妇产科资料贡献

导师：郭钰珍教授研究生：颉丽MMP-7及 uPA在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义1研究背景n卵巢癌是女性三大生殖道恶性肿瘤之一，发病率为2.4%-5.6%，仅次于宫颈癌和宫体癌n卵巢深居盆腔，早期临床症状不明显n发展迅速，极易出现盆腹腔播散和淋巴结转移，手术或化疗后的高复发率也是造成死亡率高居不下的原因之一n寻找卵巢癌特异性标志物，早期诊断及防止卵巢癌的扩散、转移及复发成为当今防治卵巢癌的关键2研究背景n基底膜和胞外基质的降解是当今肿瘤学研究的重点和难点 。（ 图 1）n多种蛋白酶在分解细胞外基质和基底膜中起着极其重要的作用，尤其是基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类 nMMP-7和 uPA分别属于基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类3n LamininRMMP7 PMMP7MMP74MMP-7概述nMMP-7是基质金属蛋白酶家族中唯一的由上皮性肿瘤细胞特异表达的酶nMMP-7是一种锌离子依赖性的蛋白水解酶nMMPs是一多基因家族，目前已经分离并鉴定出这一家族约有 13个成员，作用底物不尽相同5分型 MMP序号 底物间质胶原酶 MMP-1、 -8、 -13、 -18 型胶原及 和 型胶原 型胶原酶（明胶酶） MMP-2 、 -9 、 、 型胶原，切割天然 、 、 、 型胶原基质溶解素 MMP-3、 -7、 -10 纤粘蛋白、层粘蛋白、弹性蛋白和多糖核心蛋白膜型 MMPs MMP-14、 -15 、 -16、 MT5-MMP 直接降解基质，激活 MMP-2和MMP-13其它类 MMP-4、 -5、 -6、 -20 未知StetlerStevenson将 MMPs分类及底物特性总结如下表6MMP-7的独特性nMMP-7不含有类血红素结合区，血管内皮细胞不分泌 MMP-7nMMP-7主要由纤维母细胞、巨噬细胞、肿瘤细胞所分泌 nMMP-7活化7MMP-7Pro-MMP-7TC巨噬细胞TC TC纤维母细胞 巨噬细胞纤维母细胞ECM、 BM降解PLGPLMMMPs8uPA概述nuPA是 PA的一种，与肿瘤浸润转移相关nuPA由两条二硫键相连， N端包括表皮生长因子（ EGF）功能区，它介导 uPA与肿瘤细胞上 uPAR结合，降解 ECM、 BM9uPA的独特性nuPA自身直接降解 BM、 ECMnuPA通过激活纤溶酶降解纤维蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖、板层素等nuPA通过激活的纤溶酶激活基质金属蛋白酶参与ECM、 BM降解10TCuPA内皮细胞纤维母细胞巨噬细胞 Pro-upa纤溶酶纤溶酶原uPA-RTCTCECM、BM降解TC11本实验研究的内容和意义 n采用免疫组化法检测正常卵巢组织、卵巢浆液性肿瘤中 MMP-7和 uPA 的表达n探讨 MMP-7、 uPA与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系及其相关性n为卵巢浆液性囊腺癌术后的腹腔化疗及残存癌灶的复发提供可靠的理论依据12材料和方法n取 2000年至 2006年兰大二院妇科手术切除并病理证实为卵巢浆液性肿瘤库存标本 68例，年龄 20-70岁 .其中 46例卵巢浆液性囊腺癌（恶性组）， 12例卵巢浆液性囊腺瘤（良性组）， 10例正常卵巢（正常组）n临床分期： 期 - 期 14例； 期 - 期 32例n病理分级：高分化 10例，中分化 16例、低分化 20例n经查阅患者病例将卵巢浆液性囊腺癌组分为：有盆腔浸润，腹膜淋巴转移组 42例，无盆腔浸润，无腹膜淋巴转移组 4例 13主要仪器 n低温冰箱、烘箱、微波炉、光学显微镜、显微照相系统、水浴振荡器、电热炉带盖的保湿器、耐高温塑料染色架、切片架、染色缸、吸水纸等14实验方法本实验依照免疫组化的步骤进行15结果判定n采用三个参数（即染色强度、阳性细胞数、和两者积分的乘积）的半定量的计数方法，着色强度记分标准：基本未着色 ,染色与背景相似者为 0分 ;着色浅,略高于背景者为 1分 ;中度着色 ,明显高于背景者为 2分 ;强染 ,着色深棕色者为 3分。阳性细胞数 0% 为 0分， 1%-10% 为 1分， 11%-50% 为 2分， 51%-80% 为 3分， 80% 为 4分。染色强度记分与阳性细胞数记分之积为最后得分： 0分为（ -）， 1-2分为（ +），3-4分为（ +）， 4分为（ +）。16统计学方法n应用 SPSS10.0统计软件包进行统计分析n组间采用卡方检验，双向有序列联分析n例数不足 40例采用费歇尔精确检测n两指标间采用 Spearsman等级相关分析n取 P0.05为差异有统计学意义17MMP-7和 uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达nMMP-7在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜、胞浆和间质细胞的胞浆中均有阳性表达；主要表达于深部浸润的癌巢，尤其在浸润的前沿；在卵巢浆液性囊腺瘤细胞的胞浆和间质中也有阳性表达nuPA蛋白在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜和胞浆中有阳性表达，分布不均 ,主要在肿瘤与周围正常组织交界处、肿瘤细胞与间质交界处18MMP-7和 uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达分组 例数 MMP-7 uPA+ % P + % P正常组 10 1 10.0 1 10.00.594 0.323良性组 12 2 16.7 4 33.3 0.001 0.001 恶性组 46 40 87.0 40 87.0 19MMP-7和 uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同临床分期中的表达MMP-7 uPA分期 例数 + + + + + + - 期 14 2 2 10 1 6 6 - 期 32 8 7 11 7 2 1820MMP-7和 uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同病理分级中的表达 MMP-7 uPA 分级 例数 + + + + + + 高分化 10 6 1 1 5 2 1 中分化 16 2 6 6 2 4 8 低分化 20 2 2 14 1 2 1521MMP-7及 uPA与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系浸润 MMP-7 uPA转移 例数 + % P + % P 有 42 38 90.5 39 92.90.022 0.001 无 4 2 50.0 1 25.022MMP-7和 uPA表达的相关性 n 经 Spearman等级相关分析得 r=0.573， P0.05,说明 MMP-7与 uPA的表达存在正相关， MMP-7的表达随 uPA表达的增高而增高。23MMP-7和 uPA表达的相关性MMP-7 uPA - + + + 合计- 18 2 2 1 23+ 2 8 1 2 13+ 1 2 2 3 8+ 1 2 5 16 24合计 24 13 9 21 6824结 论nMMP-7和 uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤中均有表达nMMP-7和 uPA在卵巢浆液性囊腺癌表达明显高于卵巢浆液性囊腺瘤， MMP-7和 uPA有助于卵巢浆液性肿瘤良恶性的判断nMMP-7和 uPA的表达随卵巢浆液性囊腺癌病理分级的降低、癌肿及淋巴转移而增高。 uPA随临床分期的增高而增高nMMP-7的表达强度与 uPA的表达强度存在正相关 25MMP-7在正