消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全课件

,第五节 抑制或杀灭微生物的理化因素,赣南医学院病原生物学教研室,曹镐禄TELQ：330223876,disinfection,杀死物体上病原微生物,并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。,杀灭物体上所有微生物的方法。,防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。,Sterilization,antisepsis,防腐,灭菌,消毒,一、消毒灭菌的常用术语,无菌,asepsis,不存在活菌的意思。,无菌操作,Antiseptic technique,防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。,是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。,清洁,cleaning,二、物理消毒灭菌的方法,（一）热力灭菌法,高温杀灭细菌,焚烧-废弃物品或动物尸体,烧灼-接种环、试管口,干烤-加热160-180 2小时 或25030min,干热灭菌法,红外线-波长0.771000m的电磁 波产生热效应。,湿热灭菌法,巴氏消毒法,6230min或71.730秒杀灭特定致病菌，如牛奶、酒类,煮沸消毒法,流通蒸汽消毒法,高压蒸汽灭菌法,间歇蒸汽灭菌法,103.4KPa，121.31520分钟，一般培养基、生理盐水、手术衣、手术器械等,饮水、食具、一般外科器械,食具、一般外科器械,不耐高温的含糖、牛奶等培养基,湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好,1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固,2、湿热的穿透力比干热大,3、湿热的蒸汽有潜热,原因,（二）辐射杀菌法,杀菌机理：,损伤DNA的构型，干扰DNA的复制和转录,紫外线穿透力较弱,不耐热物品的表面消毒,特 点：,应用范围：,空气消毒 手术室、传染病房、细菌实验室,1.紫外线,最佳波长：265-266nm,注意防护,杀菌机理:产生游离基,干扰DNA合成、破坏 细胞膜、酶系统紊乱,应用范围：,2.电离辐射,包括高速电子、射线和射线,一次性医用塑料制品的消毒,食品的消毒不破坏其营养成分,特点：射线穿透性差、作用时间短、 安全性好 射线穿透性强、作用时间慢、 安全性差,3.微波,杀菌机理:热效应 穿透性强用途：食品、非金属器械、检验室用 品、无菌室和病室中食品用 具、药杯及其他用品的消毒。,（三）滤过除菌法,用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌、真菌除去,以达到除菌目的，但不能除去病毒和支原体。,1.滤菌器 (filter）：液体除菌，如血清、毒素、 抗生素等。2.空气除菌：采用生物洁净技术。,滤器和层流室,（四）低温与干燥抑菌法,在低温状态下真空抽去水分,冷冻真空干燥法：,用途：保存菌种,（五）物理杀菌作用的影响因素热力灭菌： （）温度高低 （）作用时间长短 （）微生物的种类、生长期、有无芽胞日光与紫外线： （）照射时间、距离、强度 （）微生物的种类,作用机理： ()使菌体蛋白质变性或凝固。 ()干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白 与核酸的基团，使相关酶失去活性。 ()损伤细菌的细胞膜。,三、化学消毒灭菌法,（一）高效消毒剂 （high-level disinfectants） 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷（二）中效消毒剂 （intermediate-level disinfectants） 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂（三）低效消毒剂 （low-level disinfectants） 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾,四、消毒灭菌的运用,(一)医疗器械物品的消毒灭菌,1.高危器械物品：用时需进入无菌组织 的物品。所有这些物品都应该灭菌。 2.中危器械物品：用时不进入无菌组织 但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 3.低危器械物品：只接触未损伤皮肤但 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。 4.快速周转的医疗器械,（二）室内空气消毒灭菌 1. 物理消毒法 紫外线照射 滤过除菌2化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： 过氧乙酸喷雾、熏蒸； 过氧化氢喷雾； 二氧化氯溶液喷洒； 中草药点燃烟熏。,（三）手和皮肤的消毒（四）黏膜的消毒（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 （六）病人污染物品的消毒 （七）饮水的消毒 （八）环境的消毒,五、影响化学消毒灭菌效果的因素,消毒剂,细菌,环境,浓度,作用时间,物理状态,种类,有机物,温度,酸硷度,选择适当的消毒剂,低毒,价廉,低破坏,易贮藏,方便,有效,病原微生物实验室生物安全,生物安全（biosafety）： 是生物技术安全（safety of biote-chnology）的简称。 狭义：指现代生物技术的研究、开发、 应用及转基因生物可能对生物多 样性、生态环境和人类健康产生 潜在的危害。 广义：指与生物有关的各种因素对社会 、经济、人类健康及生态环境所 产生的危害或潜在风险。,一、病原微生物的分类,根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，病原微生物分为四类： 第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾 病的微生物，以及我国尚未发现或者已 经宣布消灭的微生物。 第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病， 比较容易直接或者间接在人与人、动物 与人、动物与动物间传播的微生物。,第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况 下对人、动物或环境不构成严重危害，传 播风险有限，实验室感染后很少引起严重 疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微 生物。 第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病 的微生物。如小鼠白血病病毒等。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。,二、病原微生物实验室的分级,三、实验室感染的控制 以及监督和法律责任,实验室发生高致病性病原微生物泄漏时，预防、控制措施包括：封闭被病原微生物污染的实验室或可能造成 病原微生物扩散的场所；开展流行病学调查；对病人进行隔离治疗，对相关人员进行医学 检查；对密切接触者进行医学观察；进行现场消毒；对染疫或者疑似染疫的动