标准解读

《GB/T 34800-2017 蛋白酶K酶活力及杂质检测方法》是一项国家标准,该标准规定了蛋白酶K的酶活力测定方法以及对其可能含有的几种特定杂质进行检测的方法。适用于以微生物发酵法制得的蛋白酶K的质量控制。

根据此标准,对于蛋白酶K酶活力的测定采用酪蛋白作为底物,在特定条件下(如pH值、温度)下与蛋白酶K反应一定时间后,通过测量未被分解的酪蛋白量或产生的氨基酸/肽类产物来间接反映酶活力大小。具体操作步骤包括样品准备、反应条件设定、终止反应、离心分离等环节,并利用紫外分光光度法或其他适当方法测定吸光度变化,从而计算出单位时间内底物消耗量或产物生成量,以此为依据评估酶活力。

此外,《GB/T 34800-2017》还涵盖了对蛋白酶K中某些潜在有害物质如重金属、残留溶剂等的检测要求。这些杂质含量的限制旨在确保产品安全性和纯度达到预期水平。检测过程中需按照标准指定的方法执行,比如使用原子吸收光谱法测定重金属含量;采用气相色谱法分析残留溶剂种类及其浓度等。

本标准提供了详细的实验流程指导和技术参数设置建议,有助于相关企业和研究机构准确高效地完成蛋白酶K质量评价工作。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
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ICS07080 A 21 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T348002017 蛋白酶 K 酶活力及杂质检测方法 DetectionmethodofactivityandimpurityofproteinaseK2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 蛋白酶 K 酶活力及杂质检测方法 GB/T348002017 * 中 国 标 准 出 版 社 出 版 发 行北京市朝阳区和平里西街甲 号 2 (100029) 北京市西城区三里河北街 号 16 (100045) 网址 : 服务热线 :400-168-0010 年 月第一版 2017 11 * 书号 :1550661-57419 版权专有 侵权必究 GB/T348002017 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。 本标准由中国标准化研究院提出并归口 。 本标准起草单位 东营瑞达生物科技有限公司 中国标准化研究院 中国生物技术发展中心 河北农 : 、 、 、业大学 浙江工商大学 合肥工业大学 河北省出入境检验检疫局 泉州市标准化研究所 北京市食品科 、 、 、 、 、学研究院 河北食品检验研究院 河南大学 、 、 。 本标准主要起草人 方存林 马爱进 苏 月 孙 纪 录 王 彦 波 郑 磊 刘 道 亮 林 清 山 孙 勇 云 振 宇 : 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、傅玲琳 赵琳 吴琦 周魏 康文艺 陈新凯 、 、 、 、 、 。 GB/T348002017 蛋白酶 K 酶活力及杂质检测方法1 范围 本标准规定了蛋白酶 检测原理 仪器设备及器具 主要试剂 分析步骤和结果分析 K 、 、 、 。 本标准适用于生化试剂蛋白酶 产品的生产和检测 K 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 核糖核酸酶活力检测方法 GB/T34222 脱氧核糖核酸酶活力检测方法 GB/T34801 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。31 . 蛋白酶 K proteinaseK 能水解天然角蛋白 的一种丝氨酸蛋白酶 (keratin) 。 注 按产品形态分为固态和液态 : 。32 . 蛋白酶 K 酶活力单位 proteinaseKactivityunit 在 和 条件下 在 内水解牛血红蛋白产生 酚基氨基酸的酶量 57 pH8.0 , 1min 1mol 。 注 一个酶活力单位以 表示 : U 。4 原理 蛋白酶 可催化脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键断裂 它在 和 条件下 K 。 57 pH8.0 , 水解牛血红蛋白底物产生含有酚基的氨基酸 在碱性条件下 可将福林 试剂还原 生成钼蓝与钨 ; , (Folin) , 蓝 其颜色的深浅与酚基氨基酸含量成正比 通过在 测定其吸光度 得到水解产生的酚基氨基 , 。 680nm , 酸的量 进而计算蛋白酶 酶活力 , K 。5 仪器设备及器具 51 恒温水浴锅 精度为 . : 0.1 。52 计 精度为 单位

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