对流免疫电泳

对流免疫电泳Tag内容描述：<p>1、项目五 对流免疫电泳试验(Counter immunoelectrophoresis test)【实验原理】在适宜缓冲液和电场条件下，由于琼脂凝胶中的抗原和相应抗体在电泳和电渗作用下能相对移动，所以二者会在加样的两孔之间相遇，并在它们浓度比例合适之处形成白色沉淀线。据此临床常用该方法检测抗原，以诊断某些疾病。【试剂和器材】1AFP阳性血清、待检血清、抗AFP诊断血清。2pH8.6 0.05 mol/L巴比妥缓冲液。巴比妥钠10.3 g巴比妥 1.84 g先将巴比妥置于三角烧瓶中，加入200ml蒸馏水，加热溶解后再加入巴比妥钠， 最后加蒸馏水至1000ml。3琼脂凝胶按需要量称取琼。</p><p>2、对流免疫电泳,一、基本原理 在pH值8.6的琼脂凝胶中，抗体球蛋白只带有微弱的负电荷，而且它分子又较大，所以泳动慢，受电渗作用的影响也大，往往不能抵抗电渗作用，故在电泳时，反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷，分子又较小，所以泳动快，虽然由于电渗作用泳动速度减慢，但仍能向正极泳动。如将抗原置阴极，抗体置阳极，电泳时，两种成分相对泳动，一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇，并在比例适当的地方形成肉眼可见的沉淀线。这样由于电泳的作用，不仅帮助抗体定向移动，因而加速了反应的出现，而且也限制了琼脂。</p><p>3、实验三 对流免疫电泳,【实验目的】 掌握对流免疫电泳的原理、操作方法、 结果判定及了解其用途。,【实验原理】 带电胶体颗粒可在电场中定向移动，移动速度及 方向与颗粒所带电荷及分子量大小有关。蛋白质 为两性电解质，每种蛋白质都有自己的等电点， 在pH值大于其等电点的溶液中，羧基解离多，蛋 白质带负电，向正极泳动；在pH值小于其等电点 的溶液中，氨基解离多，蛋白质带正电，向负极 泳动。pH值离等电点越远，所带电荷越多，泳动 速度也越快。因此，可通过控制溶液的pH值的方 法，使抗原抗体在通电的琼脂板上泳动，进行抗 原抗体成。</p><p>4、,实验三 对流免疫电泳,.,【实验目的】 掌握对流免疫电泳的原理、操作方法、 结果判定及了解其用途。,.,【实验原理】 带电胶体颗粒可在电场中定向移动，移动速度及 方向与颗粒所带电荷及分子量大小有关。蛋白质 为两性电解质，每种蛋白质都有自己的等电点， 在pH值大于其等电点的溶液中，羧基解离多，蛋 白质带负电，向正极泳动；在pH值小于其等电点 的溶液中，氨基解离多，蛋白质带正电，向负极 泳动。p。</p><p>5、,1,实验三 对流免疫电泳,.,2,【实验目的】 掌握对流免疫电泳的原理、操作方法、 结果判定及了解其用途。,.,3,【实验原理】 带电胶体颗粒可在电场中定向移动，移动速度及 方向与颗粒所带电荷及分子量大小有关。蛋白质 为两性电解质，每种蛋白质都有自己的等电点， 在pH值大于其等电点的溶液中，羧基解离多，蛋 白质带负电，向正极泳动；在pH值小于其等电点 的溶液中，氨基解离多，蛋白质带正电，向负。</p><p>6、对流免疫扩散,对流免疫电泳实验时将双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。蛋白质抗原、抗体在电场中作定向加速免疫双扩散，从而加速沉淀线的形成。,实验原理,在偏碱性的缓冲液环境和适当的直流电场中，大部分抗原带负电荷，向阳极移动；而抗体大部分是IgG，其等电点与环境中的pH接近，故极性基团解离很少；另外，由于其分子量大，加上电渗作用使其缓慢向阴极移动，在一定时间内（30min-90min。</p>