大肠杆菌感受态

大肠杆菌感受态Tag内容描述：<p>1、常用大肠杆菌感受态 JM109，DH5a，BL21 等的区别 1：DH5a 菌株 DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a 在使用 pUC 系列 质粒载体转化时，可与载体编码的 半乳糖苷酶氨基端实现 互 补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型：F-，80dlacZM15，(lacZYA-argF) U169，deoR ，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)， phoA，supE44，-， thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体（如 pET 系列）的基因。T7 噬菌体 RNA 聚合酶位于 噬菌体 DE3 区， 该区整合于 BL21 的染色体上。该。</p><p>2、邵统通201028号关于二季度全市统战信息工作情况的通报各县市区委统战部，市直统战系统各单位，部机关各科室：今年第二季度全市统战信息工作总体情况稳定，信息上报与采用率发展不平衡，综述情况如下：一、主要特点二季度的统战信息工作，主要特点概括起来是“三增”：一是热情增高。多数县市区出现了你追我赶的局面，领导重视，带头撰写。如新宁县委统战部副部长萧勇，二季度亲自撰写的信息就达11条，信息专干吃苦耐劳，乐于钻研，善于捕捉。市委统战部刘兆琰、邵阳县委统战部颜佳翔等同志，从事统战信息工作时间相对较长，他们坐得住、静。</p><p>3、实验四、五 大肠杆菌感受态的制备、质粒DNA的转化及转化子筛选,一、实验目的,掌握利用CaCl2法制备大肠杆菌感受态的原理； 掌握质粒DNA转化、转化子筛选的原理； 熟悉实验的具体操作步骤，掌握无菌操作技术。,一、实验原理,常用预冷的CaCl2处理细菌制备感受态细胞：用低温（0）低渗CaCl2溶液处理快速生长的细菌，即可获得感受态细菌。此时细菌膨胀成球形，外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基钙磷酸复合物粘附在细菌表面，通过热激作用促进细胞对DNA的吸收。 在一定条件下，外源片段与感受态细胞混合、保温和热激，进入感受态细胞。。</p><p>4、实验一 大肠杆菌感受态制备及外源DNA的转化,实验目的,1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。 3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。,实验原理,转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。,转化中的受体细胞,转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。,转化方法：。</p>