分离纯化.

分离纯化.Tag内容描述：<p>1、第四章 酶的提取与分离纯化,将酶从细胞或发酵液中取出，再与杂质分开，获得所需的酶产品。 酶的分离纯化工作,是酶学研究的基础. 酶的纯化过程就目前而言,还是门实验科学.,酶的纯化过程与一般蛋白纯化过程相比有本身独有的特点:一是特定的一种酶在细胞中含量很少;二是酶可通过测定活力的方法加以跟踪.,1、建立一个可靠和快速的测活方法； 2、酶原料的选择； 3、酶的提取； 4、酶的提纯； 5、酶的纯度检验。,酶分离纯化的一般原则:,第一节 细胞破碎（link)第二节 酶的提取 (link) 第三节 沉淀分离(link) 第四节 离心分离 第五节 过滤与膜分。</p><p>2、第三章 酶的分离纯化,酶分离纯化的目的,酶分离纯化的目的是使酶制剂产品达到应用所需的纯度。,分离纯化过程包括3个基本步骤： 1 抽提 2 纯化 3 制剂,Crude product concentration versus selling price (Dwyer, 1984),某些生化物质在原料液中的 浓度与价格的关系(1984年),在分离纯化中必须注意： 1 防止酶的变性失活； 2 在分离纯化过程中的每一步都 应检测酶的活性，以确定酶的 纯化程度和回收率。,第一节 酶活力的测定,几个名词 1 酶活力或酶活性 2 酶活力单位 3 mol催化活性（分子活性）和转换 数（催化中心活力) 4 酶的比活力,酶活力。</p><p>3、酶的提取与分离纯化,（制作人：王众 黄文辉 王晨）,要点,：细胞破碎 ：提取 ：沉淀分离 ：离心分离 ：过滤与膜分离 ：层析分离 ：电泳分离 ：萃取分离 ： 结晶 10：浓缩与干燥,1 细胞破碎,细胞破碎是通过各种过程使细胞外层结构破坏的技术过程。 细胞破碎的方法 机械破碎法 物理破碎法 化学破碎法 酶促破碎法,机械破碎法,1 捣碎法 定义 利用捣碎机的高速旋转叶片所产生的剪切力将组织细胞破碎的方法。 使用范围 动物内脏 植物叶芽 细菌 2 研磨法 利用研钵，石磨，细菌磨，球磨等研磨器械所产生的剪切力将组织细胞破碎的方法。必要时加入石。</p><p>4、第三章 酶的提取与分离纯化 预处理（pretreatment）：包括固液分离和细胞破碎（分离胞内产物）等。 初步纯化（rough fractionation） （提取）：除去与目的产物性质差异很大的杂质。 高度纯化（fine fractionation） （精制）：除去与产物性质相似的杂质。 浓缩与干燥（concentration and desiccation）（成品加工）:使酶与溶剂分离的过程。,第一节 酶的分离 一、发酵液预处理 (一)发酵液的相对纯化 1. 无机离子的去除 2. 杂蛋白质的去除 3. 色素及其他物质的去除,(二）发酵液的固液分离 1 . 影响发酵液过滤的因素 1）菌种 2）培养基组成 。</p><p>5、 酶的提取与分离纯化,重点,一 酶的下游加工流程,1.预处理 2.细胞过滤分离 3.酶提取 4.酶分离纯化 5.酶浓缩、结晶、干燥 6.酶保存 7.酶制剂成型 酶工程下游技术操作条件,二 预处理,1.加热：使温度达到最适温度 2.凝聚，絮凝 3.加酸碱：达到最适PH,三 细胞过滤分离,1.细胞破碎法 机械破碎法：研磨、搅拌、匀浆 物理破碎法：温度差法、压力差法、超声 波空穴效应 化学破碎法：酸碱，有机溶剂破坏细胞壁、膜 酶破碎法：加酶破坏细胞壁、膜；最适条件培 养，使溶酶体破裂自溶 2.过滤方法：加压、常压、减压过滤法 空穴效应：超声波使发酵液中产。</p><p>6、核酸分离与纯化,中晶生物,核酸在体内的分部情况： DNA 真核生物：细胞核：95 细胞器：5 RNA 细胞质：75 细胞核：10 细胞器：15 rRNA：80-85，tRNA和mRNA：10-15%,概述： 核酸包括DNA和RNA, 与蛋白质结合的状态存在 结构形式多样： 真核生物：染色体DNA：双链线性分子 原核生物基因组DNA、质粒、真核细胞器：双链环状 病毒DNA：双链/单链环状、双链/单链线状 RNA：多为单链线性分子,核酸分离纯化的原则： 保持其一级结构的完整性 完整的一级结构是研究核酸功能的最基本要求 遗传信息保存在一级结构中 一级结构决定其高级结构 一级结构决定。</p><p>7、Chapter 3 The Extraction, Separation and Purification of Enzyme,酶的分离纯化,制作：郑穗平,Contents of chapter 3,1、酶的提取与分离纯化技术路线,2、细胞破碎,3、酶的提取,4、酶的分离方法,Go,Go,Go,Go,5、酶的组合分离纯化策略,Go,6、酶的浓缩、干燥与结晶,Go,细胞结构与酶分布,3.1 酶的提取、分离纯化技术路线,细胞破碎,酶提取,酶分离纯化,酶浓缩,酶贮存,动物、植物或微生物细胞,发酵液,离心分离，过滤分离，沉淀分离，层析分离，电泳分离，萃取分离，结晶分离等。,酶的纯化过程，约可分为三个阶段： (1) 粗蛋白质 (crude protein。</p><p>8、广州食品工业科技 Guangzhou Food Science and Technology Vol.20 No.3(总81) 144 中图分类号：T S 2 3 ；文献标识码：A ；文章篇号: 1 0 0 7 - 2 7 6 4 ( 2 0 0 4 ) 0 3 - 0 0 1 4 4 - 0 5 5 多糖的提取、分离与纯化 叶凯贞 黎碧娜 王奎兰 谭志伟 ( 广东工业大学轻工化工学院，广州 5 1 0 0 9 0 ) 摘 要：介绍了动物，植物和菌类多糖的提取方法，并针对粗多糖中所含的杂质不同，采用不同的方法加以去除，以达到多糖与 杂质的分离。 关键词：多糖；提取；分离；纯化 Extraction and Separation of Polysaccharide Ye Kaizhen, Li Bina, Wa。</p>