋白gp120，双层含水层脂质中有gp41。a)生物学特性，7，HIV病毒粒子及其结构蛋白和其他有毒粒子蛋白。8，人类免疫缺陷病毒HIV，9，HIV基因编

3、码产品和功能，10，HIV结构蛋白包含在包膜蛋白内部，其核心蛋白是核蛋白和外壳之间的基质中的： P17。P24和P15炮台的内部核酸外核帽主要是P24。包膜蛋白是糖蛋白： gp160，在感染初期产生为整个分子，然后分解为gp120和gp41。多聚酶蛋白由3360 P66，P51，P31组成，多聚酶抗原位于病毒的核区域，与病毒核酸密切相关。它的功能是RNA到DNA转换为。将病毒DNA整合到宿主细胞的DNA中，切割灯泡分子，使其成为活性小分子。HIV的结构蛋白，11、HIV-1分为m、o和n三个组，而m组包含A、B、C、D、E、F、g、h、I和j的总计10个亚型，3 .HIV医院特异性：12，HI

4、V亚型，a，b，c，d，e，f，g，h；HIV-1亚型是全球分布、B、A、C、D、F、O、A、O、D、14，HIV的亚型特征，相对优势亚型等亚型差异大亚型内变异水平估计存在时间不同亚型传播途径及致病性不同亚型对抗-HIV药物诱导耐药不同亚型重组。15、逆转录病毒，复制速度快，人体各种细胞感染，引起多器官损伤，调节免疫系统功能的T4淋巴细胞在血液、淋巴液、精液、阴道分泌液、乳汁中的抗体无保护作用有外部抵抗力(乙型肝炎病毒以下)，人免疫缺陷病毒；16，1。艾滋病成为全世界第四大杀手，传染性疾病的第一杀手超过了280万人。2.截至2008年，15-49岁的HIV患者人数已有4000万人，其中40%是

5、15-24岁的青年。(120万儿童)3。亚洲人感染艾滋病的速度最快。特别是中国和印度；艾滋病毒的研究仍然跟不上破坏的速度。治疗性控制是可以实现的。2)传染病学，17，根据全球艾滋病感染者人数和感染途径，联合国艾滋病委员会和世界卫生组织统计，全世界每年有410万名新感染的艾滋病感染者。(24h全球感染人数增加16000人)艾滋病死亡人数超过280万人，超过肺结核(200万人)和疟疾(100万人).18，1。西方国家哈特的使用，发病率和死亡率在下降。2.注射毒品和圣战分子(以异性间传播为主)；收集不洁的血液；女性病例增加。妈妈和孩子之间的传染5。儿童病例增加(15岁)。最近艾滋病流行特征：19，艾

6、滋病的流行情况，20，全国艾滋病患者报告人数超过65万人。2008年新感染人数超过7万人。31省自治区已经发现了HIV感染者的三种传播途径，都是全国艾滋病的流行经过期(1985-1995年)。现在已经成为广泛的流行期(1995 现在)艾滋病成为名副其实的诺森三世疾病。中国的艾滋病近况：21，报告警告说，中国正处于艾滋病灾难的边缘，一艘巨大的船正在冲向冰山。22，1.HIV通过CD4受体结合到靶细胞表面，通过靶细胞的内参作用和gp 41的融合作用，细胞膜被穿透，病毒进入细胞质。2.在RT的作用下，第一个RNA转移到DNA，接着以第一个DNA为模板形成全病毒。3.在整合酶作用下形成的双周DNA被整

7、合到宿主细胞中，感染持续。4.全病毒成了潜伏状态。5.前病毒DNA复制，下一代病毒的遗传物质；6.复制新的病毒颗粒后感染其他细胞，原来感染的细胞死亡，3)发病机制。23，2。HIV感染过程。24，HIV感染/AIDS过程，早期(1 6-15年以上)人体感染HIV后，大部分潜伏期(艾滋病早期)艾滋病期间-机会性感染及机会性肿瘤HIV感染者和AIDS患者都有传染性。25，1。感染HIV到相应抗体. 2.急性感染期病毒复制明显。血液中经常出现P24抗原和HIV RNA，或者可以培养成HIV。3.“潜伏期”:可能会持续数月至17年以上。这时只能检测抗体，但有低浓度的HIV克隆。艾滋病林爽阶段。急性HI

8、V感染引起的宿主免疫反应过程，HIV感染过程，26，HIV感染过程，27，感染初期，发生病毒血症，HIV和HIV RNA可以检测。血清绵羊旋转后，可以检测各种结构蛋白引起的相应抗体，如P24，P55，gp160，gp120，gp41，P51等。抗HIV IgM的出现率很低，持续时间很短。P55、P24等抗GAG抗体是一般筛选和确认实验中首先检测到的抗体。(平均22天)通常发生血淋巴细胞减少。CD4细胞的数量是最重要的反映林爽进展的指标。HIV感染者2 m和新接触trexet水平提高，与病情有关。3 .感染后免疫反应，28，HIV感染后血清学的变化，1 .血清中HIV抗原在感染后3 4周达到峰值

9、，9 10周逐渐降低或消失。HIV抗体出现，保持高水平多年，特别是P41时间最长。2.HIV抗原消失或很少出现病毒的潜伏期，血清中再次大量出现，可能已是艾滋病晚期。HIV抗体减少了。HIV感染的血清学变化。29，4.HIV感染后T细胞的变化，CD4 T继续下降，Th1，Th2亚群失衡引起抗原反应性减少细胞因子(如IFN-r，TNF-a水平上升)，从而破坏产生细胞因子的功能。CD8 T早期明显上升，发病1、2年前大幅减少，CTL功能减少，但恢复能力与IL-2处理一样。CD3 T早期下降不明显，AIDS发病一两年前明显减少。，30，CD4淋巴细胞的模式，31，HIV的病毒培养和分离；HIV有毒植物

10、分析；HIV核酸测定；(Abbott LCx HIV-RNA) P24抗原测定第四代酶免疫试剂HIV抗体测定：经常分为超导体和确认两个阶段。超体实验室和一般超体方法是HIV病毒抗体金标快速法艾滋病抗体选择性酶免疫试剂(MUREX HIV) Determine HIV1 2 0亚型试纸(Abbott)双抗原夹心酶免疫试剂鉴定实验，主要是免疫印迹技术4) HIV的实验诊断，32，1.HIV抗体检查，试剂盒1985.3 HIV-1 1990.6 HIV-2 1992.4 HIV-1/2灵敏度和特异性持续提高，第三代ELISA共达到99%以上。1998.3代ELISA检查IV1/HIV2快速诊断试剂(

11、胶体金段宜恩)，33、EIA实际试剂盒进展，世代抗原方法检测时间1前病毒间接2个月2重组或多肽间接42-45d 3重组多肽三明治22d 4抗原抗体夹心16d(抗原5pg) 5基因扩增方法，基因芯片6-11.5D 1。Murex HIV 1.2.O:第三代抗体试剂的双抗原夹心模式二期酶标法测试可用于检测HIV抗体I型、II型和O型。手动/自动酶标仪检查，作为血清/血浆样本。35，Murexhiv-1.2.o。三明治模式，、反应信号减少、应用于39，2.POCT HIV检查，快速Determine HIV1/2 O抗体检查，第三代抗体试剂的双抗原夹心模式可用于检测HIV抗体I型、II型、O型。手指

12、/静脉血，15分钟结果，可以用血清/血浆/全血样品密封。40，41，42，43，快速试剂开发的背景，现场检查(POCT)概念：紧急-手术，紧急输血，事故紧急检查。(医疗人员和患者的保护)筛选概念：帽子检查、就职、移民、性和吸毒者身体检查等-易于使用。日常检查：大、中、小实验室，以及极少量的HIV样品实验室、偏远地区、实验室条件或设备不均匀，外出检查-便于携带和使用。您可以保存结果。44、敏感度等级和分数、45，3。第四代试剂和抗原相关试剂，HIV抗原/抗体联合试剂：Murex HIV Ag/Ab RIA Delta HIV Ag/Ab:释放HIV抗原/抗体联合试剂。HIV抗原试剂：Murex

13、HIV抗原单克隆试剂：临床上仅用于HIV抗原检查，早期检查样本或观察HIV疾病的进展。确认Murex HIV抗原确认试剂，抗原试剂阳性样本。46、HIV段宜恩、CDC组I、CDC组ii/iii、CDC组IV、HIV AG/RNA、IGM、IGM 48，49，4。HIV特殊试剂，HIV抗体WB确认试剂：唯一经典、世界公认的抗体确认试剂，版本2.2包含早期血清转换片段，可以很容易确认早期样品。LCx HIV核酸物质的定性/定量分析：(LCR和PCR技术)用于HIV患者的遗传物质检查，可用于部分确认和患者治疗监控。，50，Western Blot分析HIV蛋白，51，Western blot原理，52、53，HIV病毒核酸分析和血清学免疫测定比较，血清学免疫测定核酸分析HIV变异识别；细胞因子的测定；8.PCR追踪HIV自然感染的历史。HIV的实验诊断，56，世界艾滋病日，1988年将每年的月日定为世界