3种不同方法提取牛至挥发精油及体外抑菌作用研究

extraction， SDE)和 微 波 辅 助 水 蒸 气 提 取 法 鲜 见 报 道 ，236 2013, Vol.34, No.02 食品科学 分 析 检 测3 种 不 同 方 法 提 取 牛 至 挥 发 精 油 及体 外 抑 菌 作 用 研 究赵 海 伊 ， 卫 飞 ， 周 才 琼 *(西 南 大 学 食 品 科 学 学 院 ， 重 庆 市 特 色 食 品 工 程 技 术 研 究 中 心 ， 重 庆 400716)摘 要 ： 采 用 水 蒸 气 蒸 馏 法 、 同 时 蒸 馏 萃 取 法 和 微 波 辅 助 水 蒸 气 法 提 取 牛 至 挥 发 精 油 ， 并 用 气 质 联 用 分 离 鉴 定 ， 比较 不 同 提 取 方 法 精 油 的 得 率 及 所 得 精 油 中 具 有 抑 菌 功 能 的 挥 发 性 成 分 组 成 差 异 。 将 所 得 精 油 进 行 体 外 抑 菌 试 验 ， 比较 3 种 方 法 所 得 精 油 对 于 供 试 菌 的 最 小 抑 菌 浓 度 。 结 果 显 示 3 种 方 法 均 得 到 不 同 含 量 的 醇 、 烃 、 酸 、 醛 、 酮 、 酯 和 酚类 物 质 ， 其 主 要 具 有 抑 菌 功 能 的 挥 发 性 物 质 为 石 竹 烯 、-水 芹 烯 、 蒈 烯 和 柠 檬 烯 等 。关 键 词 ： 牛 至 ； 水 蒸 气 蒸 馏 法 ； 同 时 蒸 馏 萃 取 法 ； 微 波 辅 助 水 蒸 气 法 ； 挥 发 性 物 质Effect of Extraction Methods on the Chemical Composition and Antibacterial Activity in vitro of Essential Oil fromWhole Plants of Origanum vulgare L.ZHAO Hai-yi， WEI Fei， ZHOU Cai-qiong*(Chongqing Special Food Engineering Technology Research Center, College of Food Science, Southwest University,Chongqing 400716, China)Abstract： Essential oils were extracted from whole plants of Origanum vulgare L. by three different extraction methods,steam distillation, simultaneous distillation extraction and microwave-assisted steam distillation, and their chemicalcomponents were separated and identified by GC-MS to investigate the effect of extraction methods on the yield, volatilecomposition and antibacterial compounds of essential oil. The antibacterial activities in vitro of three essential oils againstthe tested strains were evaluated by measuring minimum inhibitory concentration (MIC). All the extracted essential oils werefound to contain alcohols, hydrocarbons, acids, aldehydes, ketones, esters and phenols, but in different quantities. The majorvolatile antibacterial compounds in them were cryophllene, beta- phellandrene, careen, cyclohexane and limonene.Key words： Origanum vulgare L.； steam distillation； simultaneous distillation extraction； microwave-assisted steamdistillation； volatile compounds中 图 分 类 号 ： TS207.3 文 献 标 志 码 ： A 文 章 编 号 ： 1002-6630(2013)02-0236-05牛 至 ( O r i g a n u m v u l g a re L . ) 为 唇 形 科 牛 至 属(Origanum)植 物 ， 味 辛 、 性 凉 、 无 毒 。 全 草 可 提 取 芳 香油 ， 也 可 用 作 药 用 植 物 ， 具 有 解 表 、 理 气 、 化 湿 等 功效，可用于治疗中暑、感冒、头痛、急性肠胃炎等，在的挥发性成分进行分离鉴定，并比较分析其中主要挥发成分和牛至精油的功能相关性，为开发利用牛至资源提供 科 学 参 考 。我国主要分布在华北、西北及长江以南各地。牛至全草的挥发精油具有抑菌和抗氧化等功效，被当作一种新型抗生素添加在饲料中，并且由于其浓郁的香味和良好的11.1材 料 与 试 剂抗 氧 化 性 被 广 泛 用 于 饮 料 、 果 酱 、 化 妆 品 和 香 水 中 1-3。 牛 至 云 南 西 双 版 纳 产 ， 经 鉴 定 为 唇 形 科 植 物 牛 至目 前 提 取 牛 至 挥 发 精 油 的 方 法 多 见 传 统 的 水 蒸气 提 取 法 ， 同 时 蒸 馏 萃 取 法 (simultaneous distillation4本 实 验 采 用 上 述 3 种 方 法 提 取 牛 至 挥 发 精 油 ， 用 气 质 联 用(gas chromatography-mass spectrometry， GC-MS)对 所 得 到Origanum vulgare L.。取 40 干 燥 至 质 量 恒 定 的 牛 至 全 草 ， 粉 碎 过 40 目筛 。 得 牛 至 样 品 粉 ， 4 贮 藏 备 用 。受 试 菌 株 ： 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (Stapgylococus aureus)、 大肠 杆 菌 (Escherichia coli)、 枯 草 杆 菌 (Bacillus Sukatilis)、 酿收 稿 日 期 ： 2011-11-06作 者 简 介 ： 赵 海 伊 (1986)， 女 ， 硕 士 研 究 生 ， 研 究 方 向 为 食 品 化 学 与 营 养 学 。 E-mail： *通 信 作 者 ： 周 才 琼 (1964)， 女 ， 教 授 ， 博 士 ， 研 究 方 向 为 食 品 营 养 化 学 。 E-mail： 02-分 析 检 测 -02.indd 236 2013-1-29 16:21:25化 法 计 算 各 化 合 物 的 挥 发 油 中 的 相 对 含 量 。 分 析 检 测 食品科学 2013, Vol.34, No.02 237酒 酵 母 (Sacchromuces cerevisiae)、 黑 曲 霉 (Asperyillus nigar-van)， 由 西 南 大 学 食 品 学 院 和 资 源 环 境 学 院 实 验 室 提 供 。培 养 基 ： 细 菌 采 用 营 养 琼 脂 培 养 基 ， 真 菌 采 用 PDA马 铃 薯 蔗 糖 琼 脂 培 养 基 。采 取 含 药 培 养 基 法 6-7测 定 各 方 法 中 不 同 浓 度 的 牛 至精 油 的 最 小 抑 菌 浓 度 (MIC)。丙 酮 作 为 稀 释 剂 ， 分 别 将 挥 发 油 配 制 成 不 同 质 量浓 度 的 稀 释 液 (0.1、 0.2、 0.4、 0.6、 0.8mg/mL 和 1.0mg/1.2 仪 器 与 设 备 mL)， 向 每 个 灭 菌 冷 凝 后 的 培 养 皿 内 倒 入 15 20mL 灭 菌MAS-II 型 微 波 快 速 制 样 系 统 上 海 新 仪 微 波 化 学 科 培养基，然后分别加入各个不同质量浓度的牛至稀释液技 有 限 公 司 ； QP2010 气 相 色 谱 -质 谱 联 用 仪 日 本 岛 津 1mL， 立 即 摇 匀 后 放 置 冷 却 ， 做 成 含 药 培 养 基 。 用 移 液公 司 ； RE-52A 旋 转 蒸 发 仪 上 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 ； 水 蒸 器 枪 吸 取 已 调 节 好 浓 度 为 106 107的 供 试 菌 液 0.1mL 于 含气 蒸 馏 提 取 装 置 、 SDE 同 时 蒸 馏 提 取 装 置 重 庆 北 碚 玻 药培养皿表面，用灭菌涂布器涂布均匀。待菌液干了之璃 仪 器 厂 ； SW-CJ-1FD 型 洁 净 工 作 台术 有 限 公 司 。苏 州 安 泰 空 气 技 后 ， 霉 菌 酵 母 放 28 培 养 箱 内 培 养 48h， 细 菌 放 37 培 养24h。 丙 酮 做 空 白 对 照 ， 每 个 梯 度 下 每 个 供 试 菌 种 做 3 组1.3 方 法 重 复 。1.3.1 挥 发 精 油 提 取 方 法微 波 辅 助 水 蒸 气 法 ： 取 40g 牛 至 样 品 加 入 1000mL 圆 2底 烧 瓶 中 ， 按 料 液 比 1:10 加 入 蒸 馏 水 后 ， 800W 微 波 环 境处 理 3min， 然 后 水 蒸 气 微 沸 提 取 4h。 用 重 蒸 乙 醚 多 次 萃 2.1 不 同 提 取 方 法 精 油 得 率取挥发油，收集萃取液，经无水硫酸钠干燥、过滤，滤液转入浓缩瓶中，常压蒸馏浓缩至无乙醚气味，得挥发油 ， 备 用 。SDE 法 ： 取 样 品 40g， 置 于 1000mL 圆 底 烧 瓶 ， 加 入400mL 蒸 馏 水 和 沸 石 ， 连 接 于 SDE 装 置 一 端 ， 用 电 热 套加 热 ， 电 热 套 电 压 保 持 在 100V 左 右 ， 另 一 端 连 接 内 装40mL 二 氯 甲 烷 的 100mL 烧 瓶 ， 60 水 浴 加 热 ， 同 时 蒸 馏萃 取 6h。 以 无 水 硫 酸 钠 在 4 冰 箱 中 脱 水 12h、 过 滤 、 滤液装入浓缩瓶中，常压浓缩至无二氯甲烷气味，得挥发牛 至 精 油 提 取 率 和 精 油 特 性 见 表 1。 水 蒸 气 提 取 法 提取温度高，提取时间相对长，得率较低；微波辅助水蒸气提取法与水蒸气法所得精油外观差异不大，但经过微波 处 理 ， 精 油 提 取 率 提 高 ； SDE 法 提 取 时 间 相 对 较 短 ，得 率 最 高 且 所 得 挥 发 油 呈 黏 稠 状 深 黄 色 透 明 油 状 液 体 。表 1 3 种 不 同 提 取 方 法 所 得 牛 至 挥 发 精 油 的 比 较Table 1 Comparison of yield and appearance characteristics ofessential oil extracted from whole plants of Origanum vulgare L. bydifferent methods油 ， 备 用 。水 蒸 气 提 取 法 ： 取 40g 样 品 置 于 1000mL 圆 底 烧 瓶中 ， 按 照 料 液 比 1:10 加 入 蒸 馏 水 ， 保 持 微 沸 ， 蒸 馏 6h，方 法水 蒸 气 提 取 法SDE 提 取 法微 波 辅 助 水 蒸 气 提 取 法精 油 特 性浅 黄 色 透 明 油 状 液 体黏 稠 状 深 黄 色 透 明 油 状 液 体浅 黄 色 透 明 油 状 液 体得 率 /%1.4930.0472.0640.0251.7370.312用 重 蒸 乙 醚 多 次 萃 取 。 收 集 萃 取 液 ， 经 无 水 硫 酸 钠 干燥，过滤，滤液转入浓缩瓶中，常压蒸馏浓缩至无乙醚气 味 ， 得 挥 发 油 液 ， 备 用 。2.2 牛 至 精 油 GC-MS 分 析水 蒸 气 蒸 馏 法 、 SDE 法 和 微 波 辅 助 水 蒸 气 蒸 馏 牛 至1.3.2 GC-MS 检 测 条 件 挥 发 物 种 类 及 相 对 含 量 见 表 2。色 谱 条 件 ： 柱 箱 温 度 50 ； 进 样 口 温 度 230 ； 总 流量 14mL/min； 柱 流 量 1.00mL/min； 分 流 比 10:1； 供 试 品 溶液 进 样 量 1L； 程 序 升 温 ： 50 ， 保 持 4min； 5 /min 升到 100 ； 3 /min 升 到 140 ； 再 以 10 /min 升 到 230 ，保 持 3min。质 谱 条 件 ： 电 子 电 离 源 (electron ionization， EI)； 电子 能 量 70eV； 离 子 源 温 度 230 ； 接 口 温 度 230 ； 溶 剂延 时 1.5min。水 蒸 气 蒸 馏 法 挥 发 物 质 85 种 ， 主 要 包 括 醇 、 烯 、烷 、 酮 和 酸 类 ， 其 种 类 和 相 对 含 量 分 别 为 23(52.28%)、17(30.93%)、 11(5.73%)、 8(0.87%)和 11(2.02%)。 相 对含 量 较 高 的 有 3-环 己 烯 -1-醇 (27.11%)、 1,4-环 己 二 烯(11.85%)、 双 环 庚 烯 3,1,0二 丙 基 -2-醇 (8.1%)、 2-环 己烯 -1-醇 (5.55%)、 石 竹 烯 (4.38%)、 -水 芹 烯 (4.19%)、 环 己烷 (3.83%)和 蒈 烯 (3.73%)。SDE 法 挥 发 性 物 质 77 种 ， 主 要 包 括 醇 、 烯 、 烷 、1.3.3 挥 发 性 化 合 物 鉴 定 酮 和 酸 类 ， 其 种 类 和 相 对 含 量 分 别 为 24(55.16%)、通 过 质 谱 图 库 对 GC-MS 分 析 鉴 定 的 挥 发 性 成 分 进 行解析，并结合有风味文献进行人工谱图解析确定；以扣除 溶 剂 峰 的 色 谱 图 全 部 峰 面 积 作 为 100%， 按 峰 面 积 归 一514(33.1%)、 5(4.61%)、 7(0.81%)和 5(0.15%)。 相 对 含 量较 高 的 成 分 有 2-环 己 烯 -1-醇 (12.24%)、 3-环 己 烯 -1-醇(26.84%)、 1,4-环 己 二 烯 (9.76%)、 1,3-环 己 二 烯 (5.67%)石竹 烯 (5.91%)、 环 己 烷 (3.87%)、 双 环 庚 烯 3,1,0己 烷 -2-醇1.3.4 抑 菌 实 验 (3.77%)、 -水 芹 烯 (5.5%)、 蒈 烯 (4.38%)。02-分 析 检 测 -02.indd 237 2013-1-29 16:21:253种 方 法 处 理 所 得 牛 至 精 油 挥 发 物 质 GC-MS结 果ResultsofGC-MSanalysisofvolatilecompoundsinessentialoilextractedfromwholeplantsofOriganumvulgareL.bydifferentmethods238 2013, Vol.34, No.02 食品科学 分 析 检 测表 2Table 2化 合 物 种 类 提 取 方 法英 文 名 称 中 文 名 称 水 蒸 气 提 取 SDE 提 取 微 波 辅 助 水蒸 气 提 取terpenoidalpha.-pinenebicycle3,1,0hex-2-enealpha.-phellandrenecyclohexenebeta-phellandrene1,3-cyclohexadienelimoneneD-limonene1,3,6-octatriene1,4-cyclohexadiene(+)-4-carenen1,3,8-p-menthatriene5,8-dimethylenebicyclo2,2,2oct-2-enecarypophyllene1,4,7-cycloundecatrienebicyclo4,4,0dec-1-enecyclohexenebeta.-phellandrene4,7,7-trimethylbicyclo4,1,0hept-2-ene4-ethenyl-1,2-dimethyl-styrene1,3,6-heptatrienesqualenealkanebicycle3,1,1heptanecyclohexaneheptadecanedodecaneheneicosaneundecaneheptadecanecyclononasiloxanetetracosanehexatriacontanecyclodecasiloxanecyclopentanetricyclo4,3,1,0(2,5)decanedecane1,2-oxathianehexadecanedotriacontane11-biphenylbenzene,1-methyl-2-(1-methyl)-furan,2-ethyl-5-methyl-alcoholsbicyclo3,1,0hexan-2-ol1,6-octadien-3-ol2-cyclohexen-1-ol3-cyclohexen-1-ol5-isopropenyl-2-methyl-7-oxabicyclo4,1,0-heptan-2-olbicyclo3,1,1heptan-3-ol3-cyclohexene-1-methanol2,6-octadien-1-olp-mentha-1,5-dien-8-olbicyclo2,2,1heptan-2-olbicyclo3,1,1hept-2-en-4-olcis-p-mentha-2,8-dien-1-ol1H-cyclopropeazulen-4-olcedrol1H-cyclopropeazulen-7-olalpha.-cadinolisophytol9,12-octadecadien-1-ol1,6,10,14,18,22-tetracosahexaen-3-olphytol2,3-dehydro-1,8-cineole3-octanolbicyclo3,1,1hept-2-en-4-olcis-p-mentha-2,8-dien-1-ol4-hexen-1-olphenylethyl alcohol1,4-cyclohexadiene-1-methanolbicyclo2,2,1heptan-2-ol1H-cyclopropeazulen-7-ol2,6-octadien-1-olacidshexanoic acidhexadecanoic acideicosanoicoctadecanoic acid9-octadecenoic acid (Z)-萜 类-蒎 烯双 环 庚 烯 3,1,0-2-烯-水 芹 烯环 己 烯-水 芹 烯1,3-环 己 二 烯柠 檬 烯D-柠 檬 烯1,3,6-辛 三 烯1,4-环 己 二 烯蒈 稀1,3,8-P-孟 三 烯5,8-二 亚 甲 基 二 环 2,2,2-2-烯石 竹 稀1,4,7-葎 草 稀双 环 庚 烯4,4,0-1-烯环 己 烯-蒎 烯4,7,7-三 甲 基 双 环 4,1,0庚 -2 烯4-乙 烯 基 -1,2-二 甲 基 -苯 乙 烯1,3,6-庚 三 烯角 鲨 烯烷 烃 类双 环 庚 烯 3,1,1庚 烷环 己 烷十 七 烷十 二 烷二 十 一 烷十 一 烷十 八 烷十 八 甲 基 环 壬 硅 氧 烷二 十 四 烷三 十 六 烷二 十 甲 基 环 十 硅 烷环 戊 烷三 环 4,3,1,0(2,5)葵 烷葵 烷1,2-氧 硫 杂 环 己 烷十 六 烷三 十 二 烷1-1-联 苯苯 基,1-甲 基 -2-(1-甲 基 乙 基 )呋 喃 ，2-乙 烷 基 -5-甲 基醇 类双 环 庚 烯 3,1,0二 丙 基 -2-醇1,6-辛 三 烯 -3-醇2-环 己 烯 -1-醇3-环 己 烯 -1-醇5-异 丙 烯 基 -2-甲 基 -7-杂 氧 二 环 4,1,0庚 烷 -3-醇双 环 庚 烯3,1,1庚 烷 -3-醇3-环 己 烯 -1-甲 醇2,6-辛 二 烯 -1-醇P-薄 荷 -1,5-二 亚 乙 基 三 胺 -8-醇双 环 庚 烯2,2,1庚 烷 -2-醇顺 马 鞭 草 烯 醇顺 -P-薄 荷 -2,8-二 亚 乙 基 三 胺 -1-醇1 氢 -环 丙 烷 e奠 -4-醇雪 松 烯 醇1 氢 -环 丙 e奠 -7-醇-杜 松 醇异 植 物 醇9,12-十 八 碳 二 烯 醇1,6,10,14,18,22-二 十 四 碳 六 烯 -3-醇植 物 醇2,3-脱 氢 -1,8-桉 树 醇3-辛 醇二 环 庚 烷3,1,12 庚 烯 -4-醇独 联 体-p-薄 荷 -2,8-二 亚 乙 基 三 胺 -1-醇4-己 烯 -1-醇苯 基 乙 醇1,4-环 己 二 烯 -1-甲 醇双 环 庚 烯2,2,1庚 -2-醇1 氢 -环 丙 烷 e月 桂 烯 -7-醇2,6-辛 二 烯 -1-醇酸 类己 酸十 六 烷 酸二 十 烷 酸十 八 烷 酸9-十 八 烯 酸 (Z)-60.084.198.970.530.40.2311.853.730.060.14.380.260.020.041.363.830.040.020.080.010.010.050.230.030.070.021.440.018.12.645.5525.650.960.030.040.360.080.260.080.280.10.030.20.070.40.040.010.960.010.330.020.080.25.670.830.229.764.380.075.910.330.011.060.093.870.030.050.090.290.023.772.2912.2426.840.130.040.530.030.10.090.180.070.020.430.080.390.040.020.120.020.220.400.42.370.530.1544.260.540.240.080.088.190.290.060.781.00.726.0734.795.375.3302-分 析 检 测 -02.indd 238 2013-1-29 16:21:26/%6543210 -SDE 分 析 检 测 食品科学 2013, Vol.34, No.02 239续 表 2化 合 物 种 类 提 取 方 法英 文 名 称 中 文 名 称 水 蒸 气 提 取 SDE 提 取 微 波 辅 助 水蒸 气 提 取9,12-octadecadienoic acid(Z,Z)- 9,12-十 八 碳 二 烯 酸 (Z,Z)-1,2-benzenddicarboxylic acid 1,2-邻 苯 二 甲 酸1,2-benzenedicarboxylic acid 1,2-苯 二 甲 酸sulfurous acid 亚 硫 酸heptadecanoic acid 十 七 烷 酸9,12,15-octadecatrienoic acid 9,12,15-十 八 碳 三 烯 酸pentandioic acid 戊 二 酸pentadecanoic acid 十 五 烷 酸octadec-9-enoic acid 十 八 碳 二 烯 酸2-cyclopentene-1-carboxylic acid 2-环 戊 烯 -1-羧 酸ketones 酮 类1-octen-3-one 1-辛 三 烯 -3-酮3-heptanone 3-庚 酮1-(1,4-dimethyl-3-cyclohexen-1-yl)- 1-(1,4-二 甲 基 乙 基 -3-环 己 烯 -1)乙 酮cyclohexanone 环 己 酮cyclopentanone 环 戊 酮2-cyclohexen-1-one 2-环 己 烯 -1-酮cyclooctanone 环 辛 酮2-pentadecanone 2-十 五 烷 酮ethanone 乙 酮2-butanone 2-丁 酮1-pentanone 1-戊 酮ethanone 二 氢 香 芹 酮esters 酯 类bornul acetate 乙 酸 龙 脑 酯ethyl tridecanonate 丙 酸 乙 酯diethyl phthalate 邻 苯 二 甲 酸 二 乙 酯hydroxybenzenes 酚 类thymol 百 里 香 酚carvacrol 香 荆 芥 酚phenol 苯 酚aldehydes 醛 类pentadecanal- 十 五 醛furfural 糖 醛3-cyclopentene-1-acetaldehyde 3-环 戊 烯 -1-乙 醛hexanal 正 己 醛others 其 他naphthalene 臭 樟 脑caryophyllene oxide 石 竹 稀 氧 化 物phenanthrene 菲fluorene 芴1,5-dimethyl-1-vinyl-4-hexenyl-butyrate 1,5-二 甲 基 -1-乙 烯 基 -4-乙 烯 基 丁 酸 盐1H-cyclopropeazulene 1 氢 -环 丙 烷 e甘 菊 蓝-myrtenyl acetate 月 桂 烯 醋 酸 盐1H-indole 1-氢 -吲 哚7-isopropyl-1,1,4a-trimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a octahydrophenanthrene 7-异 丙 基 -1,1,4a-三 甲 基 -1,2,3,4,4a,9,10,10a-八 氢 菲微 波 辅 助 水 蒸 气 提 取 法 挥 发 性 物 质 40 种 ， 主 要包 括 烯 、 醇 、 烷 和 酸 类 ， 其 种 类 和 相 对 含 量 分 别 为17(35.41%)、 9(48.73%)、 5(9.4%)和 4(2.13%)。 烯 类 主 要有 -水芹烯、蒈烯、环己二烯、双环庚二烯、石竹烯等(占 总 含 量 的 31.83%)。牛至精油所含酚类、萜醇、萜烯类及一些醛类有很好 的 抑 菌 功 效 。 3 种 方 法 中 均 含 有 含 量 相 对 较 高 的 有 环 己烯 醇 、 石 竹 烯 、 -水 芹 烯 、 蒈 烯 和 环 己 烷 等 。0.810.110.090.010.030.070.030.160.030.120.030.020.130.050.020.010.050.060.030.40.00.010.10.050.050.060.010.030.030.050.080.120.050.081.470.10.050.122.3 牛 至 精 油 中 具 有 抑 菌 功 能 的 挥 发 性 成 分 比 较 分 析2.3.1 具 有 抑 菌 功 能 的 萜 类 化 合 物 的 变 化 图 1 具 有 抑 菌 功 能 的 主 要 萜 类 化 合 物 的 变 化萜 类 是 挥 发 油 的 主 要 成 分 ， 特 别 是 挥 发 油 中 沸 点 Table 1 Effect of extraction methods on the composition of较 低 部 分 的 主 要 组 成 ， 具 有 香 气 和 一 定 的 抑 菌 生 理 活性 8-9。 牛 至 精 油 主 要 含 石 竹 稀 、 -蒎 烯 、 -蒎 烯 、 柠 檬antibacterial terpenes from whole plants of Origanum vulgare L.烯 、 松 油 醇 、 芳 樟 醇 等 萜 类 及 其 衍 生 物 。 3 种 提 取 方 法 均 2.3.2 牛 至 挥 发 精 油 的 抑 菌 活 性 比 较 分 析含 -水 芹 烯 、 D-柠檬烯、蒈稀和石竹稀。经比较分析，SDE 法 所 得 精 油 主 要 抑 菌 化 合 物 相 对 含 量 较 其 他 方 法高。水蒸气法中 -水芹烯含量高于微波辅助提取，微波辅助提取法得到的石竹稀、蒈稀和 D-柠 檬 烯 含 量 均 高 于水 蒸 气 法 (图 1)。分 别 用 3 种 提 取 方 法 得 到 的 不 同 浓 度 的 牛 至 挥 发 精 油进行抑菌活性实验，结果如表 3 所 示 。 3 种方法提取的牛至精油对本实验所选用的细菌和酵母均有一定的抑制作用，但对黑曲霉抑制作用较弱。其中，金黄色葡萄球菌和 酿 酒 酵 母 菌 对 SDE 法 所 得 精 油 较 为 敏 感 ， MIC 较 其 他02-分 析 检 测 -02.indd 239 2013-1-29 16:21:26对照 (mg/mL)+ + + + 0.8 酿酒酵母+ + + 0.6 酿酒酵母240 2013, Vol.34, No.02 食品科学 分 析 检 测两 种 方 法 低 均 为 0.6mg/mL， 水 蒸 气 法 所 得 精 油 对 大 肠 杆菌 抑 制 作 用 比 其 他 两 种 方 法 要 好 。表 3 不 同 提 取 方 法 所 得 精 油 对 供 试 菌 MICTable 3 MIC of oregano oil extracted by three methods against fivepathogens质量浓度 /(mg/mL) 空白 MIC/提取方法 菌种 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0金黄色葡萄球菌 + + + 0.6大肠杆菌 + + 0.4SDE提取法 枯草芽胞杆菌 + + 0.8酿酒酵母+ + + 0.6黑曲霉+ + + + + 1.0金黄色葡萄球菌 + + + + 0.8水蒸气 大肠杆菌 + 0.2枯草芽胞杆菌+ + + + 0.4提取法黑曲霉 + + + + + 1.0金黄色葡萄球菌 + + + + 0.8微波辅助 大肠杆菌 + + 0.4枯草芽胞杆菌+ + + 0.6水蒸气提取黑曲霉 + + + + + 1.0注 ： “+”表 示 菌 落 生 长 良 好 没 有 抑 制 作 用 ； “”表 示 肉 眼 观 察 到 没 有 菌落 生 长 。质、萜醇和萜烯等成分，具有抗菌、抑菌和一定的抗氧化 功 效 。 SDE 法 提 取 精 油 得 率 最 高 、 微 波 辅 助 水 蒸 气 蒸馏 次 之 、 水 蒸 气 蒸 馏 法 得 率 最 低 。 3 种 提 取 方 法 精 油 主 要成分差异不大。本实验所得牛至精油中含量相对较高的化 合 物 是 醇 类 ， 相 同 成 分 中 相 对 含 量 在 3%以 上 的 有 环 己烯醇、石竹烯、 -水芹烯、蒈烯、环己烷等。抑菌实验表 明 ， SDE 法 适 于 牛 至 挥 发 精 油 的 提 取 ， 可 最 大 程 度 保留 牛 至 挥 发 油 中 的 抑 菌 功 效 成 分 ； 3 种 提 取 方 法 所 得 牛 至精 油 抑 菌 效 果 依 次 为 SDE 微 波 辅 助 水 蒸 气 提 取 法 水蒸 气 提 取 法 。参 考 文 献 ：1 FSAHIN, GLLCE M, DAFERERE, et al. Biological activitiesof the essential oils and methanol extract of Origanum vulgare ssp.vulgare in the Eastern Anatolia region of TurkeyJ. Food Control,2004, 15(7): 550.2 朱 斌 , 程 向 炜 , 刘 迎 新 . 牛 至 油 化 学 成 分 、 药 理 活 性 及 提 取 方 法 研究 进 展 J. 中 药 材 , 2007, 30(8): 1038.3 结 论34袁 果 , 先 静 缄 , 袁 家 谟 . 黔 产 牛 至 叶 的 挥 发 油 成 分 分 析 J. 贵 州 农 业科 学 , 1997, 25(3): 41.LUCCHESI M E, SMADJAJ, BRADSHAW S, et al. Solvent free水 蒸 气 蒸 馏 法 的 优 点