中药夜大实验二

第二次实验内容一、显微镜示教：（附图片）一、显微镜示教：（附图片）二、实物示教：二、实物示教：1、比较金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别2、溶血性链球菌菌落的特点3、肠道杆菌在 ss培养基上菌落的特征4、真菌菌落类型5、抗链球菌溶血素 “ O” 抗体试验6、肥达试验（试管定量凝集反应）三、动物实验三、动物实验 -破伤风外毒素的致病作用及破伤风抗毒素破伤风外毒素的致病作用及破伤风抗毒素的保护（示教）的保护（示教）附：抗酸性染色法步骤（操作示教）附：抗酸性染色法步骤（操作示教）G-， 肾形，成双排列，流脑的病原菌白喉杆菌 （放大 1000倍）白喉病的病原体。棒状，用特殊染色，可见菌体为棕黄色，异染颗粒为深兰色。结核杆菌（痰液涂片）细长的杆菌，分枝生长，染色时需加热或延长染色时间才能着色，但一经着色之后，即能抵抗盐酸、酒精的脱色，故又称抗酸杆菌。钩端螺旋体（放大 1000倍）梅毒螺旋体（放大 1000倍）由 8-14个螺旋组成，长 8-14um， 直径约0.25-0.3um， 螺旋紧密，两端尖细。荚膜菌细胞新型隐球菌（墨汁染色法 ）酵母型的真菌 ,菌体呈球形或卵圆形，其中心部为该菌细胞，外围包有宽阔的荚膜，直径约 5-20um,发芽生长二、实物示教二、实物示教1、比较金黄色葡萄菌与表皮葡萄球菌的区别：普通平板上 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的比较血平板上 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别金黄色葡萄球菌的菌落特点表皮葡萄球菌的菌落 血浆凝固酶试验2 观察乙型溶血性链球菌的菌落 白色 小 有溶血环溶血性链球菌菌落的特点：溶血性链球菌菌落的特点：菌落细小，周围有较宽而透亮的溶血环3、肠道杆菌在、肠道杆菌在 ss培养基上菌落的特征：培养基上菌落的特征：肠道致病菌：菌落较小，透明无色（或淡黄色） 乳糖（ -）肠道非致病菌：菌落较大，红色 乳糖（ + ） 4、真菌菌落的类型：、真菌菌落的类型：酵母型（新型隐球菌） -湿润、柔软、致密。丝状型（皮肤丝状菌） -表面疏松，有菌丝伸入培养基内。SS培养基5、抗链球菌溶血素、抗链球菌溶血素 “ O” 抗体试验抗体试验（抗体中和试验）（抗体中和试验）原理：原理： 溶血性链球菌能产生溶血素 “ O” ， 大多患者感染本菌后 2-3周到病愈后数月，血清中可查到溶血素“ O” 抗体 （简称抗 “ O” 抗体） ， 可取患者血清检查之。方法：方法：溶血素 “ O” +患者血清 +红细胞 不溶血 （ +） 溶血 （ -）意义：意义： 正常人抗抗体效价在 500单位以下，超过此值可辅助风湿病的诊断。6、肥达试验（试管定量凝集反应）、肥达试验（试管定量凝集反应）已知伤寒杆菌 H、 O抗原 病人血清甲、乙副伤寒杆菌 H抗原 凝集反应检查相应抗体含量有诊断意义的效价：伤寒杆菌抗体 1： 160肥达试验的原理 已知抗原 +未知抗体 凝集块 伤寒 “O”抗原 “H”抗原 甲副 “H” 乙副 “H： 判断：抗体效价 “+”所对应的最高稀释倍数 +:液体清澈透明，菌体全部被凝集成块，沉于管底 +： 液体较透明，菌体大部分被凝集而沉于管底 +：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物 +液体较混浊，可见少量凝集沉淀物 ：液体的混浊，无沉淀三、动物实验三、动物实验 -破伤风外毒素的致病作用破伤风外毒素的致病作用 及破伤风抗毒素的保护及破伤风抗毒素的保护1、毒力实验：、毒力实验：破伤风外毒素（一定量） 注射 小白鼠肌肉结果观察：结果观察： 1-2天后，注射部位强直性痉挛，全身肌肉痉挛而死。2、保护力实验：、保护力实验： 先给小白鼠注射破伤风抗毒素一段时间后再注射破伤风外毒素，小白鼠不发病。四、抗酸性染色法步骤（操作示教）：四、抗酸性染色法步骤（操作示教）：初染：初染： 5%石炭酸复红 4-5滴，微加热 3-5min,水洗。脱色：脱色： 3%盐