基因克隆载体

基因克隆载体Tag内容描述：<p>1、DNA的损伤原因： 1.DNA分子的自发性损伤 (1) DNA复制中的错误 (2) DNA的自发性化学变化 a.碱基的异构互变 b.碱基的脱氨基作用 c.脱嘌呤与脱嘧啶 d.碱基修饰与链断裂 2.物理因素引起的DNA损伤 (1) 紫外线引起的DNA损伤 (2) 电离辐射引起的DNA损伤 a.碱基变化 b.脱氧核糖变化、 c.DNA链断裂 d.交联 复习 3.化学因素引起的DNA损伤 (1) 烷化剂对DNA的损伤 a.碱基烷基化 b.碱基脱落 c.断链 d.交联 (2)碱基类似物、修饰剂对DNA的损伤 复习 分子改变类型： 点突变 (point mutation) ： 指 DNA 分子上一个碱基的变异（置换）。 (1)、转换 (transit。</p><p>2、基因克隆的载体,载体（vector）是由在细胞中能够自主复制的分子构成的一种遗传成分，通过实验手段可使其它的片段连接在它的上面，而进行复制，作为基因工程的载体，必须具备以下几个性能：,1、分子较小，可携带比较大的片段。 2、能独立于染色体而进行自主复制并且是高效的复制。 3、要有尽可能多种限制酶的切割位点，但每一种限制酶又要最少的切割位点（多克隆位点 multiple cloning sites ，MCS） 。 4、有适合的标记，易于选择。 5、有时还要求载体要能启动外源基因进行转录及表达，并且尽可能是高效的表达。 6、从安全角度考虑，要求。</p><p>3、第三章 用于基因克隆的载体,质粒（plasmid）,噬菌体或病毒DNA,考斯质粒（cosmid）与噬菌粒,人造染色体载体,载体的功能及特征,3.1 载体的功能及特征,3.1.1 载体的功能,运送外源基因高效转入受体细胞,为外源基因提供复制能力或整合能力,为外源基因的扩增或表达提供必要的条件,3.1.2 载体应具备的条件,具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性）,具有合适的筛选标记,具有较高的外源DNA的载装能力,具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点,具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点,3.2 质粒载体,3.2.1 质粒的基本特征,A: 质粒是生物细。</p><p>4、3 基因克隆载体,定义 通过不同途径将承载的外源DNA片段（基因）带入受体细胞且能在其中维持的DNA分子。也称DNA克隆载体。 必备条件 1、克隆位点(一个或多个) 2、能携带外源DNA片段进入受体细胞: 能自我复制，或整入染色体随受体细胞DNA复制而复制。 3、有选择克隆子的标记基因 4、安全性(不含损害受体的基因,不任意转入别的,尤其人的细胞) 意义：基因工程随载体系统的建立而兴起，构建新载体一直是基础研究的优先领域。,按克隆载体的来源分： 质粒 病毒或噬菌体 质粒与病毒或噬菌体DNA组成的 质粒与染色体DNA片段组成的,按应用范围分： 表。</p><p>5、第五章 基因克隆载体,1,基因克隆载体定义 通过不同途径将承载的外源DNA片段（基因）带入受体细胞且能在其中维持的DNA分子。也称DNA克隆载体。,2,1. 载体的功能 运送外源基因高效转入受体细胞 为外源基因提供复制能力或整合能力 为外源基因的扩增或表达提供必要的条件,3,2.必备条件 1、克隆位点(一个或多个) 2、能携带外源DNA片段进入受体细胞: 能自我复制，或整入染色体随受体细胞DNA复制而复制。 3、有用于选择克隆子的标记基因 4、安全性(不含损害受体的基因,不任意转入别的,尤其人的细胞) 意义：基因工程随载体系统的建立而兴起，构建。</p><p>6、,基因克隆主要载体系统 学 生：张建苓 指导老师：胡廷章,.,1、载体定义 载体(vector)：基因工程重组DNA技术中，将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。,.,2、类型 （1）根据功能可分为： 克隆载体 表达载体 整合载体 （2）根据来源可分为： 质粒载体 噬菌体载体 真核细胞克隆载体,.,3 、载体的共同特征（或应具备的条件）：,自主复制。</p><p>7、主讲教师:任国领,生命科学学院,第三章 基因克隆载体,一种能够催化双链DNA片段紧靠在一起的3羟基端与5磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶。,DNA连接酶（DNA Ligase）,知识回顾,两种类型,（1）E. coli DNA连接酶,（2）T4 DNA连接酶,1.DNA连接酶连接作用的特点正确的是（ ）,多选题,知识回顾,A. DNA连接酶需要一条DNA链的3末端有一个游离的羟。</p>