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文档简介
HPV检测在宫颈癌诊治中的应用胡飞红在 2003年,香港天后级艺人,梅艳芳 身患癌症,在她刚刚过完 40岁生日后离开人世宫颈癌与 HPV关系豪森,德国人,2008年 10月诺贝尔奖获得者研究了人乳头状瘤病毒与宫颈癌的关系HPV型别与宫颈病变HPV病毒通过皮肤表面的微小创口侵入更多的 HPV病毒侵入到创口周围组织并进入上皮细胞病毒复制HPV检测在宫颈癌诊治中的临床意义常用 HPV检测方法的分析1.细胞学检查 传统巴氏涂片( CV) 液基薄层细胞学技术(TCT)2.组织学检查( 肉眼观察。阴道镜观察。组织检查)3.感染组织中 HPV蛋白的检测 4. HPV感染的血清学检查检测人体血清中是否存在有针对 HPV产生的抗体,通过免疫学方法进行检测 。检测人体血清中是否存在有针对 HPV产生的抗体,通过免疫学方法进行检测。HPV基因检测5. HPV基因组检测 1. 基于 PCR靶向扩增2. 基于 PCR产物分析 ,杂交分析1。基于 PCR靶向扩增2.基于 PCR产物分析2.基于 PCR产物杂交分析( 4)基因芯片技术杂交捕获法杂交捕获一代( HC- )试验可检测 9 种高危型 HPV ,包括 16 、 18 、 31 、 33 、 35 、 45 、 51 、 52 和 56 。所用的反应载体是试管;杂交捕获二代试验 (HC )原来的试管法改为 96 孔平板法,能同时检测 13 种高危型 HPV (16 、 18 、 31 、 33 、 35 、 39 、45 、 51 、 52 、 56 、 58 、 59 和 68) 。杂交捕获法捕获杂交法 ( 通过对病毒 DNA解链 ,杂交捕获 ,光信号放大获取结果)基本实验步骤如下:1. 样本 DNA 双链被释放并分解为核苷酸单链 ; 2. DNA 单链与 RNA 探针结合为 RNA DNA 杂交体 ; 3. 特异性抗体将 RNA DNA 杂交体固定在试管壁或微孔壁上 ; 4. 结合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与 RNA DNA 杂交体结合 ,使信号放大 ;5. 碱性磷酸酶使酶底物发光 ,判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量 ,从而确定 RNA DNA 杂交体的含量 。HCII唯一通过 FDA批准可在临床使用的 HPV技术DNA裂解 RNA-DNA杂交 抗体捕获 化学发光 计算机判读新发展的一项诊断技术,在 HPV分型中用寡核苷酸原位合成法,原理是将疾病的特征性基因片段或致病病原体片段固定芯片上,制成诊断芯片,提取患者样本中核酸行标记作探针,利用探针与芯片杂交,扫描杂交结果,判断基因型分型是否被感染,可诊断 HPV潜在感染,行早期预防基因芯片技术HPV基因芯片检测总结。总之,目前的 HPV分型检测技术主要基于聚合酶链反应。 HPV特定型别在宫颈疾病发展中的重要作用,考虑到 HPV型谱的多样性和多重性 HPV联合感染的高发率,准确的 HPV检测显得尤为重要。不断寻求更准确,快速有效的检测技术。注: 如何对待 HPV感染?1.HPV 感染较为常见2.多数 HPV 可以被清除 ,“ 一过性 ” 感染不致宫颈病变 3.少数持续性感染会引发宫颈病变 4.HPV致 CINI、 CINII、 CINIII到浸润癌需要相当长的时间,一般是 810年5.致宫颈癌的是高危型 HPV6.HPV(+)只说明是一种感染,并非是一种疾病 7.没有 HPV感染可以不得宫颈癌 , 因此避免
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