常见性病实验室检测技术ppt课件

性病实验室检测工作概述病原体淋球菌梅毒螺旋体生殖器疱疹病毒生殖道沙眼衣原体乳头瘤病毒HIV病毒杜克雷噬血杆菌衣原体念珠菌滴虫疥虫阴虱肝炎病毒病 种淋病梅毒 :生殖器疱疹 :生殖道沙眼衣原体感染 :尖锐湿疣 :HIV感染 /艾滋病 :软下疳 :性病性淋巴肉芽肿 :念珠菌性阴道炎 :滴虫性阴道病 :疥疮 :阴虱病 :肝炎（乙、丙）：梅毒淋病软下疳性病性淋巴肉芽肿非淋菌性尿道炎生殖器疱疹尖锐湿疣HIV/AIDS梅毒淋病软下疳性病性淋巴肉芽肿50-60年代经典性病80-90年代监测性病目 前传染法报告病例 监测性病梅毒淋病沙眼衣原体感染生殖器疱疹尖锐湿疣沙眼衣原体沙眼衣原体 : 30% 50%生殖支原体生殖支原体 : 10% 40%其它其它 : 20% 30%梅毒淋病HIV/AIDS1995-2010全国淋病流行状况1995-2010全国梅毒流行状况 卫生部于 2010年 6月 3日下发了关于 中国预防与控制梅毒规划（ 2010-2020年） 卫生部 2011年 2月 12日下发 预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案 性病防治管理办法 （修订征求意见稿） 即将下发6近期卫生部相关政策 /规划文件预防与控制措施 广泛开展宣传教育，普及梅毒防治知识 开展综合防治，阻断梅毒传播 提高监测检测质量，开展主动检测，梅毒早期发现 提供规范化梅毒医疗服务 预防和控制先天梅毒 加强国际合作和应用性研究7中国预防与控制梅毒规划 第十一条 国家级性病预防控制机构 ：（三）组织制定和完善性病实验室检测等技术规范，开展性病实验室检测质量控制，定期开展性病诊断试剂临床应用质量评价。 第十二条 省级及以下性病预防控制机构（四）组织开展本行政区域性病实验室检测质量控制 第十三条 性病诊疗业务的医疗机构 ：开展实验室检验质量控制8性病检测实验室能力建设与发展规划 (2011-2015)（上报稿）加强各级性病实验室的能力建设（ 1）国家性病参比实验室应具备 。 。（ 2）省级中心实验室应具备开展常见重要性病病原体的检测、药物敏感性检测以及质量评价的能力。（ 3）县（区）级以上医疗卫生机构应具备开展梅毒血清学初筛和确证试验、淋球菌培养以及生殖道沙眼衣原体抗原或核酸检测的能力；县（区）级以下的基层医疗机构至少应具备开展梅毒快速血清学检测的能力。101） 95%的省级以上医疗卫生机构能够开展梅毒血清学初筛和确证试验、淋球菌镜检和培养、衣原体抗原检测或核酸检测。 60%的省级以上医疗卫生机构能够开展淋球菌药物敏感性检测。2） 90%的地市级医疗卫生机构能够开展梅毒血清学初筛和确证试验、淋球菌镜检和培养、衣原体抗原检测或核酸检测。3） 85%的县区级医疗卫生机构能够开展梅毒血清学初筛和确证试验、淋球菌镜检和培养、衣原体抗原检测。4） 85%的县区级以下医疗卫生机构至少能够开展梅毒快速血清学检测。11 梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体感染 生殖器疱疹及其他一、梅 毒 性接触是主要的传染途径l 未经治疗的患者在感染后的 1年内最具有传染性l 随着病期的延长，传染性越来越小l 到感染后 2年，通过性接触一般无传染性 母 婴 传 播 在妊娠 7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者，虽已无性传播（病期 2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 ,病期越长，传染性越小 ; 一期梅毒硬下疳和 (或 )腹股沟淋巴结肿大 二期梅毒可有一期梅毒史，病期在 2年以内有多形性皮疹、扁平湿疣等 三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在 2年以上皮肤黏膜损害等，包括神经梅毒、心血管梅毒 隐性（潜伏）梅毒早期：病期在 2年以内；晚期：病期在 2年以上。无任何梅毒性的症状和体征 胎传（先天）梅毒早期：在 2岁前发生；晚期：在 2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现疑似病例、确证病例诊断依据： 病史 症状 实验室检查梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义 病原学检测 血清学检测 小而纤细的螺旋状微生物 长 5 20m，粗细 0.2m 有 6 12个规则的螺旋 基本结构为一原生质的圆柱体，为两层膜所围绕 行动缓慢而有规律 - 围绕其长轴旋转中前后移动 - 伸缩其圈间之距离而移动 - 全身弯曲如蛇行 原理： 一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 方法： 病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法 病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。 如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，21梅毒血清学检测方法(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（非特异性梅毒抗体）(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验（特异性梅毒抗体）两类方法。问题问题 1：为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？：为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？ 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免应答，在 3周 -4周产生抗类脂抗原的抗体（反应素）。抗体主要是 IgM和 IgG混合抗体。 未经治疗的病人，其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。问题问题 2：临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量：临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测方法两种检测方法 所有非梅毒螺旋体抗原血清试验的抗原基本成分都是一样 方法包括：（ 1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)（ 2）甲苯胺红不加热血清试验（ TRUST）（ 3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似VDRL试验 USRRPR/TRUSTVDRL试验n 抗原组成： 0.03%心磷脂n 0.21%卵磷脂n 0.90%胆固醇n 抗原需新鲜配制 不能保存n 待检血清需灭活n 目前主要用于脑脊液检查n 显微镜观测结果USR试验n 是 VDRL试验的改良n 抗原组成：同 VDRL，另含（ 1）乙二胺四醋酸(EDTA) 使抗原可长期保存，能维持一年；（ 2）含有氯化胆碱 对血清能起到化学灭活的作用 不必加热灭活（ 3）制成试剂盒 使用方便RPR试验 在 USR试剂成分的基础上 加入黑色碳颗粒 作为沉淀的指示物 用白色的硬纸片替代玻片 血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒 携带方便 操作简单 价格便宜 TRUSTn 其原理和成分与 RPR试验相同n 用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒 n 其余的特点均与 RPR相同1、 仪器：水平旋转仪。2、 定性试验n 加样：吸取 0.05mL血清 (浆 )放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内n 加抗原：将抗原轻轻摇匀，用 9号针头加 1滴抗原n 反应：将卡片置水平旋转仪旋转 8分钟，立即在亮光下观察结果3、 定量试验n稀释夜准备：在圈内加入 50uL生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。n加样：吸取 50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。n 下同定性