革兰氏染色

革兰氏染色Tag内容描述：<p>1、G菌：细细胞壁厚，肽肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时时 ，肽肽聚糖脱水而孔障缩缩小，故保留结结晶紫-碘复合物在细细胞膜上。 呈紫色。 G菌：肽肽聚糖层层薄，交联联松散，乙醇脱色不能使其结结构收缩缩，其 脂含量高,乙醇将脂溶解，缝缝隙加大，结结晶紫-碘复合物溶出细细胞壁 ，沙黄复染后呈红红色。 革兰氏染色原理： 第一步：结晶紫使菌体着上紫色 第二步：碘和结晶紫形成脂溶性大分 子复合物，分子大，能被细胞壁阻留 在细胞内。 第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构 造不同，出现不同的反应。 第四步：沙黄复染，增加脱色。</p><p>2、思考题1：培养基配置好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是否为无菌的？ 思考题2：如果需要配制一种含有某抗生素的固体培养基，其中抗生素的终质量浓度（或工作浓度）为50ug/mL，你将如何操作？（提示：抗生素在高温下易失效）,实验四 革兰氏染色法,目的要求,学习并掌握革兰氏染色法。 了解革兰氏染色原理。 巩固显微镜的使用方法及无菌操作技术。,菌种 参考菌：金黄色葡萄球菌(G+), 大肠杆菌 (G-) 待测菌：蜡样芽孢杆菌、蓝细菌(微囊藻) 仪器 显微镜 材料 载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、染色缸等 染料 草酸铵结。</p><p>3、实验一 革兰氏染色、细菌接种,实验内容,一，革兰氏染色（操作） 二，细菌接种 平板划线法（操作） 斜面培养基接种法（操作） 半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作） 液体培养基接种法（操作） 细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）,实验内容,一，革兰氏染色（操作） 二，细菌接种 平板划线法（操作） 斜面培养基接种法（操作） 半固体培养基接种法/穿刺接种法（操作） 液体培养基接种法（操作） 细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象（示教）,革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain Gran 创立的。,实验原理。</p><p>4、Central Laboratory of Biology,实验四 油镜的使用及细菌革兰氏染色法,微生物学实验,课前提问与目的要求,【课前提问】,1.油镜的特点及使用范围是什么？ 2.革兰氏染色的原理是什么？,【目的要求】,1. 学习并掌握油镜的原理和使用方法； 2. 了解革兰氏染色原理； 3. 学习并掌握革兰氏染色的方法。,【基本原理】,1. 油镜提高分辨率 油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间是隔一层油质。如香柏油的折射率n=1.52，与玻璃相同。 光线通过不减低视野的照明度； 更主要能增加数值孔径，提高显微镜的放大效能。 分辨率=/2NA =光波波 （物镜的数值。</p><p>5、实训目的,实训原理,实训步骤,实训结果,由于细菌个体微小，基本上无色透明，故将其用适当染料染色观察，方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等，在细菌鉴别上有重要意义。,实训目的,实训原理,实训步骤,实训结果,G菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇。</p>