革兰氏染色法

革兰氏染色法Tag内容描述：<p>1、细菌革兰氏染色法 1.1. 目的目的 为镜检细菌形态结构提供样本 2.2. 范围范围 适用于实验室常见细菌的抹片制备及染色 3.3. 采样对接人采样对接人 服务专家针对病死猪进行解剖根据临床症状采集相应的病料。 4.4. 设备和材料设备和材料 无菌剪刀、无菌手术刀、无菌试管、无菌生理盐水、无菌平皿、 三角烧瓶、酒精灯、接种环、打火机、75%酒精棉球、一次性手套、 营养琼脂培养基、5石炭酸液；碘片； 碘化钾； 95酒精； 碱性复红粉末；显微镜；试管架；酒精灯； 接种环；药匙； 称量 纸；电子称；待试菌；灭菌蒸馏水； 吸水纸；香柏油；灭菌玻。</p><p>2、实验一实验一 细菌的简单染色法和革兰氏染色法细菌的简单染色法和革兰氏染色法 一、目的要求一、目的要求 1. 学习微生物涂片、染色的基本技术，并掌握革兰氏染色的方法。 2. 初步认识细菌的形态特征，掌握无菌操作技术。 3. 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 二、基本原理二、基本原理 1. 简单染色法：简单染色法： 用单一染料进行细菌染色，操作简便，适于菌体一般形状和细菌排列的观 察。 常用碱性染料碱性染料进行简单染色，这是因为：在中性、碱性或弱碱性溶液中， 细菌细胞通常带负电荷负电荷，而碱性染料在电。</p><p>3、革兰氏染色法的过程及原理一，过程1 涂片将培养的不同菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰l 一2 次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。2 染色( 1 ）初染加草酸铰结晶紫一滴，约一分钟，水洗。( 2 ）媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。( 3 ）脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95 酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20 一30 秒钟，立即用水冲净酒精。( 4 ）复染用番红液染1 一2 分钟，水洗。( 5 ）镜检干燥后，置油镜观察革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。以分散。</p><p>4、实验一 细菌的简单染色法和革兰氏染色法一、目的要求1. 学习微生物涂片、染色的基本技术，并掌握革兰氏染色的方法。2. 初步认识细菌的形态特征，掌握无菌操作技术。3. 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。二、基本原理1. 简单染色法：用单一染料进行细菌染色，操作简便，适于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱性染料进行简单染色，这是因为：在中性、碱性或弱碱性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷（酸性染料电离时，其分子的染色部分带正电荷），因此碱性染料的染色部。</p><p>5、思考题1：培养基配置好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是否为无菌的？ 思考题2：如果需要配制一种含有某抗生素的固体培养基，其中抗生素的终质量浓度（或工作浓度）为50ug/mL，你将如何操作？（提示：抗生素在高温下易失效）,实验四 革兰氏染色法,目的要求,学习并掌握革兰氏染色法。 了解革兰氏染色原理。 巩固显微镜的使用方法及无菌操作技术。,菌种 参考菌：金黄色葡萄球菌(G+), 大肠杆菌 (G-) 待测菌：蜡样芽孢杆菌、蓝细菌(微囊藻) 仪器 显微镜 材料 载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、染色缸等 染料 草酸铵结。</p><p>6、实验四 革兰氏染色法,目的要求,学习并掌握革兰氏染色法。 了解革兰氏染色原理。 巩固显微镜的使用方法及无菌操作技术。,菌种 参考菌：金黄色葡萄球菌(G+), 大肠杆菌 (G-) 待测菌：蜡样芽孢杆菌、蓝细菌(微囊藻) 仪器 显微镜 材料 载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、染色缸等 试剂 草酸铵结晶紫染色液、卢戈氏碘液、95%乙醇、0.5%番红染色液,制片 初染 媒染 脱色 复染 镜检,主要操作步骤,制片,要用活跃生长期的培养物进行革兰氏染色; 注意练习无菌操作； 在载玻片上滴一小滴生理盐水； 取菌不要贪多，接种环上肉眼可见菌苔痕迹即可。</p><p>7、Central Laboratory of Biology,实验四 油镜的使用及细菌革兰氏染色法,微生物学实验,课前提问与目的要求,【课前提问】,1.油镜的特点及使用范围是什么？ 2.革兰氏染色的原理是什么？,【目的要求】,1. 学习并掌握油镜的原理和使用方法； 2. 了解革兰氏染色原理； 3. 学习并掌握革兰氏染色的方法。,【基本原理】,1. 油镜提高分辨率 油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间是隔一层油质。如香柏油的折射率n=1.52，与玻璃相同。 光线通过不减低视野的照明度； 更主要能增加数值孔径，提高显微镜的放大效能。 分辨率=/2NA =光波波 （物镜的数值。</p><p>8、革兰氏染色法,河南城建学院环境科学与工程实验中心环境生物技术实验室,一目的要求：1、学习并初步掌握革兰氏染色法。2、了解革兰氏染色法的原理极其在细菌分类鉴定中的重要性。,二基本原理：革兰氏染色法是1884年由。</p><p>9、实验二 革兰氏染色法 一 目的要求 1 学习革兰氏染色法 2 观察细菌的运动情况 示教 二 材料方法 一 材料 葡萄球菌 大肠埃希菌18 24小时培养物 显微镜 香柏油 接种环 酒精灯等 结晶紫染液 卢戈碘液 95 乙醇溶液 稀释。</p>