外源基因的表达

外源基因的表达Tag内容描述：<p>1、第三篇 外源基因的表达、检测及遗传特性,第一章 转化外源基因在植物细胞中的表达调控 第二章 外源基因整合的鉴定 第三章 外源基因表达的检测 第四章 转基因植物的遗传特性,第一章 转化外源基因在植物细胞中的表达调控,第一节 转化外源基因的瞬时表达和稳定表达 第二节 DNA序列对转化外源基因表达的调控 第三节 DNA甲基化对转化外源基因表达的调控 第四节 提高转化外源基因表达的策略,第一节 转化外源基因的瞬时表达和稳定表达,一、转化外源基因的瞬时表达 在合适的条件下，转化的外源基因通常在数小时后就能检测到其表达的产物，并在1-2天。</p><p>2、外源基因的表达,第一节 基因表达的机制 1.外源基因的转录 2.mRNA的延伸与稳定性 3.外源基因mRNA的有效翻译 4.表达蛋白在细胞中的稳定性 5.目的基因的沉默,1.外源基因的转录 启动子类型： 组成型启动子 原核生物T7启动子 诱导型启动子 原核生物lac、trp等 组织特异性表达启动子,2.mRNA的延伸与稳定性 原核生物避免序列存在衰减子(attenuator) 带有正常转录终止序列 受体细胞情况,A,B,trp衰减子,带有正常转录终止序列 真核生物要带有转录终止序列与poly(A) 渗入位点 poly(A)渗入信号序列AAUAAA,受体细胞情况 原核生物 最佳选择RNase缺失个体。</p><p>3、合适分离纯化介质的选择,用于蛋白质分离纯化的常用介质是纤维素，葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶。理想的分离纯化介质应具有以下特点： 对目标蛋白有较高的分辨率 对目标蛋白不会造成变性 化学和机械性能稳定，重复性好 球形，颗粒直径均匀 价格低廉,离子范围,大分子范围,微粒子范围,细粒子范围,粗粒子范围,微米,10-4,10-3,10-2,10-1,1,10,102,反渗透,纳米过滤,超滤,微滤,透析,电渗析,六种膜分离过程分离的粒子大小范围。</p><p>4、第六章 外源基因的表达,基因工程技术的核心是基因表达技术。 基因表达是指结构基因在调控序列的作用下转录成mRNA，经加工后在核糖体的协助下又转译出相应的基因产物蛋白质，再在受体细胞环境中经修饰而显示出相应的功能。从基因到有功能的产物这整个转录、转译及所有的加工过程就是基因表达的过程，它是在一系列酶和调控序列的共同作用下完成的。,基因重组的主要目的是要使目的基因在某一细胞中能得到高效表达，即产生人。</p>