蛋白质的定量测定

蛋白质的定量测定Tag内容描述：<p>1、实验七蛋白质含量测定测定蛋白质的定量方法有很多，目前常用的有染料法，双缩脲(Biuret)法，酚试剂法(Lowry)法及紫外吸收法。目的要求1掌握测定蛋白质的含量基本方法。2了解染料法、双缩脲法、Lowry法和紫外吸收法测定原理。一、染料法实验原理在酸性溶液中染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合，此时考马斯亮蓝G-250颜色从红色变为蓝色，吸收高峰从460nm移至595nm。利用这个原理可以测定蛋白质含量。该法近年在某些方面有取代经典的Lowry法趋势，因为它操作简单，反应时间短，染料-蛋白质颜色稳定，抗干扰性强。本法的缺点是：对于那些与标准。</p><p>2、实验 蛋白质的定量测定方法【实验预习】1.试比较Folin酚法与考马斯亮蓝染料结合比色法的优缺点。2.试比较二喹啉甲酸法与Folin酚法的优缺点。3.凯氏定氮法中在消化样品时，加入浓硫酸，硫酸钾和硫酸铜粉末的目的是什麽？4.紫外吸收法测定蛋白质含量的原理是什麽？一、Folin酚试剂法(Lowry法)【实验目的】1.学习Folin酚试剂法测定蛋白质含量的原理。2.掌握Folin酚试剂法测定蛋白质含量的方法和操作。【实验原理】蛋白质中含有酪氨酸和色氨酸残基，能与Folin酚试剂起氧化还原反应。反应过程分为两步，第一步：在碱性溶液中，蛋白质分子中的肽。</p><p>3、实验一 蛋白质的定量测定 Folin-酚试剂法(Lowry法) 蛋白质及氨基酸的呈色反应 n（一）双缩脲反应 n是由两分子尿素缩合成一种化合物的反 应。 2尿素双缩脲+氨 180度 双缩脲在碱性溶液中与铜离子结合生成复 杂的紫红色络合物，这一呈色反应称为双缩脲 反应。 n蛋白质分子中含有许多和双缩脲结构相 似的肽键，因此也能起双缩脲反应，形 成紫红色或蓝紫色络合物。通常可用此 法来定性鉴定蛋白质的存在，也可根据 反应生成颜色的深浅，在540nm波长处 进行比色，定量测定蛋白质的浓度。允 许测定范围为0.2-1.7mg蛋白质/ml。 n（二）蛋白质的黄色。</p><p>4、实验三 奶粉中蛋白质含量的测定1.1实验目的要求：1、掌握样品处理方法2、掌握凯氏定氮法2.1 蛋白质含量测定蛋白质是生命的物质基础，是人体重要的营养物质，因而也是食品中重要的营养指标。测定食品中蛋白质的含量，对于评价食品的营养价值，合理开发利用食品资源、提高产品质量、优化食品配方、指导经济核算及生产过程控制均具有极其重要的意义。测定蛋白质最常用的方法为凯氏定氮法。此法是通过测定出样品中的总氮含量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质含量的。经过人们长期的应用和不断改进，凯氏定氮法已演变成常量法、微量法、半微。</p><p>5、蛋白质的定量测定（改良Lowry法）,一、实验目的,1、熟悉改良Lowry法测定血清蛋白质含量的原理。2、掌握直接比色法和标准曲线法的应用。3、熟悉分光光度计的使用。,二、实验原理,考马斯亮蓝法,Lowry法,紫外分光光度法,二、实验原理,蛋白质,紫红色蛋白质-铜的络合物,碱性铜试剂,酚试剂,蓝紫色溶液,肽键,酪氨酸、色氨酸等氨基酸残基,直接比色法,标准曲线法,A=KLC,三、实验步骤,四、结果与。</p>